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  • siRNA干扰Id-1表达对人结肠癌SW480细胞株生长与侵袭能力影响研究

    作者:武雪亮;王立坤;杨东东;薛军;屈明;郭飞;刘博

    目的 DNA结合分化抑制因子-1(inhibitor-1 0f DNA binding/differentiation-1,Id-1)对结肠肿瘤细胞侵袭行为影响的研究较少,本研究探讨siRNA转染下调Id-1表达对人结肠癌SW480细胞侵袭和转移行为的影响.方法 将合成Id-1干扰序列(siRNA)转染至SW480细胞作为实验组(抑制组),并以Id 1表达干扰空白组、空载体组作为对照,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测各组细胞中Id-1和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein,MMP-9)的表达情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖能力;划痕损伤实验、Transwell小室和Matrigel侵袭模型评价Id-1对细胞侵袭和转移能力的影响.结果 抑制组Id-1 mRNA表达水平为(0.14±0.02),与空白组(1.27±0.03)和空载体组(1.25±0.06)比较明显降低,差异有统计学意义,P<0.001;抑制组Id-1蛋白表达水平为0.25±0.02,与空白组(1.18±0.03)和空载体组(1.16±0.04)比较明显降低,差异有统计学意义,P<0.001;抑制组MMP-9 mRNA表达水平为0.19±0.02,与空白组(1.33±0.04)和空载体组(1.38±0.03)比较明显降低,差异有统计学意义,P<0.001;抑制组MMP-9蛋白表达水平为0.12±0.02,与空白组(0.89±0.04)和空载体组(0.91±0.02)比较明显降低,差异有统计学意义,P<0.001;生长曲线表明,从第3天起抑制组细胞增殖明显减弱,与空白组和空载体组差异明显;划痕损伤实验结果显示,空白组和空载体组向划痕处的迁移速度明显快于抑制组;迁移试验显示,抑制组迁移细胞数为75±12,明显少于空白组(201±12)和空载体组(206±15);抑制组侵袭细胞数为51±10,明显少于空白组(121±17)和空载体组(126±14),差异均有统计学意义,P<0.001.结论 Id-1促进SW480细胞的侵袭和转移,其机制可能与诱导MMP-9的表达有关.

  • DNA结合分化抑制蛋白1在结直肠癌中的特异性表达

    作者:武雪亮;王立坤;薛军;杨东东;屈明;郭飞;杨瑞敏;张凡

    目的:研究DNA结合分化抑制蛋白1( Id-1)在结直肠腺癌组织中的表达并探讨其与致癌的相关性。方法选取我院结直肠癌和正常黏膜组织各50例,用逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法检测2组中Id-1 mRNA和蛋白质的表达情况,并用免疫组化法检测Id-1在2组中的表达。结果结直肠癌组织中,Id-1mRNA的表达水平(0.96±0.03)较正常组织(0.20±0.04)明显增高(P<0.01);Id-1蛋白在结直肠癌组织中的表达水平(0.82±0.04)亦较正常组织(0.31±0.02)明显增高( P<0.01);Pearson相关分析显示,Id-1mRNA和蛋白水平呈明显正相关( P <0.01)。 Id -1在结直肠癌组织组阳性表达率是72.00%明显高于正常黏膜的24.00%( P<0.01)。结论 Id-1的特异性高表达与结直肠腺癌的发生与发展具有较高的相关性。

  • DNA结合分化抑制蛋白1和血管内皮生长因子的表达及其与肿瘤微血管生成的相关性研究

    作者:武雪亮;王立坤;薛军;杨东东;屈明;郭飞;杨瑞敏;刘博

    目的:研究结直肠癌组织中DNA结合分化抑制蛋白1( Id-1)和血管内皮生长因子( VEGF )的表达及其与肿瘤微血管生成、临床病理指标的相关性。方法收集我院50例结直肠癌组织和30例正常结直肠组织,用免疫组化法检测Id-1和VEGF的表达及CD34标记的微血管密度( MVD)。结果 Id-1和VEGF在结直肠癌组织中阳性表达为72%,76%,显著高于癌旁正常组织的24.00%,22.00%。结直肠癌组织中MVD为16.15±2.19,明显高于正常组织4.37±2.21( P<0.01);Id-1、VEGF和MVD三者均与肿瘤浆膜浸润、TNM分期、CEA(+)、脉管浸润、淋巴结转移及肝转移相关(均P <0.01)。癌组织中, Id-1和VEGF阳性组表达MVD值显著高于阴性组( P<0.01);结直肠癌组织中,Id-1与VEGF表达呈明显正相关性。结论 Id-1、VEGF高表达能诱导肿瘤微血管的生成,与结直肠癌的浸润及血行转移有关。

  • DNA结合分化抑制蛋白1和基质金属蛋白酶9在结直肠癌中的表达及与微血管密度的相关性

    作者:武雪亮;薛军;王立坤;杨东东;屈明;郭飞;孙光源;韩磊;杨瑞敏

    目的:探讨结直肠癌组织中DNA结合分化抑制蛋白1( Id-1)和基质金属蛋白酶9( MMP-9)的表达及其与肿瘤微血管生成、临床病理指标的相关性。方法应用免疫组织化学染色法检测50例结直肠癌组织和50例癌旁正常组织中Id-1和MMP-9的表达,以及CD34标记的微血管密度( MVD)情况。结果 Id-1和MMP-9在结直肠癌组织中阳性表达为72.00%(36/50)、78.00%(39/50),显著高于癌旁正常组织的24.00%(12/50)、28.00%(14/50)(P=0.000);结直肠癌组织中MVD值为17.22±2.08,明显高于癌旁正常组织5.36±2.17(P=0.000); Id-1、 MMP-9和MVD均与肿瘤浆膜浸润、 TNM分期、癌胚抗原(+)、脉管浸润、淋巴结转移及肝转移相关( P均<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度无关(P均>0.05);癌组织中Id-1和MMP-9阳性表达组MVD值显著高于阴性组(P均=0.000);结直肠癌组织中Id-1与MMP-9呈明显正相关性(r=0.429, P=0.000);生存分析显示: Id-1与MMP-9表达与结直肠癌患者预后关系密切,二者高表达提示预后不良。结论 Id-1、 MMP-9高表达与结直肠癌的发生演进高度相关,并与MVD呈正相关,二者可能共同参与了肿瘤微血管的生成、肿瘤的浸润及血行转移。

  • Id-1和MMP-9在结直肠癌中的表达及与临床病理因素的关系

    作者:武雪亮;王立坤;薛军;杨东东;屈明;郭飞;杨瑞敏;马鹏程;刘博

    目的:通过研究DNA结合分化抑制蛋白1(inhibitors of DNA binding-1,Id-1)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9,MMP-9)在结直肠腺癌中,分析Id-1和MMP-9与结直肠腺癌进展的关系.方法:采用免疫组织化学法、RT-PCR和Western blot检测Id-1和MMP-9在50例结直肠癌患者癌组织及50例正常组织中的表达情况,分析二者与各临床病理因素的相关性.结果:Id-1和MMP-9在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为72.00%(36/50)和78.00%(39/50),而在正常结直肠组织中的阻性率为24.00%(12/50)和22.00%(11/50),差异均有统计学意义(P< 0.01).Id-1和MMP-9在癌组织中的表达呈正相关(r=0.422,P=0.002).Id-1和MMP-9的表达与结直肠腺癌的浸润深度、TNM分期、肝转移、淋巴结转移和脉管浸润具有相关性(P均<0.05),而与患者的性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(P均> 0.05).RT-PCR和Westem blot检测结果与免疫组织化学检测结果基本一致.生存分析显示Id-1和MMP-9表达与结直肠癌患者预后关系密切,Id-1和MMP-9高表达提示预后不良.结论:Id-1和MMP-9在结直肠癌中高表达,其表达水平与结直肠腺癌的浸润、转移具有高度相关性,二者联合检测对判断结直肠癌的侵袭、转移及预后具有重要指导意义.

  • Id-1和 MMP-2表达与结直肠癌临床病理特征及预后的关系

    作者:武雪亮;王立坤;薛军;杨东东;屈明;郭飞;杨瑞敏;马鹏程;刘博

    目的:检测 DNA 结合分化抑制蛋白1(Id-1)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)在结直肠癌组织中的表达,评价其与结直肠癌临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组化法检测50例结直肠癌、30例腺瘤组织、50例癌旁正常组织中的 Id-1和 MMP-2,分析二者表达与临床病理特征和预后的关系。结果在癌旁正常组织、腺瘤和癌组织中,Id-1阳性表达率分别为24.00%、43.33%、72.00%,MMP-2阳性表达率分别为22.00%、46.67%、78.00%,P 均<0.01;Id-1和 MMP-2表达与结直肠癌的浆膜浸润、TNM分期、肝转移、淋巴结转移和脉管转移有关, P 均<0.05;在结直肠癌组织中,Id-1表达与 MMP-2表达呈正相关(r =0.429,P =0.000)。Id-1阳性者中位生存时间为32个月、阴性者为43个月,MMP-2阳性者中位生存时间为28个月、阴性者为45个月,P 均<0.05。Cox 回归模型分析显示,Id-1和 MMP-2表达为影响预后的相关因素(P 均<0.05)。结论结直肠癌组织中 Id-1和 MMP-2高表达,二者与结直肠癌的发生、转移和预后密切相关。

  • 结直肠癌组织中Id-1、MMP-9的表达变化及其意义

    作者:武雪亮;王立坤;薛军;杨东东;屈明;郭飞;杨瑞敏;马鹏程;刘博

    目的:观察结直肠癌组织中癌基因DNA结合分化抑制蛋白1(Id-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达变化,并探讨其意义。方法结直肠癌组织50例份(观察组),正常结直肠组织50例份(对照组),分别采用免疫组化法、RT-PCR法、Western blotting法检测两组Id-1、MMP-9,分析Id-1、MMP-9阳性表达与结直肠癌临床病理参数的关系。结果观察组及对照组Id-1阳性表达率分别为72%、24%, MMP-9阳性表达率分别为78%、22%,两组比较,P均<0.05。 Id-1、MMP-9阳性表达均与结直肠癌浆膜浸润、TNM分期、淋巴结转移、肝转移及脉管浸润相关( P均<0.05)。观察组及对照组Id-1 mRNA的相对表达量分别为0.96±0.03、0.20±0.04,MMP-9 mRNA的相对表达量分别为0.88±0.04、0.21±0.03,两组比较,P均<0.05。观察组及对照组Id-1蛋白的相对表达量分别为0.82±0.04、0.31±0.02,MMP-9蛋白的相对表达量分别为0.86±0.05、0.29±0.03,两组比较,P均<0.05。结论结直肠癌组织中Id-1、MMP-9表达升高,二者表达与结直肠癌浆膜浸润、TNM分期、淋巴结转移、肝转移及脉管浸润相关。

  • DNA结合分化抑制蛋白1与KI-67和血管内皮生长因子在直肠癌组织中的表达

    作者:叶英海;张晓勇;周晓聪;刘学文

    目的 探讨DNA结合分化抑制蛋白1(ID-1)在直肠癌中的表达及与KI-67、血管内皮生长因子(VEGF)的关系及其临床意义.方法 采用免疫组织化学法检测62例(男38例,女24例)直肠癌组织中ID-1、KI-67、VEGF的表达情况.结果 在直肠癌组织中ID-1高表达,K1-67和VEGF表达率也增高(均P<0.05).三者表达水平均与肿瘤细胞的浸润程度有关.结论 ID-1、KI-67和VEGF三者的表达强度均与直肠癌T分期有关,三者的联合检测有助于直肠癌临床分期的判断.

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