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苦瓜化学成分的研究
目的 研究葫芦科苦瓜属植物苦瓜Momordica charantia的未成熟果实的化学成分.方法 采用树脂柱纯化,硅胶柱色谱进行分离纯化,通过理化常数和光谱分析鉴定化合物的结构.结果 从苦瓜的乙醇提取物中分离、鉴定了5个化合物的结构,分别是日耳曼醇乙酸酯(germanicyl acetate,I)、苦瓜皂苷元Ⅰ(aglycone of momordicoside Ⅰ,Ⅱ)、苦瓜皂苷元L(aglycone of momordicoside L,Ⅲ)、苦瓜苷(charantin,Ⅳ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅴ).结论 化合物Ⅰ为首次从苦瓜属植物中分离得到,化合物Ⅱ为首次从苦瓜中分离得到新的天然产物,化合物Ⅲ为国内首次从苦瓜中分离得到.
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苦瓜皂苷对亚急性衰老小鼠抗氧化作用的研究
目的 研究苦瓜皂苷对实验性衰老小鼠的抗氧化作用.方法 用D-半乳糖复制亚急性衰老小鼠模型,同时给予两种不同剂量的苦瓜皂苷,实验6 w后处死动物,测定血清、肝和脑中丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性.结果 苦瓜皂苷能显著提高衰老小鼠血清、肝脏和脑组织中的SOD、GSH-Px的活性,降低衰老小鼠血清、肝脏和脑组织中的MDA含量.结论 苦瓜皂苷有抗衰老作用,可能与其提高抗氧化酶活性、清除自由基、减少过氧化脂质生成有关.
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苦瓜皂苷对糖尿病肾病PI3K/Akt信号通路的影响
目的 探讨苦瓜皂苷对糖尿病肾病(DN)PI3K/Akt信号通路的影响.方法 50只雄性小鼠采用高脂饮食联合链尿佐菌素85 mg/kg腹腔注射建立DN模型.除模型组(A组)10只外,DN小鼠采用格列本脲0.16g-1 ·kg1 ·d-1灌胃(B组,10只)及30、60、120mg-1·kg-1·d-1苦瓜皂苷灌胃(D1、D2、D3组,各10只)连续治疗14d;另设10只雄性小鼠为空白对照(C组).采用组织芯片联合免疫组化观察小鼠肾脏组织中p-PI3K p85 (Y458)、p-Akt (Ser473)和负调控基因PTEN表达;Western blot检测小鼠肾脏组织中p-PI3K p85 (Y458)、p-Akt(Ser473)和PTEN蛋白的表达.结果 p-PI3K p85 (Y458)和p-Akt (Ser473)主要分布在肾小管上皮细胞质中,PTEN主要分布在肾小管上皮细胞核中.与C组相比,A组p-Akt(Ser 473)和p-PI3K p85 (Y458)表达水平升高,而PTEN表达水平降低(P＜0.05).与A组相比,B组及D2、D3组p-PI3K p85 (Y458)和p-Akt(Ser 473)表达水平均降低(P＜0.05),B组和D3组PTEN表达水平升高(P＜0.05).结论 苦瓜皂苷可以上调PTEN的表达,抑制PI3K/Akt通路的活化,对DN小鼠的肾脏有保护作用.
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苦瓜皂苷对人乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响
目的 研究苦瓜皂苷抑制乳腺癌MCF-7细胞的作用及其诱导凋亡的机制.方法 采用MTT法观察苦瓜皂苷对MCF-7细胞的生长抑制作用；HE染色观察皂苷作用后癌细胞的形态学变化；免疫荧光染色检测Bcl-2的阳性表达率变化；流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡率.结果 MTT法得到苦瓜皂苷与MCF-7细胞生长抑制率之间存在浓度依赖关系,半数致死量IC50为159.02 mg/L；HE染色观察到经苦瓜皂苷作用24h后的MCF-7细胞出现典型的凋亡形态学特征；免疫荧光检测到苦瓜皂苷作用细胞24h后,Bcl-2的阳性表达率为22.35％,远小于对照组75.61％；流式细胞术表明苦瓜皂苷处理细胞后,S期细胞数明显增加,细胞周期被阻滞在S期,随着皂苷作用时间的延长细胞凋亡率增加.结论 苦瓜皂苷可抑制体外培养MCF-7细胞乳腺癌细胞的增殖,其抑制作用与细胞凋亡机制有关.
关键词： 苦瓜皂苷 MCF-7乳腺癌细胞 增殖 细胞凋亡 -
HPLC法测定不同产地苦瓜根中苦瓜皂苷的含量
目的:建立测定不同产地苦瓜根中苦瓜皂苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法.色谱柱为Gemini C18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-甲醇(45∶55),流速为1.0 mL- min-1,检测波长为205nm,进样量为10μL.结果:苦瓜皂苷的检测浓度在0.051～1.020 mg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9998)；平均加样回收率为99.38％,RSD=1.99％(n=6).结论:不同产地苦瓜根中苦瓜皂苷的含量有较大差别,可用此法较好地评价该品种的质量.
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苦瓜皂苷改善非酒精性脂肪肝大鼠中氧化应激的作用研究
目的:探讨苦瓜皂苷对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏的保护作用及通过减轻氧化应激缓解非酒精性脂肪性肝病的情况.方法:60只雄性SD大鼠随机分为6组,空白对照组(n=10)给予普通饲料喂养,非酒精性脂肪性肝病模型组(n=10)、多烯磷脂酰胆碱治疗组(50mg/kg·d,n=10)以及苦瓜皂苷(25 mg/kg·d,n=10)、(50 mg/kg·d,n=10)以及(100 mg/kg·d,n=10)治疗组给予高脂饲料喂养,4周后,测定大鼠肝功能、空腹血糖、胰岛素、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;HE染色后光镜观察肝脏病理变化;分别采用RT-qPCR和Westem blot法检测Nrf2和HO-1的表达水平.结果:与模型组比较,苦瓜皂苷(50 mg/kg)和(100 mg/kg)组胰岛素抵抗指数、AST、ALT、TG、TC、LDL-C和MDA水平均明显降低,SOD和GSH水平升高;HE染色显示各大鼠肝细胞脂肪变性明显减少,肝细胞排列趋于规则;RT-qPCR与Western Blot结果显示Nrf2和HO-1表达明显升高.结论:苦瓜皂苷可降低非酒精性脂肪性肝病大鼠胰岛素抵抗、血脂,减轻肝细胞脂肪变性,其作用机制可能与缓解机体氧化应激有关.
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苦瓜皂苷的HPLC-ELSD指纹图谱研究
目的:建立苦瓜皂苷类成分的高效液相色谱-蒸发光散射(HPLC-ELSD)指纹图谱.方法:新鲜苦瓜果肉匀浆,冷冻干燥后经50％甲醇超声提取,HP-20大孔树脂固相萃取纯化得到苦瓜总皂苷.采用HPLC-ELSD法对14批次不同品种的苦瓜总皂苷进行检测,色谱柱为YMC-Pack ODS-A(5μm,250 mm×4.6 mm);以乙腈-水梯度洗脱(0 min,25％乙腈;40 min,35％乙腈;80 min,50％乙腈),流速1.0 mL·min-1;漂移管温度:108.0℃;气体:空气;气流速度:3.0 L·min-1.所得指纹图谱采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件进行分析.结果:确定了12个共有峰作为苦瓜皂苷的特征指纹峰,并指认了其中4个色谱峰的化合物结构;14批次不同品种苦瓜皂苷指纹图谱与对照指纹图谱的相似度介于0.493 ～0.880之间.结论:本法经方法学验证,可为苦瓜的品种鉴定、品质评价和质量控制提供参考依据.
关键词： 苦瓜 苦瓜皂苷 指纹图谱 高效液相色谱-蒸发光散射 鲜品
