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人用植物疫苗的研究进展
目前基因重组疫苗产品的宿主载体通常为细菌、酵母和哺乳动物细胞[1].随着基因工程技术的快速发展,植物转基因技术的日趋成熟,植物已成为基因重组生物制品的重要表达载体.
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转基因植物可食用疫苗研究进展
在第三世界国家,传染病仍旧是威胁儿童和青少年生命健康的主要因素,每年引起1300万人死亡[1].全世界每年有1.2×10\+8个新生儿需要接种水痘、乙型脑炎、脊髓灰质炎等16种疫苗,因而对疫苗的需求量巨大.预防接种的理想疫苗应该是安全、简易、廉价、耐高温、便于运输和发放,传统的疫苗通常不能达到这些要求.因此,现在许多研究人员都在努力探索利用转基因植物系统生产疫苗.转基因植物可食用疫苗就是运用植物转基因技术将抗原基因导入植物细胞,从而得到带有特异抗原基因的植物,人类或动物食用这些植物就可以达到免疫效果,不仅使人们免受针刺的痛苦,更为那些无法承受针剂疫苗的储藏、运送等所需昂贵费用的国家带来新的希望[1,2].本文对该类疫苗的生产原理与技术、作用机制、研究进展和应用前景作一综述.
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重组人β-防御素-2基因的植物表达载体的建立
目的:许多证据表明:利用转基因植物作为生物反应器规模化生产高附加值的药用重组蛋白质,其技术可行、成本低廉、效益显著,具有广阔的应用开发前景.本研究拟运用植物转基因技术,尝试构建高效表达hBD-2的植物生物反应器的可能性.方法:将C端带Myc和6xHis双标记的hBD-2的重组DNA克隆到植物真核表达载体pCAMBLA1303中,构建C端带Myc和6xHis双标签的hBD-2的重组植物真核表达载体;并将此载体转化根癌农杆菌LBA4404,利用卡那霉素进行抗性基因筛选,确定根癌农杆菌的阳性克隆;通过根癌农杆菌将外源基因转入马铃薯植物愈伤组织细胞,利用潮霉素抗性基因筛选及PCR检测,监测hBD-2在其中的遗传表达.结果:(1)酶切分析、PCR验证和DNA测序等证据表明,C端6个组氨酸的hBD-2已被正确地插入pCAMBIA1304载体中CaMV 35S和Nos终止子之间,成功构建了重组hBD-2/His基因的植物表达载体rpCAMBIA1304/hBD-2/His.(2)rpCAMBIA1304/hBD-2/His已成功地转化根癌农杆菌LBA4404,阳性克隆菌株已获得.(3)潮霉素抗性进行筛选及PCR检测结果提示:hBD-2 cDNA基因已整合到马铃薯植物愈伤组织的基因组中.结论:结果表明,重组hBD-2/His基因的植物表达载体通过根癌农杆菌介导进入了马铃薯细胞植物愈伤组织.利用植物转基因技术,构建高效表达hBD-2的植物生物反应器具有可能性.