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AML1、AML1-ETO对nucb2基因转录调控活性的影响
本研究旨在探讨造血特异转录因子AML1及M2b型急性髓系白血病(AML-M2b)累及的异常融合蛋白AML1-ETO对凋亡相关基因nucb2(nucleobindin-2)启动子转录活性的影响,探索AML1-ETO对AML-M2b型白血病的分子致病机制.利用实时RT-PCR方法在AML1-ETO诱导型白血病细胞株中研究AML1-ETO在转录水平对于nueb2的调控情况;利用ChIP-qPCR方法在AML1-ETO阳性白血病细胞株中研究AML1、AML1-ETO与nucb2基因启动子之间直接的体内相互作用情况;采用双荧光素酶报告基因检测方法,研究AML1、AML1-ETO对nucb2启动子转录活性的调节作用.结果表明:AML1-ETO的表达与nucb2的表达呈负相关;nucb2可能是AML1、AML1-ETO的靶基因;AML1、AML1-ETO皆对nucb2启动子具有转录抑制作用,且AML1-ETO对nucb2抑制更强.结论:nucb2是AML1、AML1-ETO的直接靶基因,AML1、AML1-ETO通过抑制nucb2启动子的活性对其进行转录调控.
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NUCB2/nesfatin-1在肥胖大鼠胃肠道组织中的表达
目的:研究肥胖与正常大鼠胃肠组织NUCB2 mRNA及NUCB2/nesfatin-1蛋白的表达.方法:30只健康♂Wistar大鼠随机均分为高脂高营养性肥胖组和正常对照组,8 wk后取其胃、十二指肠、小肠、结肠组织,分别采用实时荧光定量RT-PCR及免疫组织化学的方法检测NUCB2 mRNA及NUCB2/nesfatin-1蛋白的表达.结果:(1)肥胖组大鼠胃、十二指肠、小肠NUCB2 mRNA表达量分别是对照组的2.02、1.49、1.23倍(t=4.256,P=0.000;t=3.455,P=0.002;t=2.402,P=0.026),且NUCB2 mRNA表达量与大鼠Lee's指数均呈正相关(r=0.677,P=0.006;r=0.561,P=0.030;r=0.538,P=0.039)；两组大鼠结肠组织NUCB2mRNA表达差异无统计学意义(t=1.835,P=0.077)；(2)两组大鼠胃黏膜中下2/3、十二指肠布氏腺及潘氏细胞、小肠潘氏细胞中均检测到NUCB2/nesfatin-1蛋白的表达；肥胖组大鼠胃NUCB2/nesfatin-1蛋白表达较对照组增多(Z=-2.955,P=0.003),表达量与大鼠Lee's指数呈正相关(r=0.677,P=0.008);肥胖组大鼠十二指肠及小肠潘氏细胞中NUCB2/nesfatin-1蛋白表达较对照组减少(Z=-2.026,P=0.043;Z=-2.648,P=0.008),表达量与大鼠Lee's指数均呈负相关(r=-0.557,P=0.031；r=-0.617,P=0.014).结论:NUCB2/nesfatin-1在大鼠胃肠道中分布广泛,肥胖大鼠胃组织NUCB2 mRNA及NUCB2/nesfatin-1蛋白表达上调、潘氏细胞NUCB2/nesfatin-1蛋白表达下调.
关键词： nucb2 nesfatin-1 肥胖 胃肠道 潘氏细胞 -
术后肠梗阻对大鼠脑内nesfatin-1表达影响
目的 探讨术后肠梗阻对大鼠脑内nesfatin-1表达及临床意义.方法 大鼠经腹腔注射硫酸仲丁巴比妥(100～ 150) mg/kg麻醉后行腹部手术,术后2小时后经心灌注固定,免疫组化观察大鼠脑内c-Fos和nesfatin-1免疫阳性神经元的表达.结果 手术组大鼠下丘脑室上核(SON)(P＜0.01),室旁核(PVN) (P＜0.01),蓝斑(LC)(P＜0.05)、动眼神经副核(EW)(P＜0.01)、中缝苍白核(rRPa)(P＜0.05)、孤束核(NTS)(P＜0.01)、延髓腹外侧区(VLM)(P＜0.01)神经元c-Fos表达显著增加,而nesfatin-1免疫阳性神经元表达无显著改变(P＞0.05).发现腹部手术可激活的c-Fos神经元中,在下丘脑SON内99％、apPVN内71％、lmPVN内47％、mmPVN内41％以及mp-PVN内9％表达nesfatin-1;在脑干、腹部手术可分别激活LC内91％、rRPa内82％、EW和VLM内74％、NTS14％表达c-Fos的nesfatin-1神经元.结论 腹部手术可激活下丘脑和脑干摄食相关中枢内nesfatin-1神经元,其对摄食和胃排空障碍疾病调控具有潜在临床意义.
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多功能内分泌因子Nesfatin-1的研究近况
近年来,随着分子生物学的发展,科学家们发现了越来越多的代谢调节因子,这对脂代谢紊乱、糖代谢异常及血管内皮功能损伤等发病机制的研究做出了重要贡献.2006年,日本学者Oh-Ⅰ等[1]提出了Nesfatin-1存在的第一个信息.随后的研究更深入地探索了Nesfatin-1的分布以及作用机制,发现Nesfatin-1不仅广泛分布于中枢神经系统,也表达于外周组织,而且对过度摄食、心血管功能、生殖功能、胃肠道功能及胰岛素分泌等方面的神经及内分泌调节起一定作用.另外,Nesfatin-1还参与调节一些大脑功能,如与睡眠、认知、焦虑或压力有关的反应.因此,Nesfatin-1的研究对肥胖、糖尿病、癫痫、抑郁等疾病的临床治疗有重要意义.
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禁食前后小鼠胃黏膜NUCB2的变化
目的 观察禁食前后小鼠胃黏膜NUCB2表达的变化.方法 取正常饮食小鼠和禁食48 h的小鼠胃体黏膜组织,采用逆转录PCR检测NUCB2 mRNA表达的变化,Western blot方法检测NUCB2蛋白表达的变化.结果 与正常饮食小鼠比较,禁食48 h后小鼠胃黏膜NUCB2 mRNA水平无明显变化,但其蛋白质表达明显下降(t=9.59,P<0.01).结论 禁食48 h后小鼠NUCB2蛋白的变化是在翻译或翻译后水平上发生.
