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我国嗜人按蚊不同地理株基因鉴别的初步研究
目的分析不同地区嗜人按蚊的基因特征. 方法选择13种随机引物对嗜人按蚊江苏、广西和四川实验株以及从湖北和广东现场捕获的嗜人按蚊进行随机引物PCR扩增,并以中华按蚊江苏实验株为对照. 结果 13种随机引物中有7种随机引物对中华按蚊和5个地区的嗜人按蚊PCR扩增的结果存在差别.S-随机引物对中华按蚊和不同地区嗜人按蚊的扩增结果出现明显差异.中华按蚊和不同地区的嗜人按蚊均出现450 bp 较强扩增条带.但240 bp的强扩增条带为中华按蚊所特有.嗜人按蚊江苏和四川实验株分别在230 bp和320 bp处有1条强扩增条带,而从湖北和广东现场采集的嗜人按蚊分别在400 bp和260 bp处出现较强的扩增条带. 结论采用随机引物PCR技术对不同地区嗜人按蚊的基因分析已显示明显差异.已发现的一些特有的DNA扩增条带可被用作进一步的基因特征分析和鉴别.
关键词： 嗜人按蚊 随机引物聚合酶链反应 基因鉴定 -
产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的随机扩增多态性DNA分型研究
目的对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药现状进行分析研究,对耐药株进行基因分型流行病学研究.方法对临床分离的195株肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测并采用微量稀释法测定MIC值,判断细菌的耐药性;对产ESBLs菌株以随机扩增多态性DNA分型法(RAPD)进行基因分型.结果产ESBLs肺炎克雷伯菌占23%,其中51%来源于重症监护病房(ICU);ESBLs阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBLs阴性菌;20株产ESBLs肺炎克雷伯菌分为11型.结论本院神经外科SICU、呼吸科RICU存在产ESBLs肺炎克雷伯菌的流行;合理使用抗生素,加强重点病区的消毒隔离措施,是控制医院感染流行的重要措施;RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速、可靠的基因分型方法.
关键词： 肺炎克雷伯菌 超广谱β-内酰胺酶 随机引物聚合酶链反应 -
细菌随机引物聚合酶链反应分析中随机引物的筛选与反应体系的优化
目的筛选出佳随机引物并优化其反应体系用于8种细菌的随机引物聚合酶链反应(AP-PCR)分析. 方法对200条随机引物进行过筛,应用反应曲面设计(RSD)进行AP-PCR反应体系的优化. 结果 8种细菌各有1条佳随机引物,相应的优化反应体系(关键反应成分)浓度差别较大,其中模板浓度差别大达100倍. 结论以佳随机引物及优化反应体系,才可使AP-PCR分型条件"标准"化.
关键词： 细菌 随机引物聚合酶链反应 引物 -
新疆维吾尔族儿童乳牙龋与变形链球菌基因型相关性的初步研究
目的 探讨新疆维吾尔族不同龋敏感儿童口腔中变形链球菌幕冈多态性与乳才龋发生的关系,以期为新疆维吾尔族儿童乳牙龋危险性预测和防治提供依据.方法 选取新疆乌鲁小齐市3～5岁维吾尔族高龋(龋失补牙数≥5)和无龋(龋失补牙数=0)儿童各17名为研究对象,收集唾液样本,轻唾一杆菌肽琼脂培养基分离培养变形链球菌.典型菌落行革兰染色、生化鉴定并细菌保种,提取基因组DNA,采用OPA02、OPA05和OPA13三个随机引物对变形链球菌临床分离株行随机引物聚合酶链反应基因分型及聚类分析.结果 分别从高龋和无龋儿童口腔中分离鉴定变形链球菌81和62株,共得到40种不同的基因型.17例高龋儿童中9例携带1种基因型,5例携带2种基因型,3例携带3种基因型;17名无龋儿童中14名携带1种基因型,3名携带2种以上基因型.Spearman相关结果 显示基因多态性与龋敏感相关(r=0.342,P<0.05).结论 维吾尔族儿童口腔中变形链球菌菌株间存在明显的基因多态性,高龋儿童口腔中定植的变形链球菌有多种基因型,个体携带基因型的种类数与其致龋能力相关.
关键词： 维吾尔族 链球菌 变异 基因型 随机引物聚合酶链反应 -
重症监护病房甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的分子流行病学调查
目的 了解重症监护病房(ICU)甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子流行病学特点.方法 采用随机引物聚合酶链反应(AP-PCR)法对2004年华中科技大学同济医学院附属同济医院ICU病房分离的25株MRSA作同源性分析.结果 25株MRSA的AP-PCR图谱有7种类型(A～G型),主要型别为A型10株、B型6株、C型3株、D型3株及E、F、G型各1株.结论 医院获得性MRSA是多重耐药菌,在ICU病房流行的MRSA菌株主要是A、B基因型.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 随机引物聚合酶链反应 -
产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的检测及基因分型研究
目的对产ESBL肺炎克雷伯菌的耐药现状进行分析研究,对耐药株进行基因分型,监测耐药株的流行状况.方法对临床分离的195株肺炎克雷伯菌进行药敏试验和ESBL检测,对产ESBL菌株以随机扩增多态性DNA分型法(RAPD)进行基因分型.结果产ESBL肺炎克雷伯菌占23%,其中51%来源于重症监护病房(ICU).ESBL阳性细菌对12种抗生素的耐药性远远高于ESBL阴性菌.20株产ESBL肺炎克雷伯菌分为11型.结论本院脑外SICU、呼吸科RICU存在产ESBL肺炎克雷伯菌的流行,合理使用抗生素,加强重点病区的消毒隔离措施,是控制医院感染流行的重要措施.RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速、可靠的基因分型方法.
关键词： 肺炎克雷伯菌 超广谱β内酰胺酶 随机引物聚合酶链反应 -
随机引物聚合酶链反应在检测变形链球菌基因多态性中的应用
随机引物聚合酶链反应(AP-PCR)是一种DNA指纹技术,已成功应用于以往不能区分的菌株间的遗传变异,可以不需预知靶基因DNA结构顺序,而获得多态性DNA指纹图.随着AP-PCR技术的不断完善,其已被广泛应用于口腔变形链球菌的基因分型研究中.本文就采用AP-PCR技术对变形链球菌进行基因分型的相关研究进行综述.
关键词： 随机引物聚合酶链反应 变形链球菌 基因多态性 龋齿 -
母子口腔中变形链球菌基因型的对照研究
目的:分析高龋、无龋儿童及其母亲口腔中变形链球菌(S.mutans)菌株的基因型,探讨S.mutans基因型与致龋活性的关系.方法:试剂盒法提取细菌染色体DNA,对20 名儿童(高龋组10 名,无龋组10 名)及其母亲的共800株S.mutans临床分离株进行AP-PCR基因型分析.结果:高龋儿童携带的S.mutans基因型数目多于无龋儿童(P＜0.05),高龋儿童的母亲携带的S.mutans基因型数目显著多于无龋儿童的母亲(P＜0.01),高龋儿童母亲的DMFT值显著高于无龋儿童母亲(P＜0.01),高龋组和无龋组的共有基因型数目无统计学差异(P＞0.05).结论:高龋个体比无龋个体携带更多的S.mutans基因型,个体携带的S.mutans基因型数目与其致龋活性有关.
关键词： 变形链球菌 基因型 随机引物聚合酶链反应 -
产头孢菌素酶大肠埃希菌的随机扩增多态性DNA分型研究
目的 对产头孢菌素酶大肠埃希菌的耐药现状进行分析研究,对耐药株进行基因分型流行病学研究.方法 对临床分离的157株大肠埃希菌进行头孢菌素酶(AmpC)检测,采用K-B琼脂扩散法,按照美国CLSI规定判断结果,判断细菌的耐药性;对产AmpC酶菌株以随机扩增多态性DNA分型法(RAPD)进行基因分型;接合试验证实酶基因有无可转移性.结果 产AmpC酶大肠埃希菌占8.9%(14/157);14株产AmpC酶菌株经过RAPD扩增分为13型.结论 本院已经发现产质粒介导AmpC酶菌株,其耐药性能够水平传播.药敏检测结果显示对大多数新型广谱β-内酰胺类抗生素耐药,对亚胺培南敏感.RAPD证实他们大多来自不同的克隆株.RAPD是从分子水平对耐药细菌进行流行病学研究的一种经济、快速、可靠的基因分型方法.
关键词： 大肠埃希菌 头孢菌素酶 随机引物聚合酶链反应
