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白簕多糖的分离纯化及抗氧化活性研究
目的 提取、分离和纯化白簕多糖(ATP),测定单糖组成和相对分子质量(M)分布,并进行体外抗氧化活性检测.方法 通过水提醇沉、Sevage法、DEAE-cellulose 52和Sephadex G-50柱色谱法分离、纯化ATP.采用HPLC和高校凝胶渗透色谱(HPGPC)法对多糖的单糖组成和相对分子质量分布进行测定.通过体外清除DPPH·、ABTS+·、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O(·)2)自由基的方法,评价ATP的抗氧化活性.结果 获得1个量较高的中性均一多糖(ATP1-1)以及2个酸性多糖组分ATP2、ATP3.ATP1-1主要由葡萄糖和少量半乳糖、甘露糖、鼠李糖组成.ATP2主要由葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和少量甘露糖、鼠李糖组成.ATP3主要由鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成.ATP1-1的重均相对分子质量(Mw)为2 310.抗氧化实验表明ATP1-1对DPPH·、ABTS+·、·OH和O(·)2自由基均有明显的清除作用,半数抑制浓度(IC50)分别为0.042 4、0.007 9、2.313 6、1.753 0 mg/mL.结论 ATP1-1有较好的抗氧化活性并呈现出良好的量效关系.
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白簕中性多糖ATP1-1对1型糖尿病小鼠糖代谢的影响
目的 考察白簕中性多糖ATP1-1对1型糖尿病小鼠糖代谢的影响.方法 链脲佐菌素诱导1型糖尿病小鼠模型后,将50只成模小鼠随机分成模型组、二甲双胍组(185 mg/kg)及ATP1-1高、中、低剂量组(60、40、20 mg/kg),每组10只,各组灌胃给药4周;另取10只正常小鼠作为正常对照组.末次给药前,进行空腹血糖测试及口服葡萄糖糖耐量试验,qRT-PCR法和Westem blot法检测小鼠肝脏GLUT1、PEPCK、G6Pase mRNA及蛋白表达.结果 与模型组比较,ATP1-1高、中剂量组口服葡萄糖耐量明显改善(P＜0.01),空腹血糖及PEPCK、G6Pase mRNA、蛋白表达显著下降(P＜0.05,P＜0.01),GLUT1 mRNA表达显著上升(P＜0.01);ATP1-1高剂量组GLUT1蛋白表达显著上升(P＜0.05),但中剂量组无明显变化(P＞0.05).结论 ATP1-1可有效降低1型糖尿病小鼠血糖,提高耐受性,修复受损糖代谢,其机制可能与提高GLUT1表达、促进糖酵解和肝糖原合成、降低PEPCK和G6Pase表达来抑制糖异生有关.
关键词： 白簕 中性多糖ATP1-1 糖代谢 1型糖尿病 -
白簕叶中挥发油成分分析
目的:用气相色谱GC-Ms法对白簕叶挥发油进行化学成分分析.方法:采用水蒸汽蒸馏法从白簕叶中提取挥发油,用气相色谱-质谱仪法对化学成分进行鉴定.结果:共分离出38种化学成分,鉴定了其中17种成分,占挥发油总成分的69.402%.白簕叶中主要含反一丁香烯、α-蒎烯、α-葎草萜、环己烯、α-古巴烯,含量都在4%以上.结论:该方法稳定可靠,适用于白簕叶挥发油的化学成分分析.
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白簕叶总黄酮的聚酰胺树脂纯化工艺
目的 研究白簕叶总黄酮的聚酰胺树脂纯化工艺.方法 通过静态、动态吸附考察,以黄酮吸附率、洗脱率、黄酮纯度和薄层色谱结果 为评价指标,综合评判纯化优工艺.结果 其佳吸附工艺参数为:上样溶液浓度3.23 mg·ml(-1),pH 5～6(原液),以1.5 ml·min(-1)的吸附流速上样,再以60ml的70%乙醇对吸附后的树脂进行洗脱,洗脱流速1.5 ml·min(-1),洗脱剂pH值9～10,洗脱纯度超过60%.精制后黄酮质量分数超过60%.TLC结果 显示白簕叶中含有芦丁、槲皮苷和金丝桃苷.结论 采用聚酰胺树脂精制白簕叶总黄酮,操作简单,成本低廉,精制效果突出,有较高的工业生产应用价值.
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白簕总黄酮、多糖的体外抑菌作用研究
目的:研究白簕总黄酮提取液醇洗脱、水洗脱部分和多糖提取部分对常见菌种的抑菌活性.方法:通过白簕的总黄酮提取液醇洗脱部分与水洗脱部分、多糖提取物对枯草杆菌、痢疾杆菌等5种常见临床细菌进行纸片扩散法实验、试管稀释法实验,研究药物不同成分的抑菌作用.结果:白簕总黄酮提取液醇洗脱部分对枯草杆菌、伤寒杆菌的低抑菌浓度为0.131 3mg/mL,对痢疾杆菌、大肠杆菌、金葡萄球菌的低抑菌浓度为0.262 5mg/mL;白簕总黄酮水洗脱部分对伤寒杆菌、金葡萄球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌的低抑菌浓度均为0.296 0mg/mL.白簕多糖的体外抗菌实验结果出现杂菌,未能探究出结果.结论:白簕总黄酮提取液醇洗脱部分抑菌作用强于水洗脱部分,多糖无明显抗菌作用.
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大孔吸附树脂对白叶总皂苷的纯化工艺研究
目的:研究大孔吸附树脂富集纯化白簕叶总皂苷.方法:以白簕叶总皂苷产率为评价指标,考察静态吸附量和解吸率筛选出适型号树脂,再对上样pH值、动态吸附流速、佳上样量、洗脱剂浓度等纯化工艺条件参数进行研究.结果:大孔吸附树脂法纯化白簕叶总皂苷的优条件为:选用AB-8型大孔吸附树脂,吸附液pH值为5～6,吸附流速为1.0 mL/min,吸附液用量与树脂体积比为4∶ 1,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量与树脂体积比为4∶ 1,解吸流速为2.0 mL/min.
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白簕扦插繁殖技术研究
目的:为获得大量无性系植株而开展扦插繁殖技术研究.方法:本文采用白簕根和茎为育苗材料,对其不同材料、不同季节等扦插繁殖的条件进行了筛选.结果:发现茎比根成活率高;半木质化茎生根成活率高;其中基部切段成活率高;秋季扦插效果好.带叶插条在用1 500 mg/L的IBA速蘸10 s预处理后扦插于沙质土上,盖上薄膜和遮阳网,生根率高达89.4%.结论:秋季采集半木质化基部茎,剪成带叶插穗,经过1 500 mg/L的IBA速蘸10 s后扦插于沙质土,能明显提高生根率.
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响应面法优化白筋叶总黄酮的回流提取工艺
目的 采用响应面法对白筋叶总黄酮的回流提取工艺进行优化.方法 通过单因素试验选取因素和水平;以白筋叶总黄酮质量分数为指标,选取乙醇体积分数、提取时间和料液比3个因素进行Box-Behnken中心组合设计.结果 白簕叶总黄酮的佳提取工艺条件为:提取时间为76 min,乙醇体积分数为49％,液料比为42∶1(mL∶g).在此条件下,白簕叶总黄酮的质量分数达5.12％.结论 响应面法对白簕叶总黄酮的回流提取方法有较好的预测性,可为白筋叶总黄酮的高效提取提供参考.
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白簕黄酮分离纯化及其体外抗氧化性能的研究
目的 探讨大孔吸附树脂分离纯化白簕黄酮工艺条件并进行优化,研究白簕黄酮体外抗氧化性能.方法 通过静态吸附实验,探讨D101、NKA-9、H-30、X-5、AB-8大孔树脂的吸附率和解吸率,优选合适的大孔树脂,并优化吸附和解吸条件;采用检测1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基、超氧自由基和羟自由基清除率的方法,以抗坏血酸(Vc)为对照,对白簕黄酮进行体外抗氧化性实验.结果 AB-8型大孔树脂适用于白簕黄酮分离纯化,佳分离纯化条件为:4 mg/ml的白簕提取液76 ml,上样液速度为2 BV/h,洗脱剂为70％ 乙醇80 ml,以2 BV/h的流速洗脱.在此条件下分离纯化,白簕黄酮含量由纯化前7.36％ 增加到19.52％.纯化后白簕黄酮体外抗氧化效果优于Vc.结论 白簕黄酮作为新型抗氧化剂具有潜在的应用前景.
