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李竞教授应用致新丹清创经验
李竞教授是天津市名中医,享受国务院特殊津贴,第二批、第四批全国老中医专家学术经验继承工作指导老师,国家"十五"攻关课题"名老中医学术思想经验传承研究"研究对象之一,中国医学非药物疗法专业委员会学术顾问.李竞教授在长期临床实践中发现酶类药物可替代传统祛腐中药达到治疗疮疡的清创作用,并基于此开发了致新丹,现介绍如下.
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菠萝蛋白酶治疗心血管疾病的系统综述
在2004年，全球估计有1 710万人死于心血管疾病。根据美国心脏病协会的数据，心脏病与中风是2型糖尿病患者的首要致死及致残因素。寻找更多的安全有效的心血管疾病治疗方案对于该疾病的预防和治疗十分必要，营养补充品是可行方案之一。目的：探讨菠萝蛋白酶(一种食品补充品)对心血管疾病的预防和治疗作用。检索策略：2009年9月至2010年3月进行电子与手工检索。检索的数据库包括Ovid MEDLINE；All EBMReviews- Cochrane Database of Systematic Reviews (Cochrane DSR)、American College of Physicians(ACP) Journal Club、Database of Abstracts of Reviews of Effects (DARE)、Cochrane Central Register ofControlled Trials (CCTR)、Cochrane Methodology Register (CMR)、Health Technology Assessment(HTA)和 National Health Service Economic Evaluation Database (NHSEED); Allied and ComplementaryMedicine (AMED)、British Nursing Index and Archive、EMBASE、Health Management InformationConsortium (HMIC)、ScienceDirect 和 Electronic Thesis Online Services (ETHOS)。 检索语言限定为英文。纳入标准：有关菠萝蛋白酶用于预防或治疗心脑血管疾病的随机对照试验、人体研究、动物研究与实验性研究。资料提取与分析：3位作者分别对检索到的文章进行文献质量评估并提取文献资料。所收集的资料包括实验种类、用药剂量、治疗周期、测量指标、研究结果、菠萝蛋白酶的特征、结果的意义与研究结论。结果：在搜索到的223篇文章中，只有6篇文章符合纳入标准。包括3项动物实验和3项人体试验。菠萝蛋白酶可用来治疗急性血栓性静脉炎，因为它可减少血液中的纤维蛋白原含量，降低血小板聚集度，有保护心脏的作用，并能够改善动脉壁的结构，避免由凝血酶所诱发的血小板聚集，减少血栓的形成。结论：迄今为止，没有菠萝蛋白酶用于心血管疾病治疗的高质量的人体研究。在1948年至2010年间所发表的有关菠萝蛋白酶与心血管疾病的研究的数量极为有限。在未来的心血管疾病研究中这可能是一个值得探索的领域。
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热失活菠萝蛋白酶复性的研究
目的:探求热变性蛋白质复性的可能性及其理论机制.方法:8 mol/L脲溶液中,用巯基乙醇将热失活菠萝蛋白酶中的二硫键还原,使其酶分子转变成随机卷曲构象,除去变性剂,用氧化型谷胱甘肽(GSSG)氧化菠萝蛋白酶分子,让已发生热失活的酶复性.结果:在酶蛋白浓度为0.083 g/L,pH 8 0～8.5时,菠萝蛋白酶可以恢复原有活性的44%.结论:证明了酶分子热失活机制的正确性,酶分子的天然活性构象为能量低状态,由于动力学能障,热失活的构象不能自动回复成天然活性构象.
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菠萝蛋白酶对宫颈癌细胞HeLa增殖及凋亡的影响
目的：探讨菠萝蛋白酶对人宫颈癌细胞 HeLa增殖和凋亡的影响。方法：将人宫颈癌HeLa细胞用不同剂量的菠萝蛋白酶处理48h后，光学显微镜下观察其形态学变化；采用MTT法检测不同剂量菠萝蛋白酶作用不同时间（24h、48h、72h）后对 HeLa 细胞增殖的影响；然后采用FITC-annexin V／PI双染色法检测不同剂量处理组 HeLa细胞的凋亡情况。结果：菠萝蛋白酶对HeLa细胞的生长抑制作用呈明显的时间、剂量依赖性；且随着剂量增加，能够诱导HeLa细胞发生凋亡，与对照组相比具有显著的统计学意义（P＜0．05）。结论：菠萝蛋白酶能明显抑制宫颈癌 He-La细胞的增殖，可能是通过诱导细胞凋亡的发生，从而发挥其抗肿瘤效应。
