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柯萨奇-腺病毒受体不同胞内功能域缺失突变载体的构建与表达
目的 以柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)蛋白结构的功能解析作为切入点,构建不同CAR胞内域缺失突变的表达载体.方法 利用定点缺失突变策略构建CAR胞内域PKC、CK2、TYR磷酸化位点的缺失突变体及胞内域完全缺失的突变体.利用三步PCR法扩增获得相关的基因片段后,将其克隆入真核表达载体 pcDNA3.1/V5/His,通过双酶切及测序进行鉴定后,分别转染至低表达CAR的人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中,并用Werstern blot检测细胞转染后CAR的表达水平.结果 所有突变体经过测序分析均证实序列与设想的突变序列相符,各突变体在SKOV3细胞中获得了满意的表达.结论 成功构建不同CAR胞内功能域缺失突变表达载体,为后续研究CAR及其胞内不同功能域在卵巢癌中的作用机制提供了研究基础.
关键词： 柯萨奇-腺病毒受体 功能域缺失突变重组体 卵巢癌 -
柯萨奇-腺病毒受体与病毒性心肌炎
柯萨奇-腺病毒受体是一种普通的存在于心肌细胞表面的病毒受体,作为柯萨奇病毒和腺病毒的共同受体,在它们感染心肌细胞的过程中起着关键性的作用.
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E-cadherin和CAR在人膀胱癌细胞中的表达及其意义
目的 榆测上皮型钙黏素(E-cadherin)和柯萨奇-腺病毒受体(coxsackie and adenovirus receptor,CAR)在多种人膀胱癌细胞中的表达情况,初步讨论E-cadherin与CAR在人膀胱癌细胞中表达的意义及两者间的关联.方法 用Western印迹法测定人膀胱癌细胞中E-cadherin和CAR的表达情况.结果 E-eadherin、CAR在RT4、5637细胞中表达较高,在253J细胞中表达较低;E-cadherin在J82、T24细胞中不表达,CAR在JSZ细胞中微弱表达,在T24中不表达.结论 E-cadherin和CAR在人膀胱癌细胞中的表达趋势一致,两者可能相互协作,共同参与膀胱癌的侵袭转移过程.
