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No-1886对实验性糖尿病小型猪血糖、血脂异常和肝脏病变的保护作用观察
目的探讨合成化合物No-1886是否降低高糖高脂饲料诱发的糖尿病贵州小型猪的血浆葡萄糖、自由脂肪酸浓度和改善肝脏病变.方法3～4月龄贵州小型猪15只(♂8只、♀7只),随机选取5只饲以基础饲料为A组(正常对照组);5只饲以高糖高脂饲料为B组(糖尿病对照组);5只前3个月饲以高糖高脂饲料,后5个月饲以高糖高脂饲料加1.0%No-1886为C组(糖尿病治疗组),分别在0、2、3、4、5、6、8个月时从禁食过夜的猪眶静脉窦取血样测定葡萄糖、自由脂肪酸,第8个月末,处死动物,取肝脏1小块,10%甲醛液固定,常规石蜡包埋切片,分别作HE和肝糖原染色以及油红O染色,光学显微镜下观察并照相.结果糖尿病对照组和糖尿病治疗组加药前出现高血糖、高自由脂肪酸,并随着喂养时间的延长而逐渐升高.正常对照组血糖、自由脂肪酸未见明显升高,两组对比差异具有显著意义(P＜0.05),与糖尿病对照组比较,糖尿病治疗组血糖、自由脂肪酸明显降低.从肝脏病理切片观察所见,糖尿病对照组肝脏肝细胞索排列紊乱,中央静脉扩张,肝细胞脂肪变性明显,具大量脂肪空泡,并有局灶溶解性坏死,淋巴细胞浸润,肝糖原极少或消失,油红O染色显示细胞内有较多脂滴.而糖尿病治疗组未见明显脂肪空泡变性,组织结构基本正常,肝糖原丰富.油红O染色细胞内未见明显脂滴.结论No-1886不仅可改善脂质代谢紊乱,而且可降低血浆葡萄糖,减少肝糖原分解和减轻肝脏病变.可开发为治疗糖尿病糖代谢紊乱和脂质紊乱的药物.
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脂蛋白脂酶基因敲除鼠的脂代谢研究
目的 通过野生型(c57)小鼠及脂蛋白脂酶(LPL)基因敲除杂合子(LPL+/-)小鼠体内实验,探讨LPL对小鼠体质量、脂肪及血脂等方面的影响.方法 对LPL+/-小鼠和c57小鼠行表型鉴定后,分为两组,每组6只,比较两组小鼠在体质量,脂肪含量及血脂等方面的变化.结果 LPL+/-小鼠甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、体质量及内脏脂肪含量均较c57小鼠高(P＜0.05),而其肝脏、骨骼肌、脂肪及胰腺组织的TG、FFA较c57小鼠也呈现不同程度的增高趋势,其中肝脏TG的增高差异有统计学意义(P＜0.05).结论 小鼠体内实验证实了LPL基因敲除可导致体质量,脂肪含量的增加,同时引起FFA的增高及高TG血症,以及组织血脂水平不同程度的增高趋势.
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鹿血降脂
中医认为,鹿血味咸性热,入肝、肾二经,有养血益精、行血祛瘀、消肿疗伤的作用,适用于虚损腰痛,心悸,失眠症,肺痿吐血,崩漏,带下等症.动脉硬化多与气滞痰瘀有关,而鹿血有行血祛瘀之功效.现代研究发现,鹿血含蛋白质、多种脂类、游离脂肪酸类、固醇类、磷脂类、激素类、维生素类和多糖类等.鹿血具有降血脂、抗氧化和抗衰老的作用.需要注意的是,鹿血性热,热证、阴虚火旺者忌食.
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一种用于脂肪肝脂毒性药理研究的体外模型
目的 建立和复制一种适合大鼠药物血清进行脂肪肝脂毒性药理研究的体外模型.方法 以大鼠血清替代胎牛血清培养HepG2细胞,添加长链游离脂肪酸(油酸1 mmol/L、棕榈酸0.5 mmol/L)刺激,观察上清液中肿瘤坏死因子(TNF)α含量、细胞内甘油三酯含量,细胞脂肪油红染色及电镜下观察超微结构变化;同时观察细胞TNF α蛋白及其基因表达,细胞组织蛋白酶B(ctsb)表达和分布的变化.结果 游离脂肪酸刺激24 h后,HepG2细胞内甘油三酯显著沉积,高达627.24 mg/g(t=23.6,P＜0.01);上清液中TNF α含量显著升高,增至52.04 pg/mg(t=2.6,P＜0.05);细胞ctsb、TNF α的蛋白表达及其mRNA表达均显著增强.结论 在大鼠血清培养环境下,游离脂肪酸可通过对ctsb作用显著诱导HepG2细胞脂肪变性和TNF α分泌,方法简易经济,可作为一种较理想的抗脂肪肝脂毒性药理研究模型.
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体外非酒精性脂肪肝细胞模型线粒体通透转换孔的变化及其与细胞凋亡的关系
目的 探讨线粒体通透转换孔(PT孔)与肝细胞脂肪变和细胞凋亡的关系.方法 采用油酸诱导肝细胞株LO2细胞建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)体外模型,油红O染色观察细胞脂肪变情况,应用荧光显微镜法观察各组荧光下降百分比(反映PT孔的开放程度),流式细胞仪Annexin V/PI法检测细胞凋亡情况.结果 荧光显微镜观察结果显示,油酸可诱导L02细胞PT孔开放(72.58%±2.78%),与对照组(8.28%±4.98%)比较,差异有统计学意义(P＜0.01);并可于24h后引起肝细胞脂肪变,至72h后肝细胞脂肪变持续存在;随NAFLD体外模型造模时间延长,细胞凋亡比例逐渐增加,以48h和72h(分别为11.09%±4.95%和15.24%±2.45%)为显著,与对照组(4.56%±1.25%)比较,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 PT孔开放程度与NAFLD体外模型细胞凋亡密切相关,并与肝细胞脂肪变有一定关系.
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2型糖尿病患者血清游离脂肪酸组成的研究
目的研究2型糖尿病(T2DM)患者血清游离脂肪酸(FFA)的组成及相对百分含量.方法采用改进的RHPL C法,分析了24例T2DM患者及14名与其同龄的中老年正常人,和13名正常青年人对照组血清FFA组成及相对百分含量.结果 T2DM患者血清中FFA浓度比其同龄正常人显著增高(P＜0.01).T2DM患者空腹血糖(FBG)与血清FFA浓度之间呈显著正相关.结论 T2DM患者血清FFA增高,提示患者在糖代谢紊乱的同时,脂质代谢亦异常紊乱.
