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  • 人类疱疹病毒-2对HaCaT细胞表达GCSF和GMCSF的影响

    作者:邵勇;钟绮丽;万峻;张杰;张伟;于波

    目的 探讨HaCaT细胞在人类疱疹病毒-2(HSV-2)刺激前后粒细胞集落刺激因子(GCSF)和粒/巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)的表达变化及意义.方法 以VERO细胞进行HSV-2扩增,采用RT-PCR和荧光实时定量PCR检测HSV-2感染HaCaT细胞前及感染后24h、48h、72h时GCSF和GMCSF的表达量.结果 HaCaT细胞可自分泌GCSF和GMCSF;HSV-2感染后24h,HaCaT细胞表达GCSF及GMCSF的水平增高,72h时又明显上升,且实验组与对照组相比两种细胞因子的表达有显著性差异.结论 HacaT细胞可以自发表达GCSF和GMCSF;HSV-2刺激对HaCaT细胞表达GCSF和GMCSF有促进作用.

  • 多细胞因子及高敏C反应蛋白在手足口病患儿中的表达

    作者:任美欣;李侗曾;梁连春

    目的 探讨手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)患儿血清多细胞因子[白细胞介素-2 (IL-2)、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、干扰素(IFN)、肿瘤坏死因子(TNF)、粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)]以及高敏C反应蛋白(hs-CRP)的表达水平及其临床意义.方法 选择2011年10~12月60例HFMD患儿(病例组),分为轻症组(n=32)和重症组(n=28);选择同期28例健康体检儿童作为对照组.采集静脉血进行多细胞因子及hs-CRP的检测.结果 HFMD重症组血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN、TNF及GM-CSF的水平均显著高于对照组及轻症组(P<0.01),而轻症组多种细胞因子水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).重症组hs-CRP水平明显高于轻症组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 除IL-8外的其他多种细胞因子及hs-CRP可作为判断HFMD病情、监测疾病进展、指导早期治疗的重要指标.

  • 子宫颈癌患者树突状细胞体内外诱导抗肿瘤免疫

    作者:张莉;王雪峰

    目的 探讨子宫颈癌患者的树突状细胞(dendritic cells,DCs)在体内外能否诱导出高效而特异的抗肿瘤免疫应答.方法 应用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白介素-4(IL-4)从子宫颈癌患者外周血诱导DCs,Hela子宫颈癌抗原致敏,MTT法检测DCs激活的细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对肿瘤细胞的细胞毒作用.皮下接种Hela子宫颈癌建立荷瘤鼠,给予抗原致敏的DCs回输;或先给予DCs免疫,后用癌细胞攻击,观察其抑制肿瘤的效果.结果 从子宫颈癌患者外周血诱导的DCs高表达CD86、CD12、HLA-DR、CD54和CD83,激活的CTLs在体外特异性杀伤子宫颈癌细胞.DCs回输小鼠具有免疫保护作用,减低成瘤率;又能引起免疫治疗作用,有效抑制肿瘤的生长.结论 用GM-CSF 及IL-4从子宫颈癌患者诱导的DCs能有效提呈Hela子宫颈癌抗原给T淋巴细胞,并且在体内外诱导出高效而特异的抗肿瘤免疫,有望成为有效的肿瘤特异性免疫治疗新途径.

  • 喉癌患者外周血树突状细胞的体外培养

    作者:张莉;王雪峰

    目的 探讨从喉癌患者外周血大量诱导树突状细胞(Dendritic cells,DCs)的有效方法 .方法 直接从喉癌患者外周血分离DCs;用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)刺激喉癌患者外周血贴壁单核细胞(PBMCs);检测培养前后DCs表面HLA-DR、B7-2表达水平及DCs诱导T细胞增殖能力.结果 联合应用GM-CSF及IL-4可以从PBMCs中诱导大量高免疫活性的DCs,并通过增加其表面HLA-DR、B7-2表达而增强DCs免疫功能.结论 用GM-CSF及IL-4可以从喉癌患者外周血中诱导出大量高免疫活力DCs.

  • 人外周血树突状细胞的体外培养及其影响因素的研究

    作者:张莉;王雪峰

    目的 探讨人外周血树突状细胞(Dendritic cells,DCs)的体外培养方法及其影响因素.方法 取健康人外周血贴壁单核细胞,加入不同浓度的粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和不同种类的血清,培养7天后用CD83McAb标记DCs,SP法检测纯度,比较各组DCs的数量.此外,MTT法检测DCs激发T细胞增殖.结果 贴壁单核细胞在细胞因子诱导七天后,获得高纯度的能强烈激发T细胞的DCs,而且其培养受细胞因子浓度及血清种类的影响.结论 用GM-CSF及IL-4可诱导人外周血贴壁单核细胞生成DCs,其培养受细胞因子浓度及血清种类的影响.

  • 粒/巨噬细胞集落刺激因子对培养人牙周膜成纤维细胞生物学特性的影响

    作者:冯雪;林珠;段银钟

    目的:了解粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对体外培养的人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)生物学活性的影响.方法:利用体外培养人PDLFs的方法,观察不同浓度的GM-GSF对PDLFs的增殖、碱性磷酸酶活性、蛋白质合成量的影响.结果:GM-CSF在较低浓度时即对PDLFs的增殖、碱性磷酸酶活性、蛋白质合成量有促进作用,它们的变化与浓度变化呈一定的相关性.结论:提示GM-CSF可能通过PDLFs在牙周膜细胞参与牙槽骨改建的过程中起一定的作用.

  • 大鼠骨髓造血干细胞体外定向诱导、扩增树突状细胞及其功能鉴定

    作者:于哲;范清宇;张婷;刘云燕

    目的:以大鼠骨髓造血干细胞为来源,建立体外诱导、扩增树突状细胞(dendritic cells,DC)的方法,并进行表型鉴定及功能检测.方法:从大鼠骨髓细胞中分离出造血干细胞,加入rGM-CSF、RIL-4和nrhTNF-α培养12天获得大量DC,经标抗大鼠OX62单抗免疫磁珠分离纯化后的DC,进行形态学观察、表型检测及刺激T细胞增殖能力分析.结果:大鼠骨髓造血干细胞经诱导培养12天后,倒置显微镜和电镜下显示典型的DC形态和超微结构;流式细胞术分析显示细胞表面抗原高表达,其中OX62为62.19%;MHC I70.40%;MHCⅡ为78.28%;CD80为55.58%;CD86为68.38%,是典型的大鼠DC表型特征,同种混合淋巴细胞反应结果显示,DC具有高效的刺激T淋巴细胞活化增殖的能力.结论:大鼠骨髓造血干细胞可成功诱导为具有典型形态特征及功能的DC,为进一步研究其在肿瘤免疫治疗中的应用打下基础.

  • 胰腺癌患者外周血中树突状细胞的分离、纯化与扩增

    作者:唐朝晖;邹声泉;邱文洪;杨想平;裘法祖

    目的 探讨从胰腺癌患者外周血中分离、纯化与扩增树突状细胞(DC)的有效方法.方法 分别从健康人(10例,对照组)和胰腺癌患者(12例,实验组)外周血中分离出单核细胞,而后将实验组的单核细胞与GM-CSF及IL-4共同培养,用免疫荧光法和流式细胞仪检测培养前、后的DC数量及DC表面HLA-DR及B7-2的表达水平,并与对照组比较.结果 与对照组相比,实验组 DC表面HLA-DR及 B7-2表达水平较低(P<0.01);经GM-CSF及IL-4联合培养7天后,其单核细胞中的DC数较培养前明显增多(P<0.01),且DC表面HLA-DR及 B7-2表达水平较培养前明显增高(P< 0.01),与对照组相比则无明显差异(P>0.05).结论 GM-CSF与IL-4的联合应用能有效地从胰腺癌患者外周血中制备出大量具有功能活性的DC.

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