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恶性肿瘤细胞诱导分化
细胞癌变是分化领域中一个特殊问题,肿瘤细胞可看作是正常细胞分化机制失控,成为不衰老的永生细胞,丧失分化细胞正常生理功能,形态趋于一致,表现出某些未分化细胞的特征(有人称之为"去分化").国内外文献中常有"肿瘤逆转"、"逆向转化"(reversion transformation)、"脱癌"(decarcinogenesis)、"去恶化"(de-malignancy)、"正常化"(normalization)、"表型逆转"(phenotypic reversion)等称谓,其含义与诱导分化基本一致.
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DDPH逆转增生后PASMC的时间相关性研究
目的 研究DDPH对低氧内皮细胞条件培养液(HECCM)促肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增生后的逆转效应及时问相关性,探讨DDPH使增生后PASMC恢复为正常收缩表型的时间.方法 利用HECCM建立猪PASMC增生模型;采用细胞培养、改良的四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、免疫细胞化学染色测定α平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)等方法观察HECCM的促PASMC增生作用,及DDPH对PASMC增生后的逆转效应,并观察逆转效应与DDPH作用的时间相关性.结果 (1)HECCM促PASMC增生后,PASMC由收缩表型转化为合成表型,胞质内的α-SM-actin含量下降,具有一定时间相关性.(2)在HECCM促PASMC增生后,加入DDPH可使PASMC由合成表型逆转为收缩表型,α-SM-actin含量回升,具有一定时间相关性.结论 DDPH对HECCM促PASMC增生有逆转效应并呈一定时间相关性,DDPH作用一定时间后PASMC表型可基本逆转恢复至正常.
关键词： DDPH α-SM-actin 肺动脉平滑肌细胞 表型逆转 低氧 -
SRF在VSMC再分化过程中的表达及其DNA结合活性变化
目的 探讨SRF在血管平滑肌细胞(VSMC)再分化过程中的表达及其与DNA结合活性的变化规律.方法 采用血清刺激与饥饿的方法诱导培养的VSMC发生表型逆转,应用Northern、Western印迹及电泳迁移率变动分析(EMSA)等方法检测VSMC再分化过程中SRF表达及其与DNA结合活性的动态变化.结果 在体外培养的VSMC发生表型逆转时,SRF的mRNA和蛋白表达的水平均无明显变化;与去分化型VSMC相比,分化型VSMC中SRF的DNA结合活性明显增强,后者与VSMC分化型标志基因SM22α的转录活性具有平行关系.结论 SRF启动VSMC特异性基因表达的活性与其蛋白水平无关,血清饥饿诱导的SRF结合CArG-box的能力明显增强,有利于激活分化型标志基因的表达.
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肿瘤相关巨噬细胞表型逆转的研究进展
巨噬细胞是机体固有免疫反应的重要组成成份,在不同趋化因子的作用下极化为具有不同表面标志及功能的巨噬细胞.大量研究表明,肿瘤组织中的巨噬细胞为M2型,其能够促进肿瘤生长、侵袭和转移.M2型巨噬细胞在适当的诱导下可以转换为M1型.本文将近年来从HIV-1 Nef蛋白、CD40L、双磷酸盐及CpG-DNA联合IL-10R抗体等方面对巨噬细胞表型逆转的研究做一综述.巨噬细胞的表型逆转将可能为未来肿瘤治疗提供新的策略.
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DDPH对HECCM促PASMC增殖后的逆转效应研究
利用低氧内皮细胞条件培养基(HECCM)建立猪肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的增殖模型;以四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、α平滑肌肌动蛋白(α-SM-actin)为指标,用免疫细胞化学染色及透射电镜等方法观察不同浓度DDPH[1-(2,6-dimethylphenoxy)-2-(3,4-dimethoxy phenylethylamino)propane hydrochloride]对HECCM促PASMC增殖后的逆转效应.结果表明:HECCM促PASMC增殖后,PASMC的表型发生转化,由收缩表型转化为合成表型,PASMC胞质内的α-SM-actin含量下降;而DDPH能使HECCM促PASMC增殖后的表型逆转,即由合成表型逆转为具有执行正常收缩功能的收缩表型,PASMC胞质内的α-SM-actin含量回升;且DDPH的这种作用具有浓度相关性.透射电镜结果从形态学上也证明PASMC由合成表型逆转为收缩表型,由此推测,DDPH对HECCM促PASMC增殖具有逆转效应.
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淫羊藿甙抗癌作用机制的实验研究
中药单体淫羊藿甙是一种新型的生物反应调节剂和诱导分化剂.为进一步探讨淫羊藿甙抗癌作用机制,我们将淫羊藿甙作用于人高转移肺癌细胞PG,采用MTT、放免、流式细胞术、粘附实验、运动侵袭实验等多种手段进行了检测.结果表明,淫羊藿甙虽直接抑癌作用较弱,但却能影响PG细胞周期的时相分布,使S期减小,并能升高细胞内cAMP水平,降低cGMP水平,提高cAMP/cGMP比值,同时降低PG细胞对胞外基质的粘附性及侵袭、运动能力,从而逆转肿瘤细胞的恶性表型.提示,淫羊藿甙作为一种有开发前景的抗肿瘤药物值得进一步深入研究.
