首页 > 文献资料
-
MACC1基因下调对胃腺癌细胞的生长抑制作用
目的：研究下调MACC1表达对胃腺癌细胞株MGC-803生长作用的影响。方法设计并合成RNAi干扰片段，脂质体介导MACC1-siRNA1（MACC1-siRNA1组）和MACC1-siRNA2（MACC1-siRNA2组）转染MGC-803细胞，同时设非特异性干扰片段为对照组。应用qRT-PCR检测转染后各组MACC1的mRNA表达，噻唑蓝比色实验、平板克隆形成实验和流式细胞周期实验检测RNAi转染后MGC-803细胞增殖能力的变化，Western blot检测转染后MACC1、P21、CDK4、CCND1和c-myc蛋白的表达，并进行比较分析。结果与对照组相比，MACC1-siRNA1组和MACC1-siRNA2组MACC1表达在mRNA及蛋白水平下降，细胞的增殖速度变慢，单克隆形成数量减少，细胞周期中G1期细胞的比例显著升高，P21的表达增加，MACC1、CDK4、CCND1和c-myc的表达减少。结论下调MACC1能使MGC-803细胞的细胞周期进程受阻，抑制细胞的增殖，MACC1可以作为治疗胃癌的有效靶点。
-
MACC1表达沉默对胶质瘤细胞U87增殖凋亡的影响
目的 探讨MACC1基因表达沉默对脑胶质瘤细胞U87增殖凋亡的影响.方法 应用RT-PCR和Western blot检测55例不同病理级别胶质瘤标本MACC1表达;转染MACC1siRNA到U87细胞沉默MACC1基因表达,Western blot检测MACC1,Bcl-2/Bax,caspase-3,c-Met蛋白的表达;MTr法检测细胞生长增殖能力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况.结果 MACC1基因在胶质瘤标本组织表达随病理级别升高而增多;MACC1表达沉默后U87生长增殖能力明显下降,细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞凋亡显著增加,MACC1蛋白表达明显下降,Bcl-2/Bax比值降低,caspase-3表达上调,c-Met表达下降.结论 下调MACC1表达可促进胶质瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖,MACC1可能成为胶质瘤基因治疗的新靶点.
-
MACC1基因shRNA真核表达载体的构建及其在OVCAR-3细胞中的表达
目的:构建结肠癌转移相关基因1 (metastasis-associated in colon cancer-1,MACCl)小发卡RNA(small hair RNA,shRNA)的真核表达载体,观察其在卵巢癌细胞OVCAR-3中的表达.方法:设计、合成MACC1特异性shRNA序列,插入栽体p-super-EGFP-1中.重组栽体转染OVCAR-3,半定量RT-PCR和western blot技术检测转染前后OVCAR-3细胞中MACCl的表达.结果:成功构建MACC1 shRNA真核表达载体.转染后OVCAR-3细胞中MACCl的表达受到显著抑制.结论:成功构建MACC1特异性shRNA表达载体,为进一步研究MACC1参与卵巢癌发生发展的机制奠定实验基础.
