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鼠脑心肌炎病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立
目的 建立快速诊断鼠脑心肌炎病毒感染的荧光定量RT-PCR方法.方法 根据鼠脑心肌炎病毒(EMV)PEC9毒株全基因组序列(GenBank登录号:DQ288856.1),设计一对特异性引物和TaqMan探针,建立EMV的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法,进行条件优化,检测其特异性,敏感性,稳定性.结果 建立的荧光定量PCR方法,标准曲线的线性关系良好,r2值可达0.99,敏感性低检测限为1个拷贝数,高于普通PCR方法1000倍,其特异性强,与其他常见感染的小鼠病毒株均无特异性扩增,批内和批间变异系数均小于2%.利用该方法对上海市120份小鼠心肌样品进行检测,未检测到阳性感染.结论 本研究为鼠脑心肌炎病毒感染的分子检测,为制定国家标准提供良好的方法.
关键词: 鼠脑心肌炎病毒 EMV TaqMan探针 荧光定量RT-PCR -
先天性髋脱位治疗前后股骨上端静脉造影的观察
为了观察先天性髋脱位治疗前后股骨上端血运变化,进一步探讨治疗后股骨头缺血性坏死的血运分布特点和发生因素,我院自1983年9月至1985年1月对29例先天性髋脱位患儿做了股骨上端静脉造影检查,现将结果报告如下.方法与结果造影方法:患儿仰卧位、全麻下于两侧股骨大粗隆下2cm处,分别用骨髓穿刺针,向股骨头方向刺入,止于股骨颈基底部,经电视透视证实后,快速注入76%泛影葡胺各10ml,每间隔2秒拍摄骨盆正位片1张,共摄5张,当拍完后间隔3分钟,再摄后1张,观察造影剂排空情况.