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  • 神经元损伤修复机制研究的离体模型--体外培养原代神经元损伤模型的建立及损伤后c-Fos蛋白表达

    作者:阙海萍;贾宇峰;刘少君

    目的:建立一个模拟脊髓全横断损伤后脊髓组分--原代培养的脊髓神经元损伤的模型.方法:取Wistar大鼠(孕14 d)脊髓,培养10~12 d后,采用所设计的标准模板,直视下进行损伤.观察损伤前后不同时间神经元的形态及即刻早期基因c-fos的表达变化.结果:在损伤8~12 h后,损伤两侧存活的神经元突起便开始朝着损伤部位生长,随着时间的延长,神经元突起甚至可跨越损伤处而延伸至对侧.c-fos基因在损伤后10 min即有表达,2 h达到高峰,随后逐渐下降.结论:此模型可用于模拟体外培养的脊髓神经元受到机械损伤以及观察神经元损伤后进行修复的一些分子事件,简便而可靠,实用性较强.

  • S100β在体外培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞损伤后的表达研究

    作者:胡玲;余彬华;陈晓刚;陈锐;刘敏

    目的:观察体外培养星形胶质细胞损伤后S100β的表达变化,进一步了解脑损伤修复的分子机制,以期为法医病理学鉴定提供更多的依据.方法:取出生后24 h内SD大鼠大脑皮质进行星形胶质细胞体外分离培养和纯化.随机分为对照组和损伤后30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d组,应用ABC法检测不同时间段S100β表达的差异.结果:体外培养星形胶质细胞的纯度达95%以上.对照组可见少量S100β蛋白表达;损伤后30 min,S100β开始增加,3~6 h达高峰,随后下降,24 h时低于对照组水平,此后略有上升,7 d时恢复至对照组水平.结论:机械性划痕损伤后S100β总体表达呈单峰,而在体动物实验结果表明大鼠大脑损伤后S100β总体表达成双峰趋势,但均具有时序性变化规律,说明损伤后S100β表达可为脑损伤时间的推断依据之一;体外培养细胞损伤模型对组织细胞损伤的分子机制研究具有优越性.

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