首页 > 文献资料
-
miR-221/222激活Akt通路增加恶性胶质瘤的放射抗性
目的 探讨miR-221/222增加恶性胶质瘤放射抗性的机制.方法 实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测U251、U87及LN229系胶质瘤细胞在接受照射后3和6 h miR-221/222的表达水平;通过平板克隆形成实验,观察敲低U251、U87及LN229系胶质瘤细胞miR-221/222后肿瘤细胞放射敏感性的变化;染色质免疫沉淀技术(ChIP)检测c-jun与miR-221/222的结合情况;虫荧光素酶活性报告试验验证PTEN是miR-221/222的靶基因;使用Western blot检测敲低胶质瘤细胞miR-221/222后的相关蛋白的表达;通过胶质瘤裸鼠模型,观察敲低miR-221/222后放射治疗的效果.结果 U251、U87及LN229系胶质瘤细胞在接受照射后miR-221/222的表达上调(t=5.48 ～ 29.21,P＜0.05);敲低胶质瘤细胞miR-221/222后,其放射敏感性提高(F=1 202.22,1 789.12,1 012.32,P＜0.05); c-jun转录调控miR-221/222的表达;PTEN是miR-221/222的靶基因(t=13.16,P＜0.05);Western blot检测显示,敲低胶质瘤细胞miR-221/222后,pAkt及DNA-PKcs的表达下调,PTEN和GSK-3β的表达上调,Akt表达保持稳定;体内实验结果显示,敲低miR-221/222的表达联合放射治疗可显著抑制胶质瘤的生长(F =56.36,P＜0.05).结论 放射可诱导胶质瘤细胞miR-221/222的表达上调,miR-221/222通过激活Akt通路增加恶性胶质瘤的放射抗性.
关键词： 恶性胶质瘤 放射抗性 MiR-221/222 DNA损伤 AKT -
MiRNA-221/222对肝癌的影响研究进展
MicroRNAs(miRNAs)在人类肿瘤致瘤生长机制的作用在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中已经通过基因增殖和功能性研究所证实.肝癌中异常表达的miRNAs与其他类型的肿瘤有密切关系,其中较为独特的是上调的miR-221/222.MiR-221/222是高度同源基因,在HCC中明显上调,被认为是致瘤基因.本文对miR-221/222的分子及生物机制进行综述,并对其作为新的HCC诊断及治疗工具的可能性做出探讨.
关键词： 肝癌 miRNAs MiR-221/222 -
miR-221/222通过促人胎盘滋养细胞HTR-8凋亡参与妊娠期肝内胆汁淤积症的发病机制
目的 研究miR-221/222对人滋养细胞HTR-8/SVneo(简称HTR-8细胞)增殖、凋亡和凋亡相关蛋白的影响,了解其促人滋养细胞凋亡作用,探讨miR-221/222通过促进人滋养细胞凋亡损害胎盘胆汁酸转运功能,参与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发生与发展的机制.方法 实验分为转染组和阴性对照组,转染组用瞬时转染方法将miR-221/222 mimic转入HTR-8细胞中,阴性对照组用相同方法将mimic NC转入HTR-8细胞.转染48 h后用RT-qPCR检测转染效率,CCK-8检测HTR-8细胞增殖情况,流式细胞术分析HTR-8细胞凋亡变化,Western blot检测HTR-8细胞内凋亡抑制蛋白B-cell lymphoma 2(简称bcl-2)的表达.数据比较用t检验.结果 与阴性对照组(1.14±0.14、1.58±0.14)相比,miR-221/222转染组(25.43±0.80、22.70±0.95)在HTR-8细胞内表达量明显升高,P值均＜ 0.01,差异具有统计学意义;miR-221/222转染组bcl-2蛋白表达量分别为(0.56±0.03、0.53±0.03),与各自阴性对照组(0.72±0.003、0.76±0.04)相比,蛋白表达量下降,P值均＜ 0.05,差异具有统计学意义;与miR-221/222阴性对照组(8.827±0.48、11.80±0.45)相比,miR-221/222转染组(42.53±4.47、24.09±2.53)细胞凋亡明显增加,P值均＜ 0.01,差异具有统计学意义;miR-221/222转染组增殖率分别为(0.82±0.02、0.74±0.01),与对照组(1.15±0.08、1.06±0.08)相比增殖被抑制,P值均＜0.05,差异具有统计学意义.结论 miR-221/222可能通过下调凋亡抑制蛋白bcl-2的表达促进人滋养细胞凋亡,导致胎盘功能障碍,损害胎盘正常胆汁酸转运功能,其机制可能参与了ICP的发生与发展.
关键词： 肝内胆汁淤积症 妊娠期 MiR-221/222 细胞凋亡
