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红参提取物对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用及其机制研究
目的 探讨红参提取物(RG)对D-半乳糖(D-gal)所诱导的亚急性衰老小鼠模型的保护作用及与肿瘤坏死因子(TNF)-α、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)1、GPX2、白细胞介素(IL)-13、IL-6、IL-10的相关性.方法 以D-半乳糖制备亚急性衰老小鼠模型,随机分为对照组、模型组、RG低、中、高剂量组(100,200,400 mg·kg-1).造模同时给药42d后,测定脾脏指数;比色法测定血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)、血清中的乙酰胆碱酯酶(AChE)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、诱导型一氧化氮合成酶(i-NOS);ELISA法测定脑组织中的环氧合酶-2(COX-2)、TNF-α、IL-1β及IL-6的水平;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测脑组织中TNF-α、GPX1、GPX2、IL-1β、IL-6及IL-10 mRNA表达.结果 RG能增强衰老模型小鼠的脾脏指数,提高血清和脑组织中的SOD、血清中的AChE、CAT、GSH-PX活性,降低血清和脑组织中MDA,及血清中iNOS和脑组织中COX-2、TNF-α、IL-1β及IL-6的含量.同时明显抑制小鼠脑组织中TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA表达量,增加脑组织中GPX1、GPX2及IL-10的mRNA表达量,且具有统计学意义.结论 RG具有明显的抗衰老作用,其机制可能与TNF-α、GPX1、GPX2、IL-1β、IL-6及IL-10表达、增强机体免疫能力、清除自由基和炎症因子有关.
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谷胱甘肽过氧化物酶2干涉慢病毒系统构建及对人肝癌细胞凋亡的影响
目的:构建人谷胱甘肽过氧化物酶2(Glutathione peroxidase 2, GPX2)慢病毒干涉载体,获得稳定下调GPX2的高滴度慢病毒,检测敲低GPX2对细胞凋亡的影响。方法通过筛选具有显著干涉效果的siRNA序列,构建pSicoR-GPX2慢病毒干涉载体,包装病毒并感染人肝癌HepG2细胞,分别用Western-blot和RT-PCR方法检测GPX2表达情况,应用流式细胞术分析敲低GPX2对人肝癌细胞凋亡的影响。结果成功构建pSicoR-GPX2干涉慢病毒载体并获得高滴度慢病毒颗粒,GPX2蛋白表达水平和RNA表达水平均有显著下调,且人肝癌细胞感染GPX2干涉慢病毒后对凋亡更加敏感,其原因可能是促凋亡蛋白Bax的活化和抗凋亡蛋白Bcl-2活性的抑制。结论成功构建人GPX2基因干涉慢病毒,为肝癌靶标治疗提供新的线索,为后续GPX2功能研究奠定基础。
关键词: 谷胱甘肽过氧化物酶2 慢病毒 RNA干涉 凋亡 -
谷胱甘肽过氧化物酶2、硒及莱菔硫烷在小鼠结肠癌中的相互作用
慢性炎性和硒元素的缺乏被认为是结肠癌发病的危险因素.其中硒元素可能通过特异性硒蛋白介导发挥保护作用.通过给予野生型和GPx2基因敲除鼠不同硒含量的饮食,研究在不同硒水平以及防癌药物莱菔硫烷SFN的干预下GPx2基因敲除鼠和野生鼠对结肠癌的易感性.终证实,尽管GPx2虽然促进肿瘤的生长,抑制炎性介导的肿瘤的发生,但是硒抑制肿瘤的保护作用不完全依赖GPx2的表达.同样的,SFN发挥保护作用需要硒的参与而不是GPx2.
关键词: 谷胱甘肽过氧化物酶2 硒 莱菔硫烷 结肠癌