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FABP-5基因沉默对肝癌Bel-7402细胞生物学特性及人参川穹嗪敏感性的影响
目的 探讨通过siRNA干扰技术沉默表皮脂肪酸结合蛋白-5(FABP-5)基因表达对人肝癌Bel-7402细胞生物学特性及人参川穹嗪敏感性的影响.方法 以人肝癌Bel-7402细胞为研究对象,根据FABP-5mRNA 编码序列设计并合成干扰 siRNA 序列,瞬时转染Bel-7402 细胞.将人肝癌 Bel-7402 细胞分为 FABP-5 siRNA 组、阴性对照组、空白对照组.用 RT-PCR 和Western blot 法分别从 mRNA 水平和蛋白水平检测FABP-5 基因的表达;CCK8 法测定细胞体外增殖能力;流式细胞技术检测各组细胞周期和凋亡的变化情况;细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力;MTT 法观察 FABP-5基因沉默后 Bel-7402 细胞对人参川穹嗪的敏感性.结果 RT-PCR 和 Western blot 显示,FABP-5 siRNA 组较阴性对照组和空白对照组的 FABP-5 mRNA 和蛋白表达都明显下降;FABP-5 siRNA 组细胞的生长速度明显减慢,细胞周期阻滞在 G0/G1期,S 期细胞数减少;与阴性对照组和空白对照组相比,FABP-5 siRNA 组细胞的凋亡率明显升高(P < 0.01),增殖、侵袭能力显著下降(P < 0.05);FABP-5 siRNA组细胞对人参川穹嗪的敏感性显著增强(P < 0.05).结论 特异性沉默 FABP-5 基因表达能够降低肝癌细胞的侵袭能力,抑制细胞的增殖,将细胞周期阻滞于 G0/G1期,使其凋亡显著增加.