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强次声波对豚鼠前庭终器超微结构的损伤
目的观察强次声波对豚鼠前庭终器超微结构的损伤情况.方法将豚鼠置于频率8 Hz、强度为135 dB(声压级)的次声声场中连续暴露90 min.应用扫描电镜和图像分析技术对强次声波所致的前庭终器损伤进行定量研究,分别观测强次声波暴露后即刻(2 h内)、2 d和7 d时动物外半规管壶腹嵴嵴顶受损区平均毛细胞静纤毛束密度(AHBD)、各半规管壶腹嵴、椭圆囊斑和球囊斑的受损率. 结果强次声波暴露后各存活期动物外半规管壶腹嵴嵴顶区AHBD分别为(6.90±4.95)、(6.70±5.27)和(5.60±4.65)束/900μm2,均明显低于正常对照组的(16.25±0.71)束/900 μm2(P＜0.01).外、上、后三个半规管壶腹嵴受损率为40%～90%,椭圆囊斑和球囊斑受损率分别为10%～30%和30%～50%.损伤早期的病理变化可见前庭终器感觉毛细胞动、静纤毛缺失、倒伏、散乱,散在性毛细胞(HC)表皮板破裂,在较长存活期,还可见到纤毛融合,部分细胞的表皮板破裂,与支持细胞分离,细胞溶解,形成空洞.前庭终器受损的特点是壶腹嵴重于球囊斑和椭圆囊斑. 结论强次声波可对豚鼠各前庭终器超微结构造成不同程度的损伤.
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消化管壁的超微结构及Cajal细胞的形态特征
胃肠道蠕动运动和心脏相似,具有自动节律性.它主要受四种因素的调节:肠道神经系统,平滑肌本身,体液调节和Cajal细胞.前三者和其他脏器的神经及体液调节大同小异,惟有Cajal细胞为胃肠道所特有.Cajal细胞是西班牙著名神经解剖学家Cajal应用镀银染色技术 ,在胃肠道壁内所描述的一种特殊细胞;它主要分布于肌间神经丛周围和深肌丛附近.对于它的形态、生物学特性、超微结构及其功能等,研究者之间意见分歧较大.80年代初,丹麦学者Thuneberg提出它可能具有Pacemaking activity,从而掀起了对Cajal细胞的研究热潮.我们利用传统的染色方法和现代的免疫染色、原位杂交以及电子显微镜技术,对肌间神经丛周围和深肌丛附近的Cajal细胞的形态、生物学特性及功能进行了较系统的研究,现将部分结果介绍如下:碘化锌-锇酸方法(此方法具有镀银染色的特性),全层铺片,蛋白酶、盐酸消化扫描电子显微镜技术显示肌间神经丛周围Cajal细胞的细胞体为圆形或三角形,有3-5个突起, 突起反复分枝,彼此形成细胞网,分布在肌间神经丛周围.透射电镜观察发现:Cajal 细胞的超微结构既不同于平滑肌、又有别于成纤维细胞,属于一种特殊的细胞,具有丰富的线粒体、中间丝、微管.利用c-kit基因突变大鼠模型研究表明:该动物小肠肌间神经丛周围的Cajal细胞80-90%丢失,细胞网消失,突变大鼠胃肠道运动明显减慢, 呈麻痹性扩张状态,提示该部位的Cajal细胞为胃肠道运动起搏细胞.与肌间神经丛周围Cajal细胞不同,c-kit基因突变对深肌丛附近Cajal细胞的形态、数量等无明显影响,提示不同部位Cajal细胞的表型和功能可能不完全相同. 利用连续超薄切片(60nm厚,700张),计算机三维重建和电镜蒙太奇技术发现:深肌丛附近Cajal细胞含大量糖原颗粒(糠原颗粒占细胞体积的9%),丰富线粒体,具有完整的基底膜,细胞突起间有较大的缝隙连结.其连结蛋白为Connexin 43.上述形态特点符合兴奋传导细胞所需大量能源的结构特征,提示小肠深肌丛附近的Cajal细胞可能参与肠道运动的兴奋传导过程.我们的研究结果为胃肠道存在与心脏相似的兴奋传导系统奠定了重要的形态学基础.
