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新变异型耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶研究
目的 调查耐药鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因的存在和变异情况,为临床资料提供参考依据.方法 收集2011年1月-2011年12月ICU患者痰液标本中分离的耐药鲍氏不动杆菌共25株,用聚合酶链反应(PCR)的方法分析34种β-内酰胺酶基因和ISaba1-OXA-23、ISaba1-OXA-66连锁检测.结果 25株耐药鲍氏不动杆菌共检出4种β-内酰胺酶基因:TEM、ADC、OXA-23群、OXA-51群,经进一步测序和比对,21株TEM基因阳性均为TEM-1型84.0%,23株OXA-23群阳性均为OXA-23型92.0%;25株OXA-51群阳性均为OXA-66型100.0%,24株ADC基因阳性中20株为ADC-30型80.0%,1株为新变异型ADC-6 34.0%,3株序列相同的为新变异型ADC-6412.0%,ISaba 1-OXA-23连锁检测结果与OXA-23检测结果相同,即OXA-23阳性菌株均由ISaba1介导;而ISaba1-OXA-66连锁检测均为阴性,提示OXA-66阳性菌株均非ISaba1介导.结论 鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类药物耐药主要与产TEM-1、OXA-23型、OXA-66型、ADC-30型基因相关;ADC基因存在新变异型ADC-63和ADC-64是国内外首次报道.
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多药耐药鲍曼不动杆菌ADC型AmpC酶基因的检测研究
目的:了解多药耐药鲍曼不动杆菌中ADC型AmpC酶基因及其上游插入序列ISaba1的存在情况。方法收集2011年10月至2012年6月在哈尔滨医科大学附属第二医院住院患者送检标本中分离到的鲍曼不动杆菌共146株。应用K-B纸片扩散法检测细菌对11种抗生素的敏感性。应用PCR及DNA测序分析ADC型AmpC酶基因短片段、ISaba1-AmpC及ADC型AmpC酶全基因。应用荧光定量PCR方法检测bla ampC基因相对表达量。结果146株鲍曼不动杆菌中,头孢哌酮/舒巴坦的敏感性较高(52﹒7%),其他抗生素的敏感性较低(<10﹒0%)。ADC型基因的阳性率为91﹒7%(134/146)。AmpC酶上游插入序列ISaba1的阳性率为73﹒2%(107/146)。本院ADC型基因亚型为ADC-30(Genbank号为GU591985)。结论本组多药耐药情况十分严重,鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药与其产生ADC型AmpC酶关系密切,其上游插入序列ISaba1自带启动子可导致AmpC酶基因mRNA的表达量增高。
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IntⅠ1基因突变致鲍曼不动杆菌耐药性丢失
目的 探究鲍曼不动杆菌耐药性丢失与基因组序列的相关性.方法 临床分离78株鲍曼不动杆菌,按CLSI进行药敏性实验,以PCR方法对IntⅠ 1、ADC基因进行检测,并选择部分菌株进行测序分析.结果 78株鲍曼不动杆菌中,有1株完全不耐药,而相关基因PCR检测的阳性率均为100%.基因测序分析表明,在这株耐药性丢失的鲍曼不动杆菌中,IntⅠ 1基因均发生3处DNA突变.结论 IntⅠ 1基因对于鲍曼不动杆菌耐药性起着重要作用,相关位点突变将导致耐药性丢失.