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重组人干扰素α2b体外广谱抗呼吸道病毒药效学研究
评价重组人干扰素α2b体外广谱抗呼吸道病毒的药效.本实验在细胞水平采用实时荧光定量RT-PCR法检测重组人干扰素α2b抗A型流感病毒药效.采用细胞病变(CPE)法检测重组人干扰素α2b抗B型流感病毒、副流感病毒(HPIV)、呼吸道合胞病毒(RSV)和冠状病毒的药效.结果表明,3次实验中,重组人干扰素α2b对副流感病毒的平均治疗指数为1 476.63、对呼吸道合胞病毒的平均治疗指数为141.37、对冠状病毒的平均治疗指数大于2 820.76,药效均强于利巴韦林(RBV).重组人干扰素α2b对不同A型流感病毒的RNA有很强的抑制作用,药效强于对照药物.重组人干扰素α2b对B型流感病毒的治疗指数为2.74,治疗效果一般.结果提示,重组人干扰素α2b在体外具有很好的广谱抗呼吸道病毒的活性,且毒性低,治疗指数高,有望成为临床治疗呼吸道病毒感染的特效药,更好的服务于呼吸道病毒感染的预防和治疗.
关键词： 重组人干扰素α2b 呼吸道病毒 细胞病变法 MTT法 实时荧光定量RT-PCR法 -
10种中成药体外抗流感病毒活性研究
流感是一种高发病率和高死亡率的上呼吸道传染病,我国是流感高发区.国际上预防与治疗流感的主要措施是疫苗接种和抗病毒化学药物治疗.除此之外我国临床上还利用传统中药进行抗流感病毒治疗.本研究采用细胞病变(CPE)法,对10种中成药进行体外抗流感病毒活性检测.厂家H生产的清热解毒口服液体外对A/广东罗湖/219/2006(H1N1)具有较强的抑制活性;银黄口服液对A/汉防/359/95和A/粤防/243/72,厂家G生产的清开灵口服液对A/济防/15/90,厂家H生产的清热解毒口服液对A/济防/15/90、A/粤防/243/72和B/深圳/155/2005具有较强的抑制活性.
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藏药甘青乌头抗单纯疱疹病毒Ⅱ型体内外作用研究
目的 探讨藏药甘青乌头抗单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)的作用和机制.方法 MTT法测定甘青乌头对Vero细胞的毒性,采用细胞病变法和蚀斑法测定甘青乌头体外抗病毒活性,以半数抑制浓度和治疗指数为评价指标;定量荧光PCR法和蚀斑法考察甘青乌头体外抗病毒作用机制.用HSV-2建立小鼠脑炎模型,对甘青乌头体内抗单纯疱疹病毒的抗病毒活性进行评价.结果 甘青乌头对Vero细胞的半数中毒浓度(CC50)为5.57 g·L-1.细胞病变法和蚀斑法测得甘青鸟头的半数有效浓度(EC50)分别为2.25,1.68 g·L-1,治疗指数TI分别为2.47,3.32.LD50值为0.85 g·kg-1.甘青乌头延长了小鼠的平均存活时间,对小鼠的死亡显示出10%的保护率.甘青乌头能直接灭活HSV-2,能够显著抑制HSV-2的感染性;对病毒吸附到细胞没有抑制作用,能抑制HSV-2大分子的增值.抑制HSV-2 DNA合成的抑制倍数达102.结论 甘青乌头体外具有较强的抗HSV-2的活性,抗病毒作用是通过抑制病毒复制循环的各个环节起作用的.
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999感冒灵颗粒抗呼吸道合胞病毒的初步研究
目的 探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用.方法 采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒( RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增殖和阻断作用)及不同给药浓度下对 RSV的抑制作用.测定细胞的半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI).结果 细胞的TC50为25 mg/ml;直接灭活和抑制增殖均对RSV有明显作用( P ＜0.01 );采用直接灭活方式时,其 IC50为7.43 mg/ml,TI为3.36;采用抑制病毒增殖时,其IC50为4.42 mg/ml,TI为5.66. CCK-8 法结果显示,在阻断以及抑制吸附两种给药方式下,病毒抑制率与病毒对照组之间差异无统计学意义.结论 999 感冒灵颗粒在直接灭活以及抑制病毒增殖两种给药方式下对RSV有一定的抑制作用.
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细胞病变法与MTT法在药物毒性实验中的应用
目的了解细胞病变法与MTT法在中药金叶败毒、更昔洛韦(GCV)毒性实验中的应用效果.方法体外培养小鼠胚肺细胞,将细胞接种96孔板,细胞长成单层后,分别用细胞维持液将金叶败毒、GCV稀释成6个不同浓度,设正常细胞对照,置培养箱培养72h,用细胞病变法与MTT法分析金叶败毒、GCV对小鼠胚肺细胞的大无毒浓度(TD0).结果用两种方法测得的两种药物的TD0是一致的.结论用细胞病变法和MTT法来检测药物TD0,提高了实验的准确性.
