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胃癌组织中法尼基转移酶基因表达与临床病理特点及H-ras突变的关系
目的:检测人胃癌及相应癌旁组织中法尼基转移酶(FTase)β-亚单位mRNA表达和H-ras基因第12密码子点突变探讨FTaseβ-亚单位基因在胃癌中的表达与临床病理特点、H-ras基因突变的关系.方法:收集胃癌及相应癌旁正常组织标本43例.应用半定量逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)测定FTase β-亚单位mRNA基因表达水平,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析H-ras基因第12密码子点突变情况.采用秩和检验分析胃癌和癌旁组织的FTase β亚单位mRNA表达的配对数据的差异;采用多元逐步回归分析胃癌组织中FTaseβ亚单位mRNA表达活性与临床病理特点及H-ras基因突变间的关系.结果:胃癌组织中FTase β亚单位mRNA的平均值明显高于癌旁组织(0.89±0.48 vs 0.69±0.40),两者相比有显著性差异(Z=2.469,P=0.014).在43例胃癌组织中有1例发现突变(1/43,2.3%),癌旁组织中未发现突变.胃癌组织的FTase β亚单位mRNA表达活性与年龄、肿瘤部位、组织学分级、有无淋巴结转移及有无H-ras基因突变无关,在女性,病理分型为印戒细胞癌的胃癌组织中有较高的FTase β亚单位mRNA表达活性.结论:FTase β亚单位mRNA在胃癌组织中表达升高.胃癌组织中H-ras基因第12密码子点突变率低,在胃癌的发生中不起主要作用,并且与FTase β亚单位mRNA的表达无相关.
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人乳头状瘤病毒和p53基因及H-ras基因在喉癌细胞中的表达
目的:研究喉癌细胞p53基因、H-ras基因突变及其与人乳头状瘤病毒(HPV)感染的关系,探讨其在喉癌发生发展中可能起的作用.方法:采用分子生物学技术,包括聚合酶链反应、单链构型多态性分析、限制性内切酶长度多态性分析,及DNA序列分析等方法,对28例喉癌进行人乳头状瘤病毒、p53基因及H-ras基因检测.结果:28例喉癌中有50%在p53基因的第7～8外显子有突变,其中4例行DNA序列分析表明均有碱基替换、插入或丢失;而H-ras基因第12密码子的突变率仅3.57%;高危型HPV(HPV-16或-18)感染在喉癌细胞中有一定的特异性,且与p53基因突变有一定的相关性.结论:在喉癌的发生发展过程中高危型HPV感染和p53基因突变起着重要的作用,且两者之间可能存在某种内在的联系.
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H-ras原癌基因在乳腺癌转移中的作用研究
目的研究H-ras基因在乳腺癌转移中的作用及作为预测乳腺癌转移潜能指标的价值.方法采用免疫组织化学LSAB法观察76例乳腺癌、34例淋巴结转移灶和8例乳腺纤维腺瘤组织中p21蛋白、PCNA、CD44、ⅧRAg的表达情况;采用PCR-RFLP法检测42例乳腺癌、6例乳腺纤维腺瘤H-ras 12位密码子点突变状态.结果76例乳腺癌p21蛋白阳性58例,有淋巴结转移组阳性率明显高于无转移组,2组比较有显著性差异(P＜0.05).p21蛋白与CD44、PCNA表达均呈正相关(γ=0.6337,P＜0.01;γ=0.3044,P＜0.05).p21蛋白阳性组肿瘤间质血管密度(IMVD)明显高于阴性组,2组比较有非常显著性差异(P＜0.01).结论p21蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移密切相关;与CD44、IMVD联合检测可作为预测乳腺癌转移潜能敏感且准确的指标.
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槲皮素抑制乳腺癌发生及增殖的实验研究
目的探讨槲皮素抑制乳腺癌发生及增殖的作用.方法建立二甲基苯丙蒽(DMBA)诱导的乳腺癌动物模型.79只雌性SD大鼠随机分为A组(DMBA)、B组[DMBA+三苯氧胺(TAM)]、C组(DMBA+槲皮素)及D组(空白对照).持续喂养28周,经光镜、电镜观察,抗PCNA及H-ras免疫组化分析.结果①A组大鼠乳腺肿瘤发生率为76.2%,明显高于B组(40.9%)、C组(45.5%)及D组(0%),P＜0.05; B组与C组相比差异无显著性意义(P＞0.05).②A组大鼠乳腺癌平均直径2.37cm,明显大于B组(1.82cm)及C组(1.71cm),P＜0.05; B组和C组相比差异无显著性意义(P＞0.05).③PCNA免疫组化染色显示: A组与B组和C组相比差异有显著性意义(P＜0.05),B组和C组相比差异无显著性意义(P＞0.05).④H-ras免疫组化染色显示: A组与B组和C组比较差异有显著性意义(P＜0.05),B组和C组相比差异无显著性意义(P＞0.05).结论槲皮素有降低DMBA诱导的SD大鼠乳腺癌发生率及抑制肿瘤生长的作用,其机理可能与抑制ras基因活性、阻抑细胞增殖有关.
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H-ras干扰性RNA对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤CD44V6表达的影响
目的 应用重组质粒pshRNA/H-ras转染卵巢癌SKOV3荷瘤裸鼠,观察Ras信号传导通路中信号分子的变化.方法 选用裸鼠20只建立卵巢癌裸鼠皮下成瘤模型,分别设立对照组和实验组,应用陡脉冲电转重组质粒pshRNA/H-ras于瘤体中,于治疗后21天处死裸鼠并取瘤体组织固定,免疫组织化学SP法检测CD44V6的表达.结果 对照组细胞膜、浆中见变异型细胞黏附分子44(CD44V6)的阳性表达,而转染pshRNA/H-ras实验组CD44V6的表达显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 H-ras的小干扰性RNA可下调与肿瘤转移相关基因的表达,对阻止肿瘤侵袭转移具有较好的研究价值.
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长期放置含铜IUD与ras、p53基因突变及HPV感染的关系
目的:探讨长期(5年以上)放置含铜宫内节育器(intrauterine device,IUD)与宫颈细胞ras、p53基因突变及人乳头瘤病毒(Human papillomaviruses,HPV)感染的关系.方法:采集宫颈脱落细胞学液基标本,采用伯塞斯达系统(the bethesda system,TBS)诊断标准行宫颈细胞病理学诊断;采用PCR-SSCP技术检测标本中H-ras、p53基因的表达;采用FQ-PCR技术检测肿瘤相关HPV DNA含量.结果:H-ras及p53基因表达在各组中均无改变;含铜IUD组中HPV 6/11型阳性率为3.33%,DNA含量为8.80 × 107copy/ml,对照组中HPV6/11型阳性率为3.70%,DNA含量为6.75×107copy/ml,两组相比差异无统计学意义(P＞0.05).两组HPV16/18型均为阴性.结论:长期放置含铜IUD(带尾丝)对子宫颈无致突变作用,不增加肿瘤相关HPV感染,不增加子宫颈病变的发生率.
