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  • 食管癌p53和PCNA的表达与局部体液免疫

    作者:赵光明;赵卫星;和瑞芝;苏蔚;张丽娟

    食管癌是我国常见的恶性肿瘤之一[1],尤其以我国豫北太行山一带为高发病区[2-8].食管癌的临床治疗虽有进步,但效果仍然令人沮丧,5年生存率不到10%,严重威协着人民的生命与健康[9-15].因此,预防发病、发病后及早治疗、检测局部免疫及基因表达水平、控制癌肿的发展、延长患者的生存期将是21世纪食管癌研究的重点[16-20].

  • 热休克凋亡食管癌细胞负载自体树突状细胞制备及其表型特征的分析

    作者:孙振宇;李成万;顾敏威;孙琦;赵永;陆晓

    目的:建立自体热休克凋亡食管癌细胞抗原制备、树突状细胞(DC)体外诱导以及抗原负载方法,为DC肿瘤疫苗的临床应用提供技术基础.方法:采用酶消化法从手术切除的食管癌新鲜组织获得单细胞悬液,热休克后用桦脂酸诱导其凋亡制备成细胞抗原;采用人工肝素抗凝采集外周静脉血,分离单个核细胞(PBMC),贴壁法获得单核细胞,经GM-CSF与IL-4体外诱导成未成熟树突状细胞(imDC);负载细胞抗原后制备成DC肿瘤疫苗,并对DC疫苗的形态、数量及表型特征进行分析.结果:肿瘤细胞抗原每克组织得率(9.89±2.46)×106,平均凋亡率(67.60±3.23)%.imDC活率>95%,imDC表型分析为CD11c+HLA-DR+、CD11c+CD80+、CD11c+CD83+和CD11c+CD86+,表达率分别为(88.30±3.59)%、(1.25±0.55)%、(6.13±1.79)%和(72.90±5.01)%.DC疫苗活率>95%,DC疫苗表型为CD11c+HLA-DR+CD11c+CD80+、CD11c+CD83+和CD11c+CD86+,表达率分别为(89.60±3.91)%、(34.20±3.85)%、(64.90±8.05)%和(86.10±6.22)%.负载自体抗原DC诱导CTL杀伤自体肿瘤细胞的杀伤率为(65.90±6.25)%,明显高于杀伤食管癌肿瘤细胞株的杀伤率[(32.56±2.68)%],P<0.01.结论:本方法稳定、安全及可靠,可制备出在体外诱导特异性CTL的DC肿瘤疫苗.

  • 乙酰肝素酶、碱性成纤维细胞生长因子与食管癌血管生成及转移的关系

    作者:马敏杰;韩彪;刘健;赵林

    目的:探讨乙酰肝素酶(Heparanase,Hps)、碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)在食管癌中的表达及其意义.方法:应用免疫组化S-P法检测51例食管癌组织及12例癌旁组织中Hps及bFGF的表达及间质微血管密度(micro vessel density,MVD).结果:Hps,bFGF食管癌中的表达高于正常食管组织(P<0.05),且Hps,bFGF的表达与食管癌的浸润深度、淋巴结转移情况及临床分期显著相关(P<0.05).结论:本研究结果表明Hps,bFGF协同表达对血管生成、食管癌的侵入转移起到关键性的作用、其作为食管癌治疗中的一个新靶点对治疗及预后有相当好的理论价值.

  • Cathepsin B反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞中CB mRNA表达的影响

    作者:楚广民;杨红梅;孙海斌;陈奎生

    目的:探讨组织蛋白酶B(CB)反义寡核苷酸(ASODN)对CB mRNA表达的影响.方法:将食管癌EC9706细胞分5组培养,5组分别用设计合成的3条封闭CB不同基因位点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2、ASODN3)及1条无关寡核苷酸(N-ODN)转染,另1组不转染(空白对照组).采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中CB mRNA表达情况.结果:3条CB ASODNs转染的EC9706细胞中CB mRNA表达均下调,差异无统计学意义,但均明显低于N-ODN组及空白对照组.结论:CB ASODN可抑制食管癌EC9706细胞中CB mRNA表达,为临床预防食管癌等恶性肿瘤浸润转移奠定理论了基础.

  • KAI1基因在食管癌组织中的表达及其意义

    作者:郝宝岚;李珊珊;任秀花;闫爱华

    目的:探讨KAI l基因的表达与食管癌发生及浸润转移的关系.方法:采用RT-PCR及免疫组化方法,检测食管癌组织及其正常粘膜中KAI lmRNA及蛋白的表达.结果:KAI lmRNA的表达在食管癌组织和其正常粘膜中未见显著性差异,且与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移无关;KAI l蛋白在癌组织中的表达明显低于其正常粘膜,在有淋巴结转移病例中的表达明显低于无淋巴结转移病例,但与肿瘤的分化程度、浸润深度无关.结论:食管癌癌变和转移可能与KMI1蛋白的低表达有关,但与KAI lmRNA的表达无关,推测这可能是由于翻译后修饰所致.

  • 食管鳞癌中ABCG2和V-ATPase的表达及其临床意义

    作者:黄立军;杨三虎;王伟峰;卢强;李小飞;张志培

    目的:探讨APT结合转运蛋白G家族2(ABCG2)、囊泡型H+-ATPase(V-ATPase)蛋白在食管鳞癌及其病理分级、TNM分期中表达的差异性和两蛋白表达相关性临床意义.方法:采用免疫组化免疫法检测ABCG2和V-ATPase在66例食管鳞癌中的表达,统计学分析表达的差异性及2蛋白表达相关性.结果:CG2和V-ATPase表达主要定位于胞膜和胞质中.ABCG2、V-ATPase总阳性率分别为66.67%、68.18%,在分级、TNM分期各三组间差异性均非常显著(P<0.01);ABCG2在分级、TNM分期各两组间比较除Ⅱb与Ⅲ分期组间外(P=0.341)差异性均显著(P均<0.01);V-ATPase在分级、TNM分期各两组间比较除Ⅱ与Ⅲ、Ⅱb与Ⅲ组间外(P>0.05)差异性均显著(P均<0.05).ABCG2、V-ATPase在转移组与非转移组间表达的差异性均很显著(P=0.000).在总的食管癌及其分级、TNM分期中ABCG2和V-ATPase的表达均有很好的相关性(P均≤0.001),相关系数rs均高于0.7.结论:ABCG2、V-ATPase在食管鳞癌中高表达,表达的高低与病理分级、TNM分期高低及转移与否有关联性,可能与耐药、转移有关;两种蛋白表达存在相关性,可能有相互作用的现象.

  • 食管癌组织STRBP8基因克隆及其生物信息学分析

    作者:徐建华;黄宪章;庄俊华;徐宁;陈曲波

    目的:克隆食管癌组织核基质蛋白类视网膜母细胞瘤结合蛋白8(STRBP8)CDS编码序列,为建立其免疫学检测技术奠定基础.方法:从Gen Bank中获取STRBP8的基因序列,并根据其CDS区序列设计全长引物.利用Trizol法从食管癌组织中提取总RNA,通过逆转录获取STRBP8的cDNA,再利用梯度升温PCR方法对目标基因进行扩增.结果:本实验成功从食管癌组织中克隆出STRBP8的CDS序列.结论:STRBP8在食管癌组织均存在表达,为下一步建立其免疫学检测技术打下基础.

  • 佛波酯对食管癌EC9706细胞NDRG1表达及细胞增殖影响的研究

    作者:尹惠卿;贺付成;张岚;张云汉

    目的:探讨12-氧-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)作用于食管癌细胞EC9706后,对NDRG1mRNA表达、细胞增殖、细胞周期的影响.方法:采用50nmol/L的TPA作用于EC9706 细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期的变化,原位杂交法检测NDRG1 mRNA水平.结果:TPA能上调NDRG1mRNA水平,抑制EC9706细胞增殖,细胞周期发生G1→S期阻滞.结论:TPA可能通过上调NDRG1 mRNA的表达而抑制EC9706增殖,促进其分化.

  • 含不同脂肪乳剂全肠外营养对食管癌患者术后免疫功能的影响

    作者:崔凯;柯昌康;康树宏;赵芳;倪云峰;王武平;程庆书;张涛;李小飞

    目的:探讨含克林诺脂肪乳剂的全肠外营养(TPN)及含中长链脂肪乳剂的TPN对食管癌患者术后免疫功能的影响。方法:43例食管癌手术患者随机分成两组,一组术后给予7d以上的含脂肪乳剂克林诺的TPN,另外一组则给予7d以上含中长链脂肪乳剂中长链脂肪乳的TPN。检测各患者术前1d,术后1d,术后8d免疫球蛋白5项及淋巴细胞计数及亚群,采用t检验或秩和检验进行统计学分析。结果:两组患者术后第1d的淋巴细胞、IgA、IgG、IgM、CD8+等较术前1d均有明显下降;术后8d的IgA、IgG、IgM、C3等较术后1d均有明显上升;术后8d和术后1d的变化两组间相比,克林诺组IgG升高更明显;术后8d和术前1d的变化两组间相比,克林诺组的IgG,IgM较术前升高更明显。结论:手术明显降低食管癌患者机体的细胞免疫和体液免疫功能;行7d的含脂肪乳剂的TPN可明显的促进食管癌患者体液免疫功能恢复,而对细胞免疫无影响;与中长链脂肪乳相比,含克林诺的TPN可能更有利于促进食管癌患者术后机体免疫功能的恢复。

  • CD133在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

    作者:王勇文;张晋;冯钢

    目的:研究食管鳞状细胞癌组织中CD133的表达与肿瘤细胞增殖及侵袭转移的关系。方法:取40例食管鳞状细胞癌患者的组织石蜡标本,用免疫组化方法检测CD133的表达,同时检测Ki67的表达,分析探讨CD133表达与食管鳞状细胞癌临床病理因素的相关性。结果:肿瘤组织中CD133及Ki67的表达率均较癌旁组织高,且CD133的表达与肿瘤的侵润深度、淋巴结转移情况及分化程度呈正相关,同时CD133的表达与患者术后远期生存率具有相关性。但CD133与Ki67的表达情况无显著相关性。结论:食管鳞状细胞癌组织中,CD133的表达与肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移具有相关性,可以成为评价食管癌鳞状细胞癌肿瘤生物学特性及判断预后的的指标。

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