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258例血清中抗-HCV阳性联合HCV-RNA定量检测结果分析
目的：探讨丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)定量联合检测结果对丙型肝炎确诊的临床意义。方法对258例ELISA法检测的血清抗-HCV阳性丙型肝炎(HC)患者，同时采用PCR-荧光探针法检测其HCV-RNA含量。结果258例抗-HCV阳性丙型肝炎患者中HCV-RNA阴性92例，占35.66%；17例HCV-RNA弱阳性，占6.59%；HCV-RNA阳性149例，即57.75%的HC患者存在病毒血症。结论ELISA法联合检测抗-HCV和HCV-RNA有助于丙型肝炎确诊病毒血症以及监控HCV的感染，并及时进行抗病毒治疗。
关键词： 丙型肝炎病毒抗体 丙型肝炎病毒核糖核酸 丙型肝炎 PCR-荧光探针 -
结核/非结核分枝杆菌核酸快速检测方法的临床应用研究
目的:探究结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌经PCR-荧光探针这一快速检测方法的准确率及应用价值.方法:225例经改良罗氏培养法确诊的分枝杆菌样本,其核酸再由PCR-荧光探针法进行检测,观察其正确率及二者的一致率.结果:103例痰菌阳性样本,35例痰菌阴性病例,87例非结核肺部疾患病人痰标本中经PCR-荧光探针技术检测显示92例(89.32％)为MTB,79例(90.80％)被鉴定为NTM.预测结核分枝杆菌核酸灵敏度为49.6％(对菌阳标本及菌阴标本的灵敏度分别为93.6％和15.6％),特异性高达99.6％.结论:PCR-荧光探针法不仅操作便捷快速,而且还非常灵敏、检测正确率高等诸多优点,其可在分枝杆菌感染的临床诊断上作为参考依据.
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PCR-荧光探针法检测分枝杆菌的临床应用价值
目的 比较PCR-荧光探针法和改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的一致性,探讨两种方法在临床上的应用价值.方法 应用PCR-荧光探针法检测69例改良罗氏培养阳性的分枝杆菌核酸,比较两种方法检测结果的一致率;两种方法检测结果不一致样本进行测序验证,以测序结果作为金标准,分析两种方法检测结果的正确率及不一致的可能原因.结果 两种方法检测总一致率为89.9%,结核分枝杆菌检测一致率为87.5%,非结核分枝杆菌检测一致率为90.6%.PCR-荧光探针法和改良罗氏培养法共有7例检测结果不一致,与测序结果比对后,改良罗氏培养法检测的正确率为94.2%,PCR-荧光探针法检测的正确率为92.8%.结论 操作简单、快速,灵敏的PCR-荧光探针法与作为传统金标准的改良罗氏培养法检测结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的一致性良好、正确率高,可作为临床分枝杆菌感染诊断的重要检测手段.
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对PCR-荧光探针检测207例大三阳标本假阴性率的分析
目的 对ELISA所测乙肝大三阳标本进行PCR定量检测时所出现的假阴性结果进行分析.方法 207例ELISA检测为大三阳的标本,同时用PCR-荧光探针扩增,测定其病毒数量.结果 207例标本中有14例PCR扩增后为阴性.结论 PCR-荧光探针对大三阳标本的阳性率不能达到100%,在检测乙肝病毒的是否复制时,应对乙肝五项指标和PCR扩增实验结果综合分析.
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两种核酸血液筛查系统降低HBV残余风险的比较
目的 评估不同原理核酸检测(NAT)血液筛查系统在降低输血传播HBV残余风险中的作用.方法 对6 889人(次)无偿献血者血液标本做常规血清学检测,应用转录介导的扩增(TMA)技术(Ultrio试剂)对所有血样平行单样本定性检测HBV/HCV/HIV,对血清学无反应性标本5 165例采用PCR-荧光探针法(MPX试剂)以6人份混样模式做NAT.追踪2个NAT平台得到的反应性标本,罗氏CAP/CTM核酸定量检测系统做核酸鉴别试验,罗氏电化学发光做乙肝血清学5项检测,QPCR法测定HBV病毒载量,巢氏-PCR方法做HBV DNA基因分型,统计分析各项检测指标之间关联及差异.结果 TMA初筛检出HBV DNA单独反应性标本12例[反应率0.17％(12/6 889),鉴别试验阳性7例(占TMA初筛阳性数的58.3％)],PCR-荧光探针法拆分后检出HBV DNA单独反应性9例[0.17％(9/5 165)],2种NAT平台检测HBV DNA均为阳性4例,合计检出17例反应性标本.该2种原理的NAT检测系统对HBV DNA检测结果的一致性差(TMA vs QPCR,K＜0),检出率明显不同(TMAvsQPCR,P＜0.05).阳性标本乙肝血清学5项检测:HBsAg、HBeAg均为阴性(0/16),抗-HBc阳性12例(12/16),抗-HBs阳性6例(6/16),抗-HBe阳性3例(3/16).HBV DNA定量阳性4例,含量均＜5IU/mL.献血者追踪结果:TMA检出HBV DNA单独反应性3例(3/10),鉴别试验HBV DNA阳性3例,MPX检出HBV DNA单独阳性5例(5/10),2种NAT平台检测均为阳性者3例,合计检出5例;10例追踪标本的HBsAg、HBeAg仍均为阴性,抗-HBc阳性8例(新转阳3例),抗-HBs阳性5例(新转阳1例),抗-HBe阳性2例(新转阳1例),HBV DNA定量阳性4例(新检出1例),含量均＜5 IU/mL.巢氏-PCR S区序列阳性标本做HBV基因分型:B型占66.7％ (6/9),C型占33.3％(3/9).结论 TMA与PCR-荧光定量法均能有效降低输血残余风险,但针对检出限附近低病毒载量标本均有部分漏检,血站在条件具备时可使用更高灵敏度的新试剂.
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疑似生殖器疱疹1312例HSV基因检测结果分析
目的 了解海口地区疑似生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒(HSV)感染情况.方法 用核酸PCR-荧光探针法对本院1 312例疑似生殖器疱疹患者进行HSV-1/2型基因检测.结果 1 312例疑似生殖器疱疹患者中,HSV-1型阳性22例,阳性率1.68％ (22/1 312),HSV-2型阳性621例,阳性率47.33％ (621/1 312),单纯疱疹病毒阳性共643例,阳性率49.01％ (643/1 312),无合并感染者.643例HSV阳性患者,有典型临床症状(溃疡、结痂、水疱等)426例,占66.25％;无症状217例,占33.75％.HSV-1型阳性率与HSV-2型阳性率比较,差异有统计学意义(P＜0.01).643例单纯疱疹病毒感染者中,男465例,阳性率49.47％ (465/940),女178例,阳性率47.85％ (178/372),男女阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 海口地区疑似生殖器疱疹患者HSV阳性检出率高,感染有型别差异,以HSV-2为主.无症状HSV感染者占1/3,提示临床应重视对疑似生殖器疱疹患者进行HSV基因检测,避免误诊漏诊.HSV感染率无性别差异.
