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双向电泳法比较两种蛋白质组样品制备方法
目的:比较两种破碎方法提取的蛋白质样品在双向电泳(2-DE)中的分离效果。方法用超声破碎和玻璃珠振荡破碎方法分别制备革兰阴性菌、革兰阳性菌、动物组织的蛋白抽提样品,通过2-DE比较两种制样方法的实际效果。结果获得了革兰阴性菌、革兰阳性菌、动物组织在两种制样条件下的2-DE图。结论通过对比不同样品的电泳结果发现,玻璃珠振荡破碎法制样背景更低,更有利于后续的图像分析。
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超声破碎法及匀浆法提取鹿茸多肽的比较研究
目的 探讨从鹿茸中提取鹿茸多肽的佳提取方法.方法 分别采用匀浆法和超声破碎法在新鲜鹿茸中提取鹿茸多肽(velvet antler polypeptiddes,VAP),对提取时间及提取后鹿茸多肽的蛋白质浓度进行比较分析.结果采用胶体磨匀浆法所得数据为:当匀浆6h后,提取得到的鹿茸多肽蛋白质浓度为0.42 mg/mL;采用超声破碎的方法时,当超声40min时,鹿茸多肽蛋白质浓度为1.61 mg/mL,其蛋白质浓度是应用匀浆法提取时的4倍.结论 2种方法相比,采用超声破碎的方法提取鹿茸多肽,不仅可以节约时间,而且提高了鹿茸多肽的提取量,是较为理想的鹿茸多肽的提取方式.
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重组人白细胞介素-6包涵体精制工艺研究
目的 建立重组人白细胞介素-6(recombinant human interleukin-6,rhIL-6)包涵体精制工艺,获取高纯度的包涵体蛋白.方法 采用超声破碎法和生物酶解法破碎细胞;摸索洗涤缓冲液中尿素的适当浓度,经多次洗涤获取高纯度的包涵体蛋白.结果 成功建立了rhIL-6包涵体蛋白的精制工艺,其中尿素浓度为2.0 mol/L,溶菌酶浓度达到0.8 mg/g菌体.包涵体蛋白洗涤后纯度达到90%以上.结论 建立合理的精制工艺,包涵体蛋白纯度达到90%以上.