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TRPC3参与α-突触核蛋白引起的线粒体损伤
目的 探讨经典型瞬时受体电位通道3 (transient receptor potential canonical channel 3,TRPC3)是否参与α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)引起的线粒体损伤.方法 在α-syn过表达原代培养神经元、α-syn转基因及敲除小鼠模型,利用免疫印迹和免疫荧光技术检测TRPC3和α-syn在线粒体内的定位和表达;在原代培养神经元,运用MTT和乳酸脱氢酶法检测细胞活力和受损情况,JC-1法检测线粒体膜电势,观察敲减TRPC3对α-syn过表达引起的线粒体损伤和细胞损伤的影响.结果 TRPC3和α-syn共同表达于线粒体,过表达α-syn增加TRPC3在线粒体的分布,敲除α-syn则下调TRPC3在线粒体的分布.敲减TRPC3明显减轻过表达α-syn引起的线粒体膜电势下降和细胞毒性.结论 TRPC3可能参与过表达α-syn引起的线粒体损伤.
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经典瞬时受体电位通道3在染料木黄酮抑制非小细胞肺癌H1299细胞增殖中的作用
目的：旨在探讨经典瞬时受体电位（TRPC）通道（TRPC）3在染料木黄酮（Gen）抑制非小细胞肺癌细胞增殖中的作用。方法用MTT法检测癌细胞增殖活力，用荧光定量RT－PCR和蛋白免疫印迹法检测TRPC通道表达水平，用1－油酰基－2－乙酰基－sn－丙三醇（ OAG）诱导的钙内流实验检测TRPC3功能。结果在所有Gen给药浓度，H1299细胞增殖率均低于A549细胞（P＜0．01）。 H1299细胞的TRPC3 mRNA和蛋白表达都显著高于A549细胞（P＜0．01）。用shNC和shC3i质粒转染H1299细胞，在Gen处理24、48、72 h三个时间点，shC3i及Gen处理两个转染细胞的增殖率都低于shNC细胞（P＜0．01）。在24、48 h，shC3i，shNC＋Gen 和 shC3i＋Gen三组间无差异，在72 h，shC3i＋Gen 组低于 shC3i 和 shNC＋Gen 组（P＜0．05）。 Gen对shC3i细胞的增殖抑制率（9．9％）低于其对 shNC 细胞的增殖抑制率（56％）。 Gen 处理不影响 H1299细胞 TRPC3蛋白表达，但在OAG诱导的钙内流检测，shC3i细胞，Gen处理的shNC 及 shC3i 细胞的瞬时钙内流均低于 shNC 细胞，Gen 对 shC3i 细胞钙内流抑制作用低于其对shNC细胞钙内流抑制作用。结论 Gen抑制TRPC3通道功能可能是其抑制H1299细胞增殖的作用机制。
