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持续性根尖周炎优势菌粪肠球菌生物膜形成能力的体外研究
目的：比较持续性根尖周炎优势细菌粪肠球菌( Enterococcus faecalis,E． faecalis)标准菌株与临床菌株生物膜体外形成能力。方法 E． faecalis 标准菌株 ATCC 29212及持续性根尖周炎分离的 E． faecalis 临床株lcl1709,体外形成生物膜,采用激光扫描共聚焦荧光显微镜(LSCM)观察并对比在12、24、36、48h时2种生物膜形成面积；使用96微孔板结晶紫染色法检测并比较在12、24、36、48h时两者生物膜形成量。结果 ATCC 29212菌株培养12、24、36、48h在离体牙根尖表面生物膜形成面积(μm2)分别为47．577±45．221,206．935±122．596,558．782±330．877,1865．023±702．539；lcl1709的为62．227±33．040,461．578±285．281,1211．077±515．262,2632．515±1332．914。36h与48h lcl1709形成的生物膜面积显著高于ATCC 29212(P<0．05)。12、24、36、48h的生物膜OD590值ATCC 29212菌株分别为0．048±0．001,0．130±0．025,0．148±0．022,0．137±0．021；lcl1709菌株分别为0．096±0．029,0．162±0．015,0．201±0．042,0．235±0．078。 lcl1709生物膜OD590值显著高于ATCC 29212(P<0．05),随时间延长,各组OD590值显著增大( P<0．05)。结论 E． faecalis可形成生物膜,持续性根尖周炎分离的E． faecalis菌株生物膜形成能力强于标准菌株,可能与其致病性密切相关。
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持续性根尖周炎中粪肠球菌临床株的分离与鉴定
目的 优化持续性根尖周炎优势菌粪肠球菌临床株的分离、培养、鉴定方法,分离获得粪肠球菌临床菌株.方法 选择30例持续性根尖周炎患者,严格无菌行根尖手术,从切除的根尖及根尖周病变组织中分离培养粪肠球菌临床株,通过形态学观察、生化鉴定及16SrRNA基因扩增测序分析特异性片段扩增方法进行鉴定,获得粪肠球菌菌株.结果 临床样本中培养出乳白色、边缘光滑、隆起的菌落、革兰氏染色阳性的球菌17例,生化检测该菌株耐低温、高温、盐、碱特性及糖代谢特点符合粪肠球菌生化特点,16SrRNA基因扩增测序,经过与NCBI数据库比对,与粪肠球菌致病菌16SrRNA基因序列相似度近99％菌株15例,特异性引物扩增可得到目标条带菌株15例.结论 从30例持续性根尖周炎中分离获得粪肠球菌临床株15株.
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持续性根尖周炎中牙龈卟啉单胞菌的分离与鉴定
目的:建立持续性根尖周炎中牙龈卟啉单胞菌的分离鉴定方法.方法:选择持续性根尖周炎患者5例,通过严格无菌的根尖手术,从切除的根尖及根尖周组织中获得临床标本,厌氧分离提纯培养,通过形态学观察,生化反应鉴定及分子生物学16SrRNA特异性片段扩增测序,得到牙龈卟啉单胞菌临床分离菌株.结果:5例临床样本得到4株培养墨黑色菌落,表面似金属光泽,完全溶血.革兰染色为阴性球杆菌.生化反应符合牙龈卟啉单胞菌生化特点,琼脂糖凝胶电泳得到目标条带,4株临床菌株16SrRNA基因扩增测序,与NCBI数据库对比,得到一株临床菌株与牙龈卟啉单胞菌16SrRNA基因相似度大于99.6％,其余3株为中间普雷沃菌.结论:本研究严格选取临床样本,形态学方法、生化学方法以及分子生物学鉴定方法可分离并严格有效鉴定分离菌株,从持续性根尖周炎中分离获得牙龈卟啉单胞菌临床株,为研究持续性根尖周炎中牙龈卟啉单胞菌的致病机制奠定基础.
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持续性根尖周炎根尖区微生物群落多样性分析
目的：了解持续性根尖周炎患牙根尖段微生物群落的组成和多样性。方法：在根尖外科手术过程中采集13例持续性根尖周炎患牙根尖段样本，提取样本中微生物群落的总 DNA。采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis，PCR-DGGE）技术分析其微生物群落组成的多样性。对 DGGE 图谱上的条带进行割胶测序。结果：根尖段微生物群落为多菌种组成的细菌群落。但各样本间的相似度不高，菌群组成存在一定的差异。从DGGE 凝胶上共获得26条可辨认的条带，检出菌种包括兼性厌氧菌、专性厌氧菌和需氧菌。其中，口腔放线菌属和口腔丙酸菌属的检出率较高，分别是84．6％和61．5％。结论：持续性根尖周炎患牙根尖段微生物群落为由多菌种组成的细菌群落。口腔放线菌属和口腔丙酸菌属有可能是持续性根尖周炎的条件致病菌。
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持续性根尖周炎患牙根管外细菌定植状态的观察
目的 了解根管外细菌在持续性根尖周炎患牙根尖区根面上的定植状态,以探讨根管外生物膜在持续性根尖周感染致病机制中的意义.方法 采用扫描电镜与组织病理学染色相结合的方法,观察正畸拔除牙(5例)和持续性根尖周炎(10例)患牙根尖区根管外生物膜的分布和结构.拔牙和根尖外科手术过程获得的根尖样本经洗涤、固定和冷冻干燥后,用扫描电镜(无损伤性)观察根尖区外表面的超微结构.同样的样本再经过脱钙和横断面连续组织切片后,进行细菌Brown &Brenn染色观察.结果 在扫描电镜下,正畸拔除牙的根尖区结构无异常.所有持续性根尖周炎患牙的根尖区呈现病变状态,根尖区几乎没有胶原纤维的覆盖,牙骨质暴露和吸收,其表面观察到根管外生物膜结构.细菌Brown &Brenn染色结果显示,根管外生物膜由大量基质成分包裹的红染的革兰阴性菌和呈紫色的革兰阳性菌相互交织排列形成,其厚度约为18 ～30 μm.结论 根管外细菌以生物膜形式定植在持续性根尖周炎患牙根尖区外表面,根管外生物膜的存在有可能是导致持续性根尖周感染的重要因素之一.
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米诺环素联合vitapex糊剂治疗持续性根尖周炎的临床研究
目的:观察盐酸米诺环素联合vitapex糊剂治疗持续性根尖周炎的临床疗效和安全性.方法:102例持续性根尖周炎患者按随机数字表法分为对照组51例和试验组51例,对照组采用碘仿氢氧化钙糊剂治疗,试验组采用vitapex糊剂一次根管和盐酸米诺环素软膏治疗,于治疗后2周和3个月,观察患者的临床疗效和不良反应,视觉模拟评分法(VAS)评价疼痛程度,ELISA检测外周血炎症因子水平.结果:2周试验组患者总有效率为86.27％,明显高于对照组的64.71％(x2=6.411,P=0.011);3个月试验组患者总有效率为94.12％,明显高于对照组的70.59％(x2=9.714,P=0.002).治疗后,两组患者的VAS均降低,3个月VAS明显低于2周,且试验组VAS明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).治疗后两组患者TNF-α、IL-2和IL-8水平均降低,3个月明显低于2周,且试验组明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者均未见明显不良反应和不适症状.结论:盐酸米诺环素联合Vitapex糊剂可减轻患者的疼痛程度,降低炎症反应,临床疗效确切,且安全性较好,值得推广应用.
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97例显微根尖外科手术短期疗效评估
目的:评价显微根尖外科手术治疗97例持续性根尖周炎短期临床疗效.方法:对97例持续性根尖周炎的病例进行显微根尖手术,手术过程包括翻瓣、骨开窗、根尖切除、超声倒预备、MTA倒充填.所有患者术后1年复查进行临床和影像学检查,采用卡方检验分析.结果:97例患者术后1年随访,57.7％成功,35.1％改善,7.2％失败.治疗结果与患者性别、年龄、牙位无明显统计学关系.病损大小和组织病理类型与预后有明显的统计学关系,大的骨缺损和根尖周囊肿的预后较差(P＜0.05).结论:通过使用口腔显微镜、显微器械、超声工作尖、生物相容性好的倒充填材料、严格的显微根尖手术操作,持续性根尖周病的患牙可获得良好的预后.
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持续性根尖周炎根管内外生物膜特性的研究进展
持续性根尖周炎又称为难治性根尖周炎,其与细菌在根管内和根外形成的生物膜有关,是临床研究的热点.持续性根尖周炎根管内外生物膜虽相邻,但形态学及细菌构成等方面均有所区别,本文就近年来持续性根尖周炎根管内生物膜与根外生物膜的形态结构及细菌组成方面的异同,及其依存关系等方面的研究现状作一综述.
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持续性根尖周炎根外生物膜的研究进展
持续性根尖周炎是指通过反复根管治疗后仍迁延不愈的慢性根尖周炎，根外感染阻止了根尖周病变的愈合，根外生物膜是根外感染的主要形式之一。本文就近年来根外生物膜和持续性根尖周炎的关系，以及其形态结构、微生物组成和清除方法等方面的研究现状作一综述。
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54例持续性根尖周炎的显微根尖外科手术1年疗效观察
目的 评价显微根尖手术治疗54例持续性根尖周炎病例的短期临床疗效.方法 对54例持续性根尖周炎病例进行显微根尖手术,包括翻瓣、去骨、根尖周刮治、根尖切除,使用超声器械倒预备,三氧化矿物凝聚体(MTA)作为倒充填材料,术后定期复查,通过临床和X线片检查和测量,评价术后疗效.结果 54例持续性根尖周炎病例术后1年随访,治愈者31例(57.41％),改善者19例(35.19％),失败者4例(7.41％).根据患者性别、年龄、牙位分布、根尖周暗影的大直径和根尖周病变组织病理分类分别统计显微根尖手术的疗效,组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 显微根尖手术明显提高持续性根尖周病变的治疗成功率.
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营养缺乏和碱性环境对粪肠球菌侵入人工微管系统的影响
目的:研究不同环境因素对粪肠球菌侵入人工微管系统能力的影响和微流芯片的适用性.方法:采用软光刻技术制作微流芯片,观察细菌在牛脑心浸出液(BHI)、PBS和pH 10的情况下在微流芯片中的生长情况,测定和比较细菌在相应微管内的大侵入深度.结果:粪肠球菌在营养缺乏和碱性环境下生长速度明显下降,侵入小管径微管的深度显著下降(P＜0.01).结论:营养缺乏和碱性环境可显著降低粪肠球菌侵入微管系统的能力.微流芯片具有高通量、平行对比和可观察性好等特点,有望为今后相关研究提供标准化的实验平台.
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盐酸米诺环素联合vitapex糊剂治疗持续性根尖周炎疗效观察
目的 探讨盐酸米诺环素联合vitapex糊剂治疗持续性根尖周炎的效果.方法 选取2015年12月~2016年12月我院收治的持续性根尖周炎患者60例作为研究对象,随机分为两组,每组各30例.对照组患者进行碘仿氢氧化钙糊剂治疗,观察组采用盐酸米诺环素联合vitapex糊剂治疗.比较两组患者疼痛程度、炎症因子水平.结果 观察组患者疼痛程度评分和炎症因子水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 针对持续性根尖周炎患者采用盐酸米诺环素联合vitapex糊剂治疗利于缓解疼痛,降低炎症因子水平.
