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米托蒽醌对人骨髓瘤细胞RPMI8226增殖与凋亡的影响
本研究探讨米托蒽醌对人骨髓瘤细胞RPMI8226的增殖抑制作用及其分子机制.将米托蒽醌作用于骨髓瘤细胞,用MTT法检测细胞增殖抑制率,光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态及超微结构变化,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布,半定量RT-PCR检测BCL-2、BAX及caspase-3 mRNA表达量的变化,Western blot 检测BCL-2、BAX和caspase-3 mRNA蛋白表达量变化.结果表明,米托蒽醌可抑制RPMI8226细胞增殖,抑制率呈时间(r =0.924)和浓度(r =0.947)依赖性增强.米托蒽醌作用24h后在光学显微镜下可见米托蒽醌组细胞数量减少,排列紊乱,细胞形态变得不规则,可见凋亡细胞;在48 h后电子显微镜下可见细胞典型凋亡改变,凋亡小体形成.流式细胞术检测结果显示,在米托蒽醌组RPMI8226细胞凋亡率明显增高(P＜0.05);米托蒽醌作用48 h后,在低浓度1.0 μg/ml组RPMI8226细胞阻滞于G2/M期(P＜0.05),在高浓度2.0μg/nl组RPMI8226细胞阻滞于S期(P＜0.05);米托蒽醌作用48 h,BCL-2 mRNA与BCL-2蛋白表达量减少(P＜0.05),BAX、caspase-3mRNA及蛋白表达量增加(P ＜0.05).结论:米托蒽醌可诱导RPMI8226细胞凋亡,此细胞凋亡可能与细胞周期阻滞,激活细胞内、外源性凋亡的通路有关.
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多西他赛对人骨髓瘤细胞RPMI8226增殖与凋亡的影响
本研究旨在观察多西他赛对人骨髓瘤细胞系RPMI8226增殖和凋亡的影响,探讨其作用的分子机制.采用MTT法检测骨髓瘤细胞增殖抑制率,光学显微镜及电子显微镜观察多西他赛对骨髓瘤细胞形态的影响,Annexin-Ⅴ FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,PI染色流式细胞术检测骨髓瘤细胞周期分布情况,半定量RT-PCR检测多西他赛对BCL-2、caspase-8及caspase-3 mRNA表达影响,Western blot法检测多西他赛作用前后骨髓瘤细胞BCL-2蛋白表达变化.结果显示:0.25-8.0μg/ml终浓度的多西他赛均可抑制RPMI8226细胞增殖,抑制率呈时间(r =0.927)和浓度(r=0.726)依赖性；多西他赛处理组光学显微镜下可见细胞数量明显减少,排列紊乱,高倍镜可见凋亡细胞,偶见坏死细胞；电子显微镜下可见细胞典型凋亡改变以及少数坏死细胞；多西他赛可明显诱导骨髓瘤细胞凋亡(P＜0.01),主要将细胞阻滞于G2/M期(P＜0.01),作用48 h时BCL-2 mRNA与BCL-2蛋白表达量减少(P＜0.05),caspase-8、caspase-3 mRNA表达量增加(P＜0.05).结论:多西他赛通过诱导细胞凋亡可抑制骨髓瘤细胞增殖,其诱导细胞凋亡可能与细胞周期阻滞,激活细胞内、外源性凋亡通路有关.
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雷帕霉素对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖、凋亡及趋化因子受体CXCR4表达的影响
本研究探讨雷帕霉素对骨髓瘤细胞系RPMI8226体外增殖、凋亡、细胞周期及对趋化因子受体CXCR4表达的影响.不同浓度雷帕霉素作用于RPMI8226细胞不同时间,应用MTT检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,半定量PCR检测雷帕霉素干预RPMI8226后细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、CXCR4 mRNA表达,荧光定量PCR检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA表达的影响.结果表明:雷帕霉素对RPMI8226细胞有增殖抑制作用,细胞周期显示细胞阻滞于G0/G1期,G2/M期比例降低,cyclin D1、CXCR4和mTOR mRNA表达下调.结论:雷帕霉素呈时间-剂量依赖性抑制RPMI8226细胞增殖,诱导细胞凋亡,并通过下调mTOR及cyc-linD1表达,使细胞周期阻滞于G0/G1期,同时通过下调细胞CXCR4的表达,减少骨髓瘤细胞与基质细胞间的黏附及趋化作用达到抗肿瘤的效果.
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姜黄素对人多发性骨髓瘤细胞表达Survivin、Bcl-2、Bax的影响
为探讨姜黄素对人多发性骨髓瘤细胞RPMI8226的抑制生长和诱导凋亡的作用机制,应用MTT法检测姜黄素对肿瘤细胞的杀伤效应;用流式细胞术(FCM)分析姜黄素作用后肿瘤细胞凋亡及细胞周期的变化;用RT-PCR方法检测Survivin、Bcl-2、Bax mRNA水平的变化.结果表明:姜黄素明显抑制RPMI8226细胞的增殖,并表现为时间、剂量依赖性,24、48小时IC50值分别为12.15 μmol/L、4.9 μmol/L;凋亡率由10.6%增加到36.9%(p＜0.05),细胞发生G2/M期阻滞;RPMI8226细胞细胞强表达Survivin、Bcl-2,弱表达Bax.RPMI 8226细胞经10μmol/L姜黄素处理24小时后,Survivin、Bcl-2 mRNA表达下调,而Bax表达上调.结论:姜黄素抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖,并诱导凋亡.姜黄素的抗瘤机制可能与凋亡相关蛋白survivin、bcl-2、bax在转录水平的调节有关.
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二甲基亚砜（DMSO）对骨髓瘤细胞 RPMI8226影响的研究
目的：探索二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide，DMSO）对骨髓瘤细胞系 RPMI8226细胞的影响。方法：利用细胞增殖－毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit －8，CCK －8）检测不同浓度 DMSO 作用于 RPMI8226细胞不同时间后对细胞的增殖抑制作用。利用吖啶橙染（AO）色在倒置荧光显微镜下观察细胞的形态变化。结果：DMSO 浓度≤0.6％时各处理组与对照组细胞存活率无影响，当 DMSO≥0.8％时，随着浓度的增加以及作用时间的延长，DMSO 对 RPMI8226细胞的增殖抑制作用逐渐增强，呈浓度－时间依赖性（P ＜0.05），且在荧光显微镜下可观察到凋亡细胞。结论：DMSO浓度≤0.6％时，对 RPMI8226细胞基本无影响，当浓度≥0.8％，DMSO 具有抑制细胞增殖促进细胞凋亡的作用。
关键词： 二甲基亚砜(DMSO) RPMI8226细胞系 细胞增殖
