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肺癌活检组织中Polo样激酶-1 mRNA水平检测的临床意义
目的 探讨实时荧光定量-聚合酶链反应(RFQ -PCR)检测肺癌活检组织Polo样激酶-1(PLK1)mRNA水平,及其与肺癌临床病理分期、分型的相关性.方法 对69份肺癌、28份肺良性疾病患者的纤维支气管镜活检标本,采用RFQ-PCR检测PLK1和GAPDH荧光强度,并绘制曲线,计算出循环数阈值(Ct),相同组织中PLK1和GAPDH的初始模板量的比值为2CtGAPDH-CtPLK1,同时以此值作为PLK1 mRNA水平的相对定量指标进行标本检测结果评价.结果 肺癌组PLK1 mRNA水平为0.124±0.194,肺良性疾病组为0.037±0.042,两者差异有统计学意义(P=0.03).而其在各病理类型和不同TNM分期之间的差异均无统计学意义(P＞0.05),仅小细胞肺癌的表达水平略高(0.191±0.275).结论 RFQ -PCR测定纤维支气管镜活检标本中PLK1基因表达增高与肺癌的发生存在一定关系,并且可能成为肺癌检测的一个肿瘤标志.
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PLK1靶向治疗在非小细胞肺癌中的研究进展
世界范围内,非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)是癌症死亡的主要原因.随着对NSCLC分子发病机制的深入了解,我们能够发现新的靶点和抗癌药物来治疗NSCLC.Polo样激酶-1(PLK1)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,并且是有丝分裂的关键性调节因子.PLK1抑制剂能够引起有丝分裂的停止并且引起肿瘤细胞凋亡.PLK1在肿瘤组织中过表达,然而在成熟组织中却很难检测到.RNA干扰(RNAi)是我们抗癌治疗的又一有力工具,它能够靶向mRNA并导致靶基因表达降低.在这篇综述中,我们将重点讨论与NSCLC相关的PLK1、PLK1抑制剂及靶向PLK1 的小干扰RNA(siRNA).
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靶向polo样激酶-1基因小干扰RNA质粒的构建及其效能检测
目的:用脂质体法构建polo样激酶-1 (polo-like kinase-1,PLK1)基因RNA(siRNA).方法:设计合成PLK1siRNA干扰序列,构建干扰载体,然后以该siRNA转染SMMC-7721细胞后,以实时定量Western Blot检测各组细胞PLK1蛋白表达情况.结果:应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞48 h后,PLK1蛋白的表达siRNA分别较无关对照组和空白对照组有明显下降.结论:通过脂质体转染法成功构建靶向PLK1的siRNA,实现了细胞的稳定转染,为进一步研究奠定了基础.
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PLK1小分子抑制剂的抗肿瘤活性及其在肿瘤治疗中的应用现状
在肿瘤治疗中蛋白激酶被认为是重要的干预靶点之一.作为高度保守的苏氨酸、丝氨酸蛋白激酶,Polo样激酶(polo-like kinase,PLK)在真核生物中广泛存在.PLK1在多数肿瘤组织中表达均显著上调,且参与细胞恶性生物学行为及肿瘤的发生、发展,所有的证据均显示PLK1在肿瘤的治疗过程中可能是重要的干预靶点.随着临床上对PLK1小分子抑制剂研究的不断深入,不断有新的PLK1高效选择性抑制剂被发现,以PLK1为靶点的肿瘤干预方案已成为肿瘤治疗中的热点.本文将对PLK1小分子抑制剂在肿瘤治疗中的应用现状及抗肿瘤活性进行综述.
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polo样激酶-1干扰质粒构建及对人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡的影响
目的 构建polo样激酶-1(PLK1)基因小干扰RNA(siRNA),观察其对肝癌细胞凋亡的影响.方法 设计合成3个PLK1 siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3)干扰序列,构建干扰载体,转染人肝癌细胞株SMMC-7721,观察48 h后转染效率,采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)筛选下调PLK1 mRNA效果好的siRNA；然后选择以该siRNA转染48 h的SMMC-7721细胞,分别以实时定量RT-PCR和Western blot法检测空白组、对照组及转染组细胞中PLK1基因和蛋白表达；流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的改变.结果 肝癌细胞株SMMC-7721中存在PLK1蛋白的过表达.应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞48 h后,PLK1 mRNA相对水平siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了74％和78％,而PLK1蛋白的表达siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了83％和88％,抑制率达88％；siRNA2组中出现大量凋亡细胞,与对照组比较差异有统计学意义(P＜ 0.05).结论 PLK1基因在肝癌细胞增殖中具有重要的调控作用.PLK1-siRNA转染可明显抑制癌细胞增殖,诱导凋亡是其重要机制之一.
