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小鼠胃幽门部类器官长时期培养模型的建立和形态分析
目的 探讨建立基于干细胞的小鼠胃幽门部类器官体外长期培养体系的方法,分析实验操作中的注意事项,为促进胃发育、生理、感染和肿瘤发生等研究提供理想的实验模型.方法 培养和收集R-Spondin1、Wnt-3A条件培养基,按生长因子比例制备类器官培养基.处死C57BL/6小鼠,分离胃幽门部,彻底清洗、消化并收集胃腺体.基质胶包埋后加入类器官培养基,显微镜下观察类器官生长状况.收集生长时间为1个月和5个月的类器官,制成石蜡标本,行HE和Ki67免疫组织化学染色,比较两个时间点的类器官形态和增殖能力.结果 在基质胶和类器官培养基的作用下,胃幽门部类器官能长期持续培养达7个月以上.组织形态上,生长时间为1个月和5个月的类器官均显示由单层柱状上皮构成.Ki67阳性细胞数前者稍高,但后者仍具一定的生长增殖能力.结论 成功建立了小鼠胃幽门部类器官体外长期培养体系,建立了类器官的石蜡样本处理方法并优化步骤,提供了具广泛应用前景的新兴的实验模型.
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胃干细胞与弥漫型胃癌的发生
随着发病率的增高,弥漫型胃癌对人类的健康造成了较大危害.研究表明,此类胃癌的发生与胃黏膜增殖区有关,而这一区域也正是胃干细胞定居的部位.因此胃干细胞可能在弥漫型胃癌的发生过程中扮演了重要角色.这方面的研究将加深我们对弥漫型胃癌发生机制的认识,并有助于实现早期防治的目标.
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胃癌与胃干细胞关系的研究现状
胃癌是危害人类健康常见的恶性肿瘤之一.我国是胃癌的高发地区,其死亡率在各种恶性肿瘤中居第3位,而其发病机制目前还不十分清楚.传统肿瘤学观点认为,肿瘤组织中每个肿瘤细胞都具有无限增殖和形成克隆瘤灶的能力,而新近提出的“肿瘤干细胞学说”为胃癌的发病机制研究及治疗开辟了新的途径.随着对于细胞与肿瘤关系研究的深入,越来越多的证据表明干细胞与肿瘤细胞有很多共同特性,肿瘤来源于干细胞的理论越来越受到重视,干细胞与肿瘤关系的研究已成为目前研究热点之一.对于胃癌干细胞存在与否及其来源于何种细胞的深入研究将为针对于细胞的胃癌治疗提供新思路.
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和胃1号促进胃干细胞定向分化的动物实验研究
目的 探讨和胃1号促进胃干细胞定向分化的作用机制.方法 以水杨酸钠法复制慢性萎缩性胃炎(CAG)模型.免疫组化法检测各组胃黏膜腺体泌酸细胞数量;半定量实时荧光PCR法检测胃黏膜三叶因子(TFF)TFF1,TFF2和musashi-1 mRNA的表达;琼脂糖凝胶电泳检测表达产物的特异性.结果 模型组小鼠胃黏膜TFFI,TFF2 mRNA表达水平及泌酸细胞数量显著低于正常组(P<0.05),干预组TFF1,TFF2 mRNA的表达水平及泌酸细胞数量显著高于模型组(P<0.05).模型组小鼠胃黏膜musashi-1 mRNA表达水平显著高于干预组与正常组(P<0.01),干预组表达减少.结论 和胃1号可促进胃干细胞定向分化,主要作用机制为上调TFF1,TFF2表达,下调musashi-1表达.
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胃干细胞调控机制及其在胃类器官构建中的应用研究
胃干细胞是存在于胃组织中的成体干细胞,具有自我更新和高度增殖能力,它有多向分化潜能,能分化形成各种胃黏膜上皮细胞.胃干细胞在胃黏膜上皮的自我更新和损伤修复过程中发挥至关重要的作用,其可使胃黏膜上皮处于动态平衡状态,并维持胃黏膜的完整性.随着对干细胞研究的不断深入,胃干细胞的应用为胃生理与疾病的研究提供了新的手段.自2010年报道胃类器官模型的构建方法以来,胃类器官迅速成为胃相关疾病研究领域的热点.胃类器官作为一种良好的基础实验模型,在多方面优于动物实验模型和常规细胞培养模型,其在细胞成分、组织架构及特定功能等方面与胃上皮组织高度相似,实现了在体外培养环境中对胃上皮组织的复制.特别是衍生于人体的胃类器官,为在体外环境中了解机体内胃的真实状况开启了一个新的“窗口”.笔者综述了胃干细胞调控机制的新研究进展,总结其在胃类器官构建方面的应用.
