首页 > 文献资料
-
人α心钠素多拷贝基因在大肠杆菌中的高效表达
目的:选用合适的质粒表达载体,以多拷贝基因的形式在大肠杆菌中高效表达人α心钠素, 为人α心钠素的下游纯化工作及基因工程菌的中试打下基础.方法:采用PCR,克隆及连续亚克隆,序列分析,原核温度诱导表达等方法.结果:PCR方法扩增α-hANP基因,克隆至原核表达载体pMS31b,热诱导表达融合蛋白.结论:在大肠杆菌中获得了人α心钠素的高表达.
-
多拷贝人C肽基因的构建及其原核表达研究
目的 构建多拷贝的人C肽基因,选用合适的表达载体,以多拷贝基因的形式在大肠杆菌中高效表达人C肽.方法 采用PCR、克隆、DNA序列分析、IPTG诱导表达和亲和层析等方法构建多拷贝的人C肽基因.结果 构建成含5拷贝C肽基因的重组pET-30 a表达载体,经转化及诱导,可在大肠杆菌中高效稳定表达可溶性的带6个组氨酸标签的C肽融合蛋白.结论 在大肠杆菌中获得了人C肽的高表达,为下一步C肽的功能研究创造了重要条件.
-
人胰岛素原C肽基因高效表达载体的构建
目的:构建一种快速、高效的人胰岛素原C肽基因的表达载体,为有效地提高重组C肽的产量奠定了基础.方法:以人胰岛素原C 肽的基因序列为基础,运用DNA重组技术构建出含5个拷贝的头到尾连接的C 肽基因片段的高效表达载体.结果:通过酶切鉴定和DNA测序分析证实,实验成功地构建了人胰岛素原C肽基因的表达载体pMAL-c2E-C5.结论:人胰岛素原C肽基因表达载体pMAL-c2E-C5的成功构建,为进一步研究在大肠杆菌中表达人C肽融合蛋白,继而获得高产的单体C肽奠定了基础.
-
河南汉族群体DYF403S1和DYF404S1序列分析及多态性
目的 调查2个新的多拷贝基因座DYF403S1和DYF404S1在240例河南汉族群体无关男性个体中的遗传多态性,评价其法医学应用价值.方法 用6-FAM荧光染料标记引物,PCR扩增产物采用ABI 3500遗传分析仪检测,根据分型检测结果,分别对2个基因座的不同等位基因进行序列分析.结果 DYF403S1基因座为4拷贝,该基因座包含2种核心序列并表现出2种不同的基序,等位基因分别为23 ～ 33、38～53.DYF404S1基因座为双拷贝,等位基因为11～18.本研究中2个多拷贝基因座组成的联合单体型共229种,出现多的单体型为26-28-29-48/14-15,频率是0.016 7,仅出现1次的单体型共220种,占91.67％.单体型多样性(HD)和个体识别力(DP)分别为0.999 6和0.995 4,单体型辨别能力(DC)为0.954 2.结论 2个多拷贝基因座DYF403S1和DYF404S1在河南汉族群体中具有较高的遗传多态性.
-
武汉汉族群体3个多拷贝Y-STR基因座的遗传多态性
目的 提供DYS385、DYS459和DYS464基因座的群体遗传学资料.方法 用荧光标记引物及ABI 3100型基因分析仪对武汉地区176名汉族男性无关个体的DYS385、DYS459和DYS464 3个多拷贝Y-STR基因座进行分型.结果 在DYS385和DYS459基因座的个体,可观察到1～2个不同长度的扩增产物;DYS464基因座个体,可观察到1～4个不同长度的扩增产物.DYS385基因座检出14个等位基因及47种单倍型,DYS459检出4个等位基因及7种单倍型,DYS464检出9个等位基因及51种单倍型,其单倍型多样性分别为0.9591、0.6047和0.9560.3个基因座构成的联合单倍型共有133种,其多样性值达0.9909.结论 3个多拷贝Y-STR基因座均为高多态性的遗传标记,联合应用具有较高的个体分辨能力.
