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大鼠肾移植急性排斥反应调节性T细胞及其基因表达的机制研究
目的 观察肾移植大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞及其表面标志物Foxp3、ABCC4、eIF6基因表达,结合白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-γ(INF-γ)水平及肝、肾功能变化进行相关分析,探讨其在移植免疫排斥机制中的作用及意义.方法 监测急排组与非急排组大鼠肝、肾功能;ELISA方法检测血浆中IL-2和INF-γ 的表达水平;流式细胞仪检测CD4+、CD8+、CD4+CD25+Treg细胞亚群;荧光PCR检测CD4+CD25+Treg细胞Foxp3、ABCC4及eIF6 mRNA表达.结果 与术前相比,急排组术后第7天血清肌酐、尿素氮均明显升高(P<0.05);急排组术后第7天IL-2及IFN-γ 均升高,差异有统计学意义(P<0.05);急排组术后CD3+、CD4+、CD8+水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与非急排组相比,急排组术后CD4+CD25+Treg细胞表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).与非急排组相比,急排组术后Foxp3+基因表达量明显降低,ABCC4、eIF6基因表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 CD4+CD25+调节性T细胞在肾移植排斥反应中起到重要作用,CD4+CD25+Treg细胞Foxp3、ABCC4及eIF6 mRNA参与急性排斥反应的发生,检测其变化可辅助诊断急性排斥反应的发生.
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高糖对大鼠腹膜间皮细胞分泌FOXP3mRNA的影响及苦参碱的干预作用
目的:研究高糖刺激下大鼠腹膜间皮细胞分泌叉头状螺旋转录因子(FOXP3mRNA)及苦参碱的干预作用,探讨腹膜纤维化发生机制.方法:通过体外培养大鼠腹膜间皮细胞(PMCs),依据加入药物浓度分成5组:2.5％葡萄糖组(n=10,A);2.5％葡萄糖+苦参碱组(n=10,B);4.25％葡萄糖组(n=10,C);4.25％葡萄糖+苦参碱组(n=10,D);空白对照组(仅加不合血清的DMEM/F12培养基),分别于第24 h、48 h、72 h收集培养上清液,采用RT-PCR检测FOXP3mRNA的表达,同时观察各组大鼠腹膜间皮细胞光镜下的表现.结果:光镜下,可见对照组和B组腹膜间皮细胞小,呈圆形、梭形或不规则形,生长密集.A、C、D组腹膜间皮细胞大、呈梭形、分布较稀疏;在含2.5％高糖A组,FOXP3mRNA的表达相对水平较对照组增加,差异有统计学意义(P＜0.05);而在4.25％高糖C组,FOXP3mRNA的表达较对照组增加明显,差异有统计学意义(P＜0.01).在含苦参碱溶液的B组和D组中,PMCs表达FOXP3mRNA的相对水平B组较A组减少,但差异无统计学意义(P＞0.05);D组较C组下降明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:苦参碱能拮抗高糖致大鼠腹膜间皮细胞分泌FOXP3mRNA,从而保护腹膜间皮细胞.
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养正消积胶囊对胃癌组织Foxp3基因和相关细胞因子表达的影响
目的:探讨养正消积胶囊对胃癌组织Foxp3mRNA、scurfin蛋白及血清I1-10、TGF-β1表达的影响.方法:用皮下注射法造模成功后,分为模型组、养正消积胶囊组、5FU组、联合组,另设正常组,每组10只.分别用免疫荧光定量、蛋白质印迹、酶联免疫吸附法进行Foxp3mRNA、scurf in蛋白、IL-10、TGF-β1的检测.结果:养正消积胶囊组、联合组Foxp3 mRNA、scurfin蛋白、IL-10、TGF-β1的表达较模型组明显降低,有统计学意义(P＜0.05).结论:养正消积胶囊能抑制Foxp3mRNA、scurfin蛋白以及IL-10和TGF-β1的表达,逆转肿瘤免疫逃逸,起到抗癌作用.
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转录因子Foxp3表达与胚胎停止发育关系的研究
目的:探讨转录因子Foxp3与胚胎停止发育的关系.方法:采用半定量PT-PCR法对30例正常早孕妇女和18例胚胎停止发育妇女蜕膜组织的Foxp3mRNA转录水平进行分析.结果:胚胎停止发育的妇女蜕膜组织Foxp3mRNA的表达显著低于正常早孕妇女的表达(P<0.05).结论:Foxp3在蜕膜组织的表达很有可能在胚泡植入和早期妊娠的维持中起重要作用,它的表达水平降低可能与胚胎停止发育的发生有密切的关系.
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FoxP3mRNA在胃癌患者CD4+CD25+调节性T细胞中的表达及其临床意义
目的 探讨胃癌患者体内CD4+CD25+调节性T细胞的含量及FoxP3mRNA在Treg中的表达情况及其临床意义.方法 应用流式细胞术(FCM)测定20例胃癌患者外周血中Treg细胞含量,同时采用RT-PCR技术检测其FoxP3mRNA的表达情况,并与20例健康志愿者的外周血进行对比研究和统计学分析.结果 胃癌患者外周血中Treg细胞占CD4+T细胞总数的(12.76±0.46)%,显著高于健康对照组的(6.81±0.66)%,(P＜0.01);FoxP3mRNA在胃癌患者外周血Treg细胞中呈现高表达(0.84±0.02)%,明显高于其在健康对照组中表达(0.76±0.03)%,(P＜0.05).结论 胃癌患者外周血中Treg的数量较正常人明显增高,同时伴随有FoxP3mRNA高表达,提示FoxP3基因可能对Treg有重要的调节功能,从而影响胃癌病人的抗肿瘤自身免疫功能.
