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FAME全自动酶免分析系统的保养与维护
血液及血液制品的应用是临床急救和治疗的重要手段,其安全性越来越受到社会的广泛关注.保证血液质量永远是血站工作的关键和核心,检验质量是血液质量的关键.2001年本站正式引进FAME全自动酶免分析系统,完全替代了以前手工进行酶联免疫吸附试验(ELISA)的操作,提高了检测的精确度和特异性,重复性好,避免了人为因素造成的偶然误差[1],使血液检测质量上了一个新台阶.
关键词： 酶类/分析 自动分析/仪器和设备 -
肺炎支原体肺炎患儿血清心肌酶谱测定的临床意义
目的 探讨肺炎支原体肺炎患儿血清心肌酶谱的改变及其临床意义.方法 对肺炎支原体肺炎患儿50例(支原体肺炎组)及健康体检小儿50例(健康对照组)行心肌酶谱检查,并进行比较.结果 支原体肺炎组治疗前心肌酶谱异常率与健康对照组比较,治疗后心肌酶谱异常率与治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.01),治疗后两组上述指标比较差异均无统计学意义.结论 肺炎支原体肺炎患儿可存在不同程度的心肌损害,应常规检查心肌酶谱,以便及早发现、及时治疗.
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Leber遗传性视神经病变一家系线粒体DNA突变检测及临床分析
Leber遗传性视神经病变(LHON)系一种主要累及视盘黄斑束纤维,导致视神经退行性病变的遗传性疾病,临床多表现为双眼急性或亚急性中心视力减退及进行性视神经萎缩[1].目前认为该病与线粒体DNA突变密切相关[2].我们对一临床诊断为LHON的家系的资料进行分析,并应用聚合酶链反应(PCR)和限制性核酸内切酶酶谱分析技术,对部分家系成员进行mtDNA核苷酸位点(3460、11778、14484)的突变检测.现将结果报道如下.
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结核分枝杆菌泛酸激酶的克隆表达及酶学性质
目的:获得具有生物学活性的结核分枝杆菌(Mtb)重组泛酸激酶蛋白. 方法:以结核分枝杆菌模式菌株H37Rv基因组为模板,扩增泛酸激酶基因CoaA(Rv1092c),克隆入原核表达载体pET28a中,重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达. 在优化后的诱导条件(20℃,10 h,0.5 mmol/L IPTG)下,收集细菌进行超声破碎,低温高速离心,得到的上清液经镍离子螯合型亲和层析柱纯化重组蛋白. 高效液相色谱及质谱鉴定重组蛋白. 采用酶联法测定重组蛋白的酶学性质. 结果:得到了高表达、高纯度的重组结核分枝杆菌的泛酸激酶,酶催化过程中对泛酸的kcat和Km值分别为273.81 kat/L, 35.27 μmol/L;对ATP的kcat和Km值分别为169.10 kat/L, 94.43 μmol/L. 重组蛋白经高效液相色谱及质谱鉴定,测得Mr约为39 168. 在5 mmol/L Tris-HCl缓冲液,pH值7.5,25℃条件下,重组CoaA的二级结构中有39.3% α螺旋,13.7% β折叠,14.3% β转角,32.5%无规则卷曲. 结论:成功克隆表达结核分枝杆菌泛酸激酶,酶学性质和二级结构鉴定表明重组泛酸激酶折叠正确,且具有生物学活性,为基于该酶筛选新型抗结核药物奠定了基础.
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尿NAG活性的测定在肾脏疾病中的临床意义
为探讨尿NAG在肾脏疾病中的临床意义,采用固定时间法测定尿NAG.结果显示,尿Tp正常组患者尿NAG增高者占60%,尿Tp异常组患者尿Tp与尿NAG值较对照组增高(P＜0.01),且尿Tp与NAG呈高度正相关(r=0.86,P＜0.01).当Ccr＜70ml/min时尿NAG显著高于对照组(P＜0.01),且随着Ccr的下降,尿NAG显著升高(P＜0.01).当药物透析等手段治疗有效时尿NAG显著降低(P＜0.01),无效者则无变化(P＞0.05).提示尿NAG是诊断肾脏损害的早期、灵敏的指标,并可估计病情,观察疗效.
