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Caveolin-1对乳腺癌细胞Hs578T耐药株周期和凋亡影响
目的 探讨Caveolin-1基因对乳腺癌细胞系Hs578T耐药株(Hs578T/Dox)生长和凋亡的影响. 方法在乳腺癌细胞系Hs578T耐药株中转染Caveolin-1基因,构建高表达Caveolin-1蛋白的细胞系(Hs578T/Dox-cav),通过Western Blot方法证实转染成功.将这2种细胞以同样的条件培养96h,应用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的分布.比较转染前后细胞的细胞周期分布的不同.应用软琼脂培养法比较转染前后细胞抛锚生长能力的变化以及对促凋亡剂(staurosporine)的不同反应.结果 转染Caveolin-1后明显促进了所用细胞株由G1期向G2期的转变(P<0.01).自然凋亡率显著下降.抛锚生长能力增加,缓解了对staurosporine的反应.结论 Caveolin-1促进乳腺癌细胞系Hs578T耐药株生长和增殖,抑制凋亡.
关键词: 乳腺癌 Caveolin-1蛋白 细胞周期 凋亡 -
层流剪切力作用下miR-21对内皮细胞Caveolin-1基因表达的影响
目的 探讨层流剪切力(SS)作用下miR-21对内皮细胞Caveolin-1基因表达的影响.方法 采用Lipofectamine 2000将miR-21 mimics和miR-21 inhibitor分别转染到人主动脉内皮细胞,将转染后的内皮细胞分别加载低[0.4 Pa(4 dyn/cm2)]和高[1.5 Pa(15 dyn/cm2)]SS,并作用24 h.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot技术检测Caveolin-1 mRNA和Caveolin-1蛋白的表达.结果 对照组、低SS+miR-21 mimics组、低SS+miR-21 inhibitor组、高SS+miR-21 mimics组及高SS+miR-21 inhibitor组Caveolin-1 mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)表达分别为1.08±0.17、0.44±0.16、1.19±0.34、0.93±0.27及1.70±0.39,Caveolin-1/β-actin蛋白分别为1.02±0.24、0.44±0.24、0.98±0.34、1.01±0.35及1.51±0.48.低SS+miR-21 mimics组Caveolin-1蛋白表达显著低于对照组(P<0.05),高SS+miR-21 inhibitor组Caveolin-1蛋白表达显著高于其他4组(P<0.05),低SS+miR-21 inhibitor组及高SS+miR-21 mimics组Caveolin-1蛋白表达显著高于低SS+miR-21 mimics组(P>0.05).结论 miR-21对层流SS作用下内皮细胞的Caveolin-1基因的表达可能具有重要的调控作用.
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胃癌细胞中Caveolin-1对表皮生长因子受体2活化的影响
目的:检测Caveolin-1蛋白(Cav-1)对胃癌(gastric cancer,GC)细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响及其可能的作用机制.方法:构建Cav-1过表达稳转染细胞系N87/Cav-1,应用MTT、克隆形成、划痕修复实验检测Cav-1对胃癌细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响,应用Western blotting检测在EGF配体诱导下Cav-1蛋白对Her-2活化及ERK、Akt信号通路的影响.结果:Cav-1过表达可明显抑制胃癌细胞NCI-N87的增殖及迁移能力;在配体EGF刺激下,Cav-1过表达明显抑制了Her-2酪氨酸磷酸化水平以及P-ERK/ERK、P-AKT/AKT的比率(P<0.01).结论:Cav-1过表达可明显抑制EGF诱导的Her-2酪氨酸磷酸化水平,并可能通过下游MAPK及PI3K/Akt信号通路的作用抑制了胃癌细胞株NCI-N87的增殖及迁移能力.
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Caveolin-1蛋白在17β-雌二醇抑制内皮素-1诱导血管平滑肌细胞增殖中的作用
本工作旨在研究Caveolin-1在17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)抑制内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱导血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖中的作用.在培养的VSMCs上,使用[3H]Thymidine([3H]TdR)掺入法、荧光免疫组化方法和Western blot观察E2处理VSMCs前后ET-1对DNA合成和caveolin-1蛋白表达的影响.结果显示,ET-1可以刺激VSMCs增殖.E2作用24 h后,可明显抑制ET-1的上述作用.免疫荧光证实,在VSMCs上有caveolin-1分布,ET-1刺激VSMCs增殖的过程中,VSMCs上caveolin-1蛋白荧光强度下降,而事先给予E2可逆转这种下降.Western blot证实,ET-1可抑制caveolin-1蛋白的表达而E2则可增加caveolin-1蛋白的表达.以上结果表明E2抑制ET-l诱导的VSMCs增殖可能与其增加caveolin-1蛋白表达有关.
关键词: Caveolin-1蛋白 细胞质膜微囊 内皮素 血管平滑肌细胞 17β-雌二醇 -
Caveolin-1蛋白在急性白血病中表达的研究
目的 探讨急性白血病(AL)初次诱导化疗缓解前后caveolin-1蛋白表达的变化及Caveolin-1蛋白的表达与AL分型的关系.方法 采用流式细胞术检测65例AL患者及10例正常对照组Caveolin-1蛋白的表达.结果 65例初治组AL患者表达Caveolin-1蛋白的阳性细胞率(2.31±3.62)%、平均荧光强度(69.88±21.17),分别较10例正常对照组的阳性细胞率(77.50±1.76)%、平均荧光强度(289.87±7.92)明显下降(P<0.01):38例AL患者诱导化疗缓解后表达Caveolin-1蛋白的阳性细胞率(3.03±3.87)%与初治组比较无明显差异(P>0.05),但平均荧光强度(152.74±25.81)较初治组明显升高(P<0.01).各种类型的急性白血病表达Caveolin-1蛋白的阳性细胞率、平均荧光强度无明显差异(P>0.05).结论 急性白血病的Caveolin-1蛋白表达水平较正常人明显下降.且AL初次诱导化疗缓解后Caveolin-1蛋白的表达较初治时有所恢复,提示Caveolin-1蛋白的高表达可能与AL患者预后有关.
关键词: 急性白血病 Caveolin-1蛋白 流式细胞术 -
Caveolin-1蛋白与恶性肿瘤生长凋亡的研究进展
Caveolae结构是细胞膜向内凹陷形成的囊状结构脂筏,caveolin蛋白是其标志蛋白.它们与囊泡转运、胆固醇稳态平衡、信号传导、肿瘤耐药、钙通道调控、细胞生长和凋亡等密切相关.Caveolin-1蛋白在不同肿瘤组织中表达变化具有两面性.本文介绍了Caveolae结构和Caveolin-1蛋白的特性和功能.重点综述了Caveolin-1蛋白对恶性肿瘤发生、生长和凋亡的作用.同时分析了一些当前新的认识和假说,并展望了caveolin-1在肿瘤治疗中的应用.
关键词: caveolae结构 Caveolin-1蛋白 恶性肿瘤 生长 凋亡