首页 > 文献资料
-
乙肝病毒感染肝星状细胞的体外研究
目的 初步研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)能否体外感染人肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),以期为阐明慢性乙肝的致病机制提供新的实验依据.方法 体外培养人肝星状细胞株(LX-2),用不同浓度HBV感染者的血清进行感染,HBVDNA终浓度分别为104、105、106、107拷贝/mL,在感染24、48和72 h收取细胞.荧光定量多聚酶链反应(polymerase chain reaction,FQ-PCR)方法 测定细胞内的总HBVDNA和共价闭合环状DNA(cccDNA);Southern blotting及Northern blotting方法 测定细胞内是否存在HBV复制中间体及mRNA.结果 在HepG2.2.15细胞中,分别检测到2.58拷贝/细胞和0.86拷贝/细胞的HBVDNA和cccDNA.在少量LX-2细胞中,可以检测到HBVNA,均在0.05拷贝/细胞以下,在所有LX-2细胞中未检测到cccDNA;用Southern blotting和Northern blotting方法 未检测到LX-2细胞中存在HBV复制中间体及mRNA;而在HepG2.2.15细胞中检测到阳性条带.结论 在体外实验中,未发现HBV感染肝星状细胞的证据.
关键词： 乙型肝炎病毒 肝星状细胞 感染 荧光定量多聚酶链反应 -
感染血吸虫小鼠端脑外周型苯二氮卓受体表达的观察
目的探讨感染血吸虫小鼠不同时期端脑外周型苯二氮卓受体(PBR)的表达水平.方法应用实时监测荧光定量PCR技术,于感染8、12、20周时检测小鼠端脑PBR mRNA的表达水平.结果在8、12、20周各时期的感染组小鼠较同期正常组小鼠的端脑组织PBR表达量明显增加;感染组小鼠随着感染时间的延长,脑组织PBR mRNA的表达量逐渐增加,感染8、12、20周脑组织PBR mRNA的表达量差异有显著性(P＜0.01),而不同时期正常组脑组织PBR mRNA的表达差异无显著性.结论感染血吸虫小鼠在血吸虫肝纤维化过程中,端脑组织PBR表达水平显著增加.
关键词： 外周型苯二氮卓受体 血吸虫病 小鼠 荧光定量多聚酶链反应 -
风疹病毒母婴传播的定量PCR分析
目的研究风疹病毒(rubella virus,RV)母婴传播的量化关系.方法应用荧光定量PCR方法检测23例IgM抗体阳性的孕妇及其婴儿血清中RV-RNA含量.结果孕妇RV-RNA含量与婴儿RV-RNA含量呈正相关,当孕妇血清中病毒含量在7.93×102±2.03×102拷贝/μl时,婴儿血清中没有检测到RV;当孕妇血清中RV-RNA含量在3.89×103±1.10×103拷贝/μl时,婴儿血清中可以检测到RV.并且随着孕妇血清中RV-RNA含量的升高,婴儿血清RV-RNA含量相应增高.结论孕妇与婴儿血清中RV-RNA含量呈正相关.孕妇血清中RV-RNA含量在3.89×103±1.10×103拷贝/μl时可能是导致婴儿感染的阈值,这对指导临床有一定的理论意义和实用价值.
关键词： 风疹病毒 荧光定量多聚酶链反应 RNA -
黄芪对感染血吸虫小鼠脑组织外周型苯二氮卓受体表达的影响
目的 探讨黄芪对感染血吸虫小鼠脑组织外周型苯二氮卓受体表达的影响.方法 采用黄芪注射液腹腔注射,在小鼠感染血吸虫满8周开始治疗,疗程12周,注射生理盐水作阴性对照.应用实时监测荧光定量PCR技术,于感染满8周、12周和20周检测脑组织外周型苯二氮卓受体mRNA的表达水平. 结果 黄芪治疗组小鼠脑外周型苯二氮卓受体mRNA水平在感染12周和20周时均明显低于同期对照组(P＜0.01),与正常组比较无显著差异(P》0.05);黄芪治疗组治疗前、中和后脑外周型苯二氮卓受体mRNA水平比较差异无统计学意义,而对照组治疗前后差异显著.结论 黄芪可降低血吸虫病小鼠脑组织外周型苯二氮卓受体mRNA表达,提示黄芪可能通过此机制对肝性脑病有一定的治疗作用.
关键词： 黄芪 血吸虫病 小鼠 荧光定量多聚酶链反应 外周型苯二氮卓受体 -
黄芪对感染血吸虫小鼠肝组织外周型苯二氮(艹卓)受体表达的影响
目的:探讨黄芪对感染血吸虫小鼠肝组织外周型苯二氮(艹卓)受体表达的影响.方法:采用黄芪注射液腹腔注射,在小鼠感染血吸虫满8周开始治疗,疗程12周,与生理盐水作对照.应用实时监测荧光定量PCR技术,于感染满8周、12周和20周时检测肝组织外周型苯二氮(艹卓)受体mRNA的表达水平.结果:黄芪治疗组小鼠外周型苯二氮(艹卓)受体mRNA水平在感染12周和20周时均明显低于同期对照组,与正常组接近;黄芪治疗组治前、治中和治后外周型苯二氮(艹卓)受体mRNA水平比较差异无统计学意义,而对照组治疗前后差异显著.结论:黄芪可降低血吸虫病小鼠肝组织外周型苯二氮(艹卓)受体mRNA表达水平,提示黄芪可能通过此机制阻止血吸虫病肝损伤的发展.
-
荧光定量PCR测定HCV RNA对分片段ELISA法检测抗HCV可疑样本的分析
目的 利用荧光定量PCR法对分片段检测抗HCV的可疑样品进行检测,确认可疑样本的结果.方法 采用分片段检测法对ELISA法检测抗HCV总抗体阳性或可疑阳性的275份样本进行检测,并对其中26份可疑阳性(只有一项阳性)的样本,采用荧光定量PCR法来进行HCV RNA确认分析.结果 荧光定量PCR阳性率为26.9%(7/26),7例阳性样本的分片段结果均为NS3及C片段阳性,其含量与HCV RNA含量一致.结论 对于NS3及C片段阳性的结果,在条件允许下,应利用PCR法或进口试剂进行确认.而对于单片段阳性而HCV RNA阴性的结果,也不能否定HCV感染,应结合流行病学及临床表现给予确认.
关键词： 丙型肝炎抗体 荧光定量多聚酶链反应 酶联免疫吸附法 不同区抗原 -
荧光定量多聚酶链反应检测HBV-DNA
目的探讨荧光定量多聚酶链反应(Fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)检测HBV-DNA的可行性及优缺点.方法采用FQ-PCR、斑点杂交分别检测由ELISA定性的203份血清样品(大三阳、小三阳、乙肝疫苗免疫者、健康人).结果 FQ-PCR和斑点杂交阳性检出率分别是96.49%、28.24%(大三阳),85.96%、5.88%(小三阳),P<0.05;斑点杂交阴性血清FQ-PCR定量高达4.7×105 COPY/ml.结论 FQ-PCR检测HBV-DNA灵敏、可靠,优于斑点杂交法.
关键词： 荧光定量多聚酶链反应 斑点杂交 HBV-DNA
