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不同基因型戊型肝炎病毒重组抗原p166用于抗体检测的价值
目的探讨不同基因型和亚型戊型肝炎病毒(HEV)ORF2重组蛋白p166用于抗体检测的价值,为研发准确可靠的戊型肝炎诊断试剂提供新的途径.方法用等浓度的不同基因型和亚型HEV p166作为包被抗原,对血清标本进行酶联免疫吸附试验测定.用HEV多基因型通用性引物逆转录套式PCR(RT-nPCR)扩增标本中HEV RNA,并测序、分型.结果8种不同p166抗原对30份健康献血者血清无抗原性,对182份来自世界不同国家和地区的已知HEV抗体阳性血清和7份HEV实验感染动物血清标本均呈阳性反应,但所得血清抗体滴度的高低与所用抗原的基因型有明显关系.RT-nPCR检测的50份中国血清标本中,19份阳性,基因分型均为Ⅳ型,与Ⅳ型中国株p166抗原反应好.而以同属于第Ⅲ基因型的猪HEV新西兰株和人HEV美国株重组p166检测血清标本,两者结果差异无统计学意义.以多基因型p166混合抗原建立的ELISA抗体检测法与两种市售试剂盒比较,前者敏感性高,特异性好.结论不同基因型和亚型的HEV重组蛋白p166对不同血清标本HEV抗体检测的敏感性高低不同,因此多基因型和亚型p166的混合抗原是HEV抗体检测的佳抗原.
关键词： 戊型肝炎病毒 基因型 重组蛋白 酶联免疫吸附试验 逆转录套式聚合酶链反应 -
逆转录套式聚合酶链反应检测库存血丙型肝炎病毒核糖核酸的临床意义
目前,我国绝大多数采供血机构采用酶联免疫吸附法(ELISA)筛检献血者丙型肝炎抗体(抗-HCV),明显地降低了输血后肝炎(PTH)的发病率.
关键词： 丙型肝炎病毒 逆转录套式聚合酶链反应 库存血 丙型肝炎抗体 -
庚型肝炎病毒感染的临床特点及对外周血单个核细胞感染的研究
目的 探讨庚型肝炎病毒(HGV)感染的临床特点及其在体内的亲嗜性和复制位点。方法 采用逆转录-套式聚合酶链反应(RT-nested PCR)对129例高危人群的血清及其中59例的外周血单个核细胞(PBMCs)进行HGV RNA正、负链检测、临床分析。结果 9例单纯HGV感染者中，急性肝炎3例，慢性肝炎3例，另3例为无症状携带者；HGV对PBMCs的感染率(35.7%)显著低于丙型肝炎病毒(HCV)感染(77.3%，P＜0.05)；全部标本中均未发现HGV RNA负链存在。结论 HGV感染可引起急、慢性肝炎，但临床症状轻；HGV可感染PBMCs，但较HCV感染能力弱；HGV不在PBMCs中复制。
关键词： 肝炎病毒 庚型 病毒核酸正链和负链 外周血单个核细胞 逆转录套式聚合酶链反应 -
羟基磷灰石抽提逆转录套式PCR检测轮状病毒
目的:建立快速、准确、灵敏的检测轮状病毒的方法.方法:用羟基磷灰石抽提轮状病毒RNA,在轮状病毒基因6片段设计引物建立RT-PCR法检测腹泻婴幼儿大便中的轮状病毒.结果:该法重复性好,特异性高,且敏感度比PAGE法至少高1000倍.108例临床标本检测表明该法检测阳性率高为56.5%.结论:羟基磷灰石抽提RT-PCR法检测轮状病毒,快速、准确、灵敏度高,优于PAGE、ELISA和LA法.
关键词： 轮状病毒 逆转录套式聚合酶链反应 羟基磷灰石 -
原发性肝癌患者庚型肝炎病毒感染的临床研究
目的：探讨原发性肝癌患者庚型肝炎病毒（HGV）感染的状态。方法:根据中国株HGV 5'端非编码序列设计引物，采用逆转录套式聚合酶链反应方法。用此技术对107例原发性肝癌、45例慢性肝炎、43例肝硬化患者血清进行了检测分析。结果：107例原发性肝癌患者中有10例HGV-RNA阳性（9.3%）;45例慢性肝炎患者中有5例HGV-RNA阳性（11.1%）;43例肝硬化患者中有3例HGV-RNA阳性（7.0%）。结论：庚型肝炎病毒感染可能与原发性肝癌发生有一定关系,但不是引起肝癌的主要的因素。
关键词： 庚型肝炎病毒 原发性肝癌 逆转录套式聚合酶链反应 -
南京地区戊型肝炎病毒基因型鉴定和变异分析
为了解南京地区戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)基因型的分布以及变异状况,本研究采用逆转录套式聚合酶反应(RT-nPCR)的方法检测南京地区40份急性散发性戊型肝炎患者的粪便标本,对PCR产物进行测序,利用生物信息学软件比较核苷酸的同源性、遗传距离,进行基因分型和变异分析.40份粪便标本中检测到14份阳性HEV、RNA,检出率为35%,基因分型均为HEV Ⅳ型,且分属2个不同的亚型;利用生物信息学软件对国内Ⅰ型和Ⅳ型毒株加以比较,发现HEV Ⅳ型毒株比Ⅰ型变异程度高,不同年份的HEV Ⅳ型毒株变异更大,有新的亚型出现,且变异有随时间推移而增大的趋势.
关键词： 戊型肝炎病毒 基因型 序列分析 逆转录套式聚合酶链反应
