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血细胞处理仪的改进研究
目的：对血细胞处理仪（ BBS926型全自动医用低速离心机）处理冰冻红细胞技术进行改进研究，确定冰冻红细胞洗涤程序和效果。方法取源于400 ml （2 U）全血的健康献血者悬浮红细胞，-80℃冰冻保存，采用血细胞处理仪对解冻红细胞进行处理，在初始程序（程序1）洗涤冰冻红细胞的基础上，通过对洗液量和洗涤步骤等进行改进，形成新的优化程序（程序2）洗涤冰冻红细胞；对两组程序洗涤后的冰冻红细胞质量进行评价。结果两组洗涤程序（程序1和程序2）处理后的冰冻红细胞质量各项指标检测：血红蛋白（Hb）含量（g）分别为37．55±3．58和42．18±3．35（P＜0．05），游离血红蛋白（FHb）含量（g/L）分别为0．51±0．08和0．53±0．07（P＞0．05），白细胞残留量（×107个）分别为1．90±0．99和1．92±1．04（P＞0．05），晶体渗透压（mOsm）分别为334±8．03和327±9．06（P＞0．05），无菌实验普通细菌和真菌检测均为阴性。红细胞体外溶血率（％）分别为12．44±8．24和12．02±5．78（P＞0．05），红细胞变形性（EI）分别为21．40±1．41和21．42±1．45（P＞0．05），红细胞回收率（％）分别为72．02±3．70和77．18±5．58（P＜0．05），红细胞凋亡（％）分别为1．12±0．54和1．10±0．61（P＞0．05），洗涤时间（min）分别为79．00±0．71和79．60±0．55（P＞0．05）。结论两组洗涤程序洗涤冰冻红细胞质量均达到国家冰冻解冻去甘油红细胞质量控制要求，改进后洗涤程序2处理的冰冻红细胞Hb含量和红细胞回收率有一定提高；程序2洗涤效果优于程序1。
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高原环境下冰冻红细胞洗涤效果评价
目的 验证血细胞处理仪在高原环境下的冰冻红细胞处理性能,确定在高原低氧、低气压、低温、低湿度、强辐射、强紫外线等特殊自然环境条件下冰冻红细胞洗涤效果.方法 分别在拉萨和林芝设试验监测点(组1、组2),取源于健康献血者400 ml全血的去白细胞悬浮红细胞,-80℃冰冻保存,用血细胞处理仪对解冻红细胞进行去甘油化处理,检测洗涤后冰冻红细胞质量.结果 两组血红蛋白含量(g)分别为37.67 ±3.92和41.78 ±5.24,游离血红蛋白含量(g/L)分别为0.39 ±0.15和0.51 ±0.21,晶体渗透压(mOsm)分别为320 ±7.71和316 ±13.15,无菌实验普通细菌和真菌检测均为阴性.结论 在高原条件下洗涤后冰冻红细胞质量均达到国家冰冻解冻去甘油红细胞质量控制要求.
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远距离外出采血对红细胞保存质量的影响
目的 比较远距离外出采血对红细胞保存质量的影响.方法 20份街头献血屋采集的血液采集后置2～6℃冰箱存放,2h后分离出红细胞悬液放入2～6°C冰箱贮存,为对照组；20份外出采血血液采集后置室温30～33℃1～2 h,18 ～22℃路程4h后分离出红细胞悬液放入2～6℃冰箱贮存为实验组(远距离采血组).在保存期内每隔3d检测两组血液红细胞ATP,血浆游离血红蛋白(FHb),棘形红细胞率,细胞外液K+浓度.结果 4个检测值在各时间点的变化都存在非常显著性差异(P＜0.01).随着储存时间的延长实验组的红细胞ATP含量下降的幅度逐渐大于对照组,d34实验组红细胞ATP值为1.78±0.22 umol/g.Hb,但两组间的变化未见统计学差异(P＞0.05).实验组FHb浓度及棘形红细胞率的升高随时间的变化明显大于对照组,两组间对比有统计学差异(P＜0.05).细胞外液K+浓度在dl的均值两组间差异有统计学意义(P＜0.05),且随着储存时间的延长而明显升高,但2组间的差异不显著(P＞0.05).结论 因血液受采血后温度、振动及时间等的综合作用,远距离外出采血会影响保存期后期的红细胞质量,应尽早使用.
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添加SNP的储存红细胞在37℃孵育后NO及ATP含量变化
目的 探讨于储存红细胞中添加一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)在37℃体温环境下孵育后红细胞中NO及三磷酸腺苷(ATP)含量变化.方法 采集5名健康捐血者血液标本100 mL/(人)份,与CPDA-1保存液混合制备成悬浮红细胞后,分为新鲜组:血液采集时间＜1 h;储存组:储存红细胞20 d;添加组:在储存红细胞中添加1、5、25μmol/L SNP后37℃孵育30 min;保存组:添加5μmol/L SNP,孵育30 min于4℃保存0、1、4h.新鲜组、储存组及添加组和保存组每个处理均为5份.采用总NO试剂盒检测各组红细胞中总NO、胞浆NO、结合NO含量;运用ATP含量测试盒检测红细胞中ATP含量水平.结果 总NO、胞浆NO、结合NO含量(μmol/L)和ATP含量水平(μmol/gib),储存组与新鲜组分别为:7.63±2.62 vs 15.56±2.26,、2.21±1.68vs 5.81±1.79、5.42±2.00 vs 9.75±2.73和3.16±0.91 vs 8.10±1.21(P ＜0.05);在37℃环境添加1、5、25μmol/L SNP孵育30 min时,添加5μmol/L SNP的储存组为14.15±1.76、5.82±3.38、8.33±2.69和6.16±1.29,较储存组明显升高(P＜0.05).添加25 μmol/L SNP可以提高红细胞内NO水平至正常的5-10倍,但不能进一步提高细胞内ATP水平.添加5μmol/L SNP在37℃孵育30 min后继续在4℃保存1h时3种NO含量以及ATP含量可恢复到新鲜组水平,保存4h后NO含量与保存O和1h相比含量明显下跌至储存组水平,而ATP在保存4h时均维持高水平状态.结论 在储存红细胞中添加5μmol/L SNP或可能改善储存红细胞的质量.
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噻唑橙光化学法病原体灭活对红细胞质量的影响
目的 评价噻唑橙(TO)光化学法病原体灭活处理对红细胞质量的影响.方法 设实验组(n=10):悬浮红细胞经TO光化学法处理后,在4℃储存0、7、14、21、28、35 d时,分别测定pH、溶血率、钾浓度、ATP浓度、2,3-DPG浓度；对照组(n=10):悬浮红细胞未经TO光化学法处理,测定时间、项目同实验组.结果 保存过程中实验组pH、2,3-DPG(μmol/gHb)及ATP( μmol/gHb)下降趋势均与对照组差异不大(P＞0.05),实验组分别从0d的7.03±0.07、9.43±1.14、4.23±0.58下降到35 d的6.57±0.06、0、2.40±0.49,对照组分别从0d的6.95±0.09、10.67±1.17、5.18 ±0.64,下降到35 d的6.57±0.07、0、2.99±0.44;实验组和对照组35 d储存期末ATP浓度分别为0d时的56.7％和57.7％.；实验组在储存期末,溶血率为(0.27±0.06)％,略高于对照组0.11±0.04％(P＜0.05),仍满足溶血率≤0.8％的国标要求；钾外漏实验组较对照组增加,35 d时分别为(40.41±2.94) mmol/L和(28.33±3.34) mmol/L(P ＜0.01).结论 TO光化学法处理对储存过程中的红细胞的质量影响较小.
