低氧下K562细胞红系分化模型的构建
摘要： 目的 通过筛选更优条件,构建不同低氧(1％和3％O2)下K562细胞红系分化模型,为后期miRNA的检测奠定基础.方法 将K562细胞分别置于常氧、低氧(1％和3％O2)条件下经不同浓度(30和40μM)氯化血红素(hemin)诱导0、48、72、96 h,以不同培养时间下的细胞浓度增长速率判断指数生长期;用联苯胺染色法选择合适的hemin浓度;结合联苯胺染色阳性细胞率、γ-globin的mRNA水平的变化以及CD235a的表达水平的变化判断细胞分化效率;MTS细胞增殖实验检测细胞增殖的情况与流式细胞周期检测结果分析细胞增殖水平的变化;用流式检测细胞凋亡率判断氧浓度对凋亡的影响.结果 (1)不同培养时间的计数结果显示48～72 h间细胞增殖速率快.(2)联苯胺染色结果提示以40μM的hemin诱导细胞获得的阳性率更高.(3)联苯胺染色结果显示,1％O2条件下72、96 h即刻细胞的阳性率明显高于常氧(P＜0.05);而3％O2条件下常氧低氧各时间点间无明显差异;γ-globin的检测结果显示,1％O2条件下96 h的表达水平是常氧的2.5倍(P＜0.05),而同样时间、3％条件下仅为常氧的1.4倍(P＜0.05);流式检测CD235a结果显示,1％O2条件下,CD235a阳性细胞率表现为48～72 h下降,72～96 h上升的变化趋势,且96 h常氧低氧差异明显(P＜0.05);3％O2条件下则表现为随时间延长逐步下降的趋势,96 h常氧低氧差异有统计学意义(P＜0.05).(4)结合MTS及细胞周期检测结果发现,不同氧浓度下细胞的增殖水平与常氧组无明显差异(P＞0.05).(5)流式检测细胞凋亡情况显示,1％O2条件下72、96 h即刻凋亡率略高于常氧,但差异无统计学意义(P＞0.05);3％O2条件下常氧低氧各时间点凋亡率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 本实验确立的实验参数,构建了符合试验要求的较为理想的K562红系分化模型(低氧下),为后期miRNA的检测奠定了基础.
-
不同麻醉方法对腹腔镜胆囊切除术的临床观察
目的观察西宁地区低氧环境下不同麻醉方法在腹腔镜胆囊切除术中对病人应激反应的影响.方法 20例ASAI-Ⅱ级行LC病人分为全身麻醉组(Ⅰ组 n=10例)和全身麻醉加连硬外麻醉组(Ⅱ组n=10例),观察麻醉前T1,麻醉诱导T2,气腹后15minT3,放气后15minT4的Bp、HR、Spo2、ETC02及即刻血糖变化.结果术中Bp,HRⅠ组较前升高,Ⅱ组降低,两组间有显著差别 (P<0.005),ETC02在气腹后均升高,血糖在Ⅰ组各时点逐渐升高,Ⅱ组接近麻醉前,两组间有显著性差异(P<0.05).结论腹腔镜胆囊切除术两种麻醉方法术中均出现应激反应,Ⅱ组较Ⅰ组轻.故我们认为麻醉选择以连硬外联合全麻为宜.
-
中性粒细胞碱性磷酸酶染色在血液病诊断中的应用
目的探讨中性粒细胞碱性磷酸酶染色在血液病中的应用.方法利用改良戈氏钙-钴法对所作标本进行染色并作积分判断.结果中性粒细胞碱性磷酸酶染色在急性髓细胞白血病、慢性粒细胞白血病中碱性磷酸酶积分均低于正常,而在急性淋巴细胞白血病、再生障碍性贫血、类白血病中碱性磷酸酶积分均高于正常.并显示急性髓细胞白血病与急性淋巴细胞白血病积分有显著差异(P＜0.001),类白血病与慢性粒细胞白血病积分也有显著差异(P＜0.001).结论根据碱性磷酸酶活性的特性在很多疾病中都可以把其作为诊断及疗效的判断指标.
关键词： 碱性磷酸酶 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 血液病 -
内镜下局部注射三种药物治疗消化性溃疡出血的疗效对比
目的分别采用立止血、1/10 000肾上腺素和生理盐水对89例消化性溃疡(PU)出血症进行内镜下局部注射治疗,对比三种药物的止血疗效.方法检查治疗时机均在12～24小时之内,明确病灶性质后,距病灶1mm～3mm周围,分4～6个点局部注射以上任何一种药物,每点注射0.2ml～1.0ml,直至内镜下观察到病灶出血停止.结果三组48小时止血率、1周内再出血率和外科手术率,经统计学检验无明显差异(P＞0.05).结论立止血、肾上腺素和生理盐水在用于内镜注射治疗PU出血中的疗效令人满意,其中任何一种药物均可作为内镜注射治疗PU出血的选择用药.
-
藏族内镜下十二指肠球部解剖结构的变异分析
目的了解汉族、藏族不同民族间球部解剖结构变异及球部溃疡的发生率有无差异.方法内镜观察22474例汉族和1987例藏族的球部解剖结构及球部溃疡发生情况.结果藏族十二指肠球部解剖结构变异率27.83%,明显高于汉族16.23%(P＜0.01),球部溃疡检出率5.69%,明显低于汉族15.76%(P＜0.001).结论藏族十二指肠球部解剖结构变异率明显高于汉族,藏族球部溃疡检出率明显低于汉族.
-
笑气用于分娩镇痛的临床效果观察
目的观察笑气用于分娩的疗效.方法将分娩的418例产妇随机分为观察组(192例)和对照组(226例),比较两组宫缩痛的程度.结果观察组的宫缩疼痛程度明显低于对照组(P＜0.01).结论笑气吸入法是产科无痛分娩较理想的方法之一.
-
尼莫地平对妊高征患者血浆内皮素、血清一氧化氮影响的研究
目的观察尼莫地平对妊高征患者血浆内皮素及血清一氧化氮的影响,为尼莫地平治疗妊高征提供理论依据.方法应用放射免疫法和硝酸还原酶法分别测定25例中、重度妊高征患者尼莫地平治疗前、后1小时血浆ET水平和血清NO的代谢产物NO-2/NO-3的含量,并与同期25例妊高征患者行硫酸镁治疗者进行比较.结果经尼莫地平治疗后,妊高征患者血清一氧化氮代谢产物水平明显增高,自51.72±14.64μmolL-1升至67.56±14.77μmolL-1(P＜0.05);血浆内皮素水平自94.56±25.06pgml-1降至84.41±25.72pgml-1(P＜0.05);ET/NO比值自1.91±0.49明显下降至1.30±0.48(P＜0.05);而对照组经硫酸镁治疗后血浆内皮素水平虽有明显下降(P＜0.05),但血清一氧化氮代谢产物无明显增加,ET/NO比值无显著性变化(P＞0.05).结论与硫酸镁相比,尼莫地平具有较强的改善与保护内皮细胞的作用.
-
注射用前列地尔联合黄芪注射液治疗糖尿病肾病临床观察
目的观察注射用前列地尔联合黄芪注射液对糖尿病肾病的治疗效果.方法 80例2型糖尿病肾病(Ⅱ-Ⅳ期)随机分为治疗组(45例)、对照组(35例),两组均采用常规治疗,在此基础上,治疗组给予前列地尔联合黄芪注射液治疗,连续治疗观察1个疗程(10～14天).结果治疗组的血糖、肾功等生化指标均优于对照组(p＜0.05).结论本资料表明通过改善肾小球微循环的药物,可以降低尿中白蛋白,从而有效延缓糖尿病肾病的进展.
-
双室起搏治疗心衰的疗效观察
目的探讨双室起搏治疗扩张型心肌病合并充血性心力衰竭的疗效.方法观察相关数据.结果四例患者置入起搏器后心脏各腔室均有缩小,左室射血分数增加.结论双心室同步起搏可以明显改善血流动力学,缓解心力衰竭.
-
联合用药治疗老年心力衰竭临床观察
目的 探讨老年人心力衰竭的临床特点及药物治疗的临床疗效.方法 对确诊为心力衰竭的19例患者应用卡托普利、小剂量保钾利尿剂螺内酯及β受体阻滞剂美托洛尔、地高辛治疗观察其临床疗效、NYHA心功能分级变化、左室射血分数、6分钟步行试验及不良反应.结果 心功能明显改善6例,好转11例,未愈0例,死亡2例.左室射血分数由31.5±5.2%增加至45.2%±6.7%.差异有显著性(P＜0.001).6分钟步行试验,患者治疗后步行距离由(4.5±8.7)m增加到(138.1±14.3)m,差异显著(P＜0.001).不良反应轻微,基本能耐受.结论 血管紧张素转换酶抑制剂如卡托普利,加用利尿剂,心功能Ⅱ、Ⅲ级患者加用β受体阻滞剂地高辛治疗老年心力衰竭,可提高患者的左室射血分数,增加患者的运动耐力.
-
青海4所高校大学生体育运动损伤情况调查分析
目的研究大学生体育运动损伤发生的规律及特点,为更好地预防其发生提供参考依据.方法问卷调查法.结果运动损伤大部分发生在上课和课外活动时;发生多的是关节韧带扭伤,常发生的部位是踝关节;在众多的项目中,以篮球、田径、体操和足球居多;在引起运动损伤的原因中,主要的是准备活动不合理和技术动作错误.结论在体育运动的开展过程中,必须加强安全运动的教育,针对大学生运动损伤发生的规律和特点,采取有效的预防手段和方法,减少运动损伤的发生.
