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RhD血型的自动化微板筛查法
随着全自动筛查仪器在血站的普及[1],我们尝试利用RSP全自动加样器在微板上进行大批量筛查RhD血型工作,通过调整加样参数,重新筛选红细胞、抗-D稀释倍数等参数,后在血型微板观察仪上观察结果,该法省工、省时,节约试剂,现报道如下.
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自动酶免疫分析系统中微板置放顺序对结果影响的观察
目的:评估RSP 100-BEP Ⅲ自动酶免疫分析系统中微板置放顺序对检测结果的影响.方法:评价基本性能,该系统的不精密度;与经典方法比较分析不准确度.将乙肝6项标志物微板置于不同序号检测,以观察该系统中微板置放顺序对结果的影响.结果:RSP 100-BEP Ⅲ自动酶免疫分析系统性能良好;对于微板置放顺序,双抗体夹心法和中和法无明显差异,而对竞争抑制法检测结果有显著影响.结论:RSP 100-BEP Ⅲ自动酶免疫分析系统可提高酶免疫分析方法的精密度,减轻劳动强度.但应注意竞争抑制法ELISA存在时效性,必须用RSP 100加样后立即以BEP Ⅲ进行后续处理.
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自动化微板检测技术在献血者血型检测中的应用
目的:通过微板法检测无偿献血者ABO血型(正定、反定)和Rh血型,探讨微板法在无偿献血者ABO血型(正定、反定)和Rh血型定型中的应用效果.方法:采用用瑞士Hamilton公司STAR全自动样本处理系统结合SUNRISE酶标仪对无偿献血者血液标本进行常规检测ABO血型正、反定型和Rh(D)血型.结果:①检测标本14963人次,ABO血型正、反定型正确率100％；②检测出Rh(D)阴性献血者35例,阴性率为0.20％；③纠正外采初筛ABO血型错误6例.结论:微板法检测无偿献血者ABO血型(正定、反定)和Rh血型,采用全自动设备加样,加样量精确、加样速度快,降低了工作强度,避免了手工加样的人为误差和差错,保证了血型鉴定的准确性；ABO血型正、反定型和Rh(D)血型的操作实现了自动化、标准化.
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全自动仪器复检无偿献血者血型参数选择
目的：探讨利用加样器进行血型自动化检测。方法采用对实验参数进行选择优化，然后经过离心、孵育、振荡后静置判断。结果试管 Z 轴低高度1600 mm；微板上加抗-A、抗-B 时 Z 轴位置高度965 mm。微板每孔加235μl生理盐水，红细胞为5μl，抗-A 和抗-B 加样量均为25μl。生理盐水的吸取液速度调整为110μl/ s，分配速度调整为400μl/ s。从12410人份中共检出 RhD 阴性25份，1份弱 D；纠正 ABO 初筛错定3例，2例正反定不符。结论本实验参数优化合理，实现了血型自动化检测。
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大批量微板自动化检测正反定ABO及RhD血型的研究
目的:探讨用微孔板代替纸板实现仪器自动化检测正反定ABO以及RhD血型.方法:利用加样器取自试管内的红细胞或血浆,然后分配到微板内,经离心、振荡,后在微板观察仪上进行判断,在局域网上发送报告.结果:正定ABO及RhD仪器优化参数为:在预稀释板上加生理盐水147μl,吸标本压积红细胞3μl,使红细胞浓度达到2%;吸红细胞的液体参数前吐后弃体积均为0μl,并且吸前不混合;在预稀释板上分配,加样针离微板的距离为5 mm;2%红细胞与抗-A或抗-B体积选择均为25μl;预稀释板上剩余的50μl混合红细胞作为RhD检测用,抗-D体积为25μl.反定ABO优化参数为:红细胞浓度选择3%,体积为25μl,血浆50 μl.离心转速为1000 r/min,时间1 min;振荡15 s,静止2 min,观察结果.本方法B3、A3弱亚型均能检出,和纸板法符合率为100%,500份样本正反定ABO以及RhD血型,从准备到发结果仅需2 h.结论:本研究实现了正反定ABO及RhD血型的自动化操作,不但省时省工,而且结果准确可靠,减少了微板和抗-D、抗-A和抗-B的用量,具有显著的经济效益和社会效益.
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微板干试剂测定血糖方法学的建立及其在体检筛查中的应用
目的 研制一种通过微板干试剂葡萄糖氧化酶法快速检测血糖的新方法,并小批量在普查糖尿病中应用.方法 将改良葡萄糖试剂冻干于96孔板中并封存.检测时微板中每孔由排枪加入200∶1比例去离子水和待检标本混匀的预处理液,复溶冻干试剂并进行反应,水浴10 min,用酶标仪检测并计算结果.结果 该法在1~24 mmol/L范围内线性良好,其准确性在允许偏差±5%内,变异系数(CV)＜5%,干扰实验均能满足检测的要求.对120例体检者应用本法进行血糖测定,其结果与日立7060全自动生化分析仪测定结果具有较好的相关性(r=0.987 5).结论 微板干试剂葡萄糖氧化酶法快速检测血糖结果准确可靠,检测过程简便,适合基层医疗机构快速检测及批量普查.
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微板丙酮酸氧化酶法在健康人群中筛查ALT应用分析
目的 探讨微板丙酮酸氧化酶法在健康人群中筛查丙氨酸转移酶(ALT)的作用.方法 用丙氨酸氧化酶法和IFCC速率法检测9 767份健康体检标本,比较两种方法的敏感性和精密度.结果 徽板丙酮酸氧化酶法的初筛阳性率为5.80％,用酶标仪比色测定复检阳性率为1.31％；而IFCC速率法阳性率为1.29％.两法测定ALT差异无统计学意义(P＞0.05).结论 微板丙酮酸氧化酶法具有线性范围大、灵敏、操作简便、快速、结果准确、重复性好、抗干扰能力强等优点,适合各级疾病预防控制中心对大批量健康人群的筛检.
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聚凝胺微板法自动化配血系统在交叉配血中的应用
通常交叉配血使用手工试管法或微柱凝胶法进行.但遇到受血者含意外抗体,需要与大量献血者标本进行配血时,单靠手工配血,需耗时甚多,且易发生人为差错.因此应用1套全自动配血系统来提高工作效率和减少人为差错具有重要的现实意义.我们结合工作实际,设计出一套由自动化加样仪、平板离心机、水浴箱、振荡器、酶标仪组合而成的聚凝胺微板法自动化配血系统,实际应用效果良好,现介绍如下.
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全自动加样器同时作ABO及RhD微板正定型的参数选择
微板法检测ABO、RhD血型改变了传统的手工操作,具有快速、自动化程度高等优点[1-3],但同时又存在部分缺点:加样器稀释每个标本血球浓度差异大以及弱凝集使Cut off设定值出现血型误判;预稀释板仅作为稀释血球使用,造成微板浪费以及检测时间延长;上机读板蓝色(抗-A)、脂血、溶血对620nm波长的干扰等问题.我们通过调整加样参数,重新筛选红细胞、抗血清浓度以及体积,采用平底板在血型微板观察仪上观察结果,取得较好效果,现报告如下.
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自制血型微板观察仪用于弱凝集观察
用微孔板代替纸板可实现仪器自动化操作,血型结果可以用仪器或人工判断,但弱凝集终仍然需要肉眼观察.在自然光或台灯下利用反射光观察时,弱的凝集颗粒有可能被漏判或错判.为此,笔者设计制作了一种新的血型微板观察仪,即利用透射光来观察血型微板孔内的颗粒凝集,对弱凝集颗粒的识别效果较好,报告如下.
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自动化微板反定型试验条件的选择
目的探讨自动化微板反定型的试验条件.方法利用RSP加样器结合微板离心技术对ABO反定型试验条件进行选择.结果血浆取样量为50μl,红细胞浓度为3%(取样量25μl);平板离心机转速为1000r/min,时间为1min;振荡悬浮速度为900r/min,时间为1min,振幅为3为佳条件.目测判断好.结论本法操作简单,省工省时,解决了ABO反定型由手工向自动化,材料由纸板向微板成功转变.
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保存后的微板留样血液检测结果分析
按照<血站管理办法>的要求,血站所采集血液的相关原始记录必须至少保存10年,血液检测的全血标本保存期应在全血有效期内,血清或血浆标本的保存期应在全血有效期满后半年,2009年4月改为血液标本的保存期为全血或成份血使用后2年.目前有很多血站采用全自动加样仪留取标本保存在96孔微板上[1,2],本中心自2007年增加了微板留样保存血样,现将血清用微孔板保存至少半年后的HB-sAg结果分析如下.
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Hemotype全自动血型分析系统在血型鉴定中的应用研究
目的 探讨全自动血型分析系统在ABO、RhD血型鉴定中的应用.方法 使用微板法自动血型分析系统,在一次性U形板上通过加样、离心、振荡、判读完成血型检测并发送报告.结果 8013份献血者ABO血型一次性准确定型率99.91％(8006/8013),7例正反定型不一致(含O细胞凝集),Rh(D)阴性4例.60例乳糜标本ABO血型正反定型一致.结论 全自动血型分析系统进行ABO正反定型及RhD血型检测更安全可靠,实验操作实现了标准化、自动化,检测结果可永久保存、便于查询.
