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胸腺近期输出功能测定在评价细胞免疫功能重建中的应用
T细胞受体重排删除环(TRECs )是T细胞受体基因重排过程中删除的DNA环,可作为胸腺近期输出功能的指标,本文综述其在造血干细胞移植、HIV-1感染和AIDS患者抗逆转录病毒治疗、肿瘤化疗以及细胞因子补充治疗后免疫重建评价中的应用.
关键词： T细胞受体重排删除环 细胞免疫重建 胸腺输出功能 造血干细胞移植 -
CML中TCRVβ2、Vβ5和Vβ17亚家族sjTRECs的检测情况
目的检测慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血TCR Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs的存在情况,从而了解相应3种Vβ亚家族naive T细胞的近期胸腺输出情况.方法利用半巢式PCR扩增9例CML患者外周血单个核细胞(PBMC)、CD4+细胞和CD8+细胞DNA的Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs,13例正常人外周血作为对照.结果 TCR Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs在部分正常人和1例CML患者CD4+或CD8+细胞可以检测到,而在CML患者PBMC中则未能检测到.结论在CML患者Vβ2-、Vβ5-和Vβ17-Dβ1 sjTRECs检出率低,与其胸腺输出相应的TCR Vβ亚家族naive T细胞水平低下有关.
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胸腺输出功能的评价手段-T细胞受体重排删除环的定量分析
多年来,因缺乏合适的检测胸腺输出naive T细胞的技术,未能明确胸腺输出功能.由于胸腺T细胞的分化始于T细胞受体(TCR)基因的重排,在TCRα基因重排时,通过δRec和ψJα基因片段重组形成染色体外DNA环而删除TCRδ基因,该删除环称为信号结合T细胞受体重排删除环(siTRECS)或TRECs.TRECs十分稳定,不扩增且随着细胞增殖而稀释,故近期研究认为对TRECs的定量检测可以直接地估计胸腺的输出功能.本文综述了TRECs定量分析在评价正常人和造血干细胞移植,血液肿瘤、HIV感染和自身免疫性疾病等等的胸腺输出功能中的作用.
关键词： T细胞受体重排删除环 胸腺输出功能 定量PCR -
重度苯中毒患者胸腺输出近期功能明显低下
本研究目的在于分析重度苯中毒患者外周血单个核细胞中T细胞受体删除DNA环(T-cell receptor excision DNA circle,TREC)的含量,从而了解其初始(naive)T细胞的含量和胸腺近期输出功能.利用实时定量PCR和TaqMan方法检测8例重度苯中毒患者和16例正常人外周血单个核细胞(PBMNC)中TREC的水平.结果显示正常人中TREC含量为:6.69±4.79/1000 PBMNC;而重度苯中毒患者则为1.03±0.44/1000 PBMNC,显著低于正常人TREC水平(P＜0.01),并持续苯中毒的全过程,即使在外周血血象基本恢复正常时,TREC水平仍处于较低状态.结论:重度苯中毒惠者胸腺近期输出功能明显低下,苯中毒明显损伤T细胞免疫功能.
关键词： 苯中毒 T细胞受体删除DNA环 胸腺输出功能 -
慢性粒细胞白血病患者胸腺输出功能与bcr-abl mRNA水平的关系
本研究了解慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)患者体内T细胞受体重排删除环(Tcell receptor rearrangement excision circles,TREC)的含量与bcr-abl mRNA水平的关系,进而明确CML患者的胸腺近期输出功能测定对疾病预后判断的意义.实时定量PCR检测15例CML-CP患者外周血TREC含量及bcr-abl融合基因转录本的水平,并追踪检测6例患者bcr-abl水平的变化.结果发现:在CML初发时患者外周血TREC含量与bcr-abl融合基因水平无明显的相关性;随访2年后,TREC含量高的患者bcr-abl水平下降幅度更大,而在修稿造血干细胞移植的2例患者中,移植前TREC含量相对较高者,移植1年后连续3次均检测不到bcr-abl,另1例则检测到低水平的bcr-abl.结论:CML患者胸腺输出功能较高者,可能对机体抵抗残留CML细胞有一定的帮助.
关键词： 慢性粒细胞白血病 胸腺输出功能 BCR-ABL融合基因 TREC -
粒细胞集落刺激因子对亚致死剂量照射后小鼠胸腺细胞周期及近期输出功能的影响
本研究探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对急性辐射损伤小鼠胸腺细胞的细胞周期、凋亡及近期输出功能的影响.雌性BALB/c小鼠40只,给予6 Gy60C0 γ线1次性全身照射后随机均分为2组.G-CSF组小鼠给予重组人G-CSF 100 μg/(kg·d),皮下注射,连续14天；时照组小鼠给予等体积磷酸盐缓冲液,皮下注射,连续14天.用流式细胞仪检测照后72小时内胸腺细胞的细胞周期及凋亡细胞比例;应用荧光定量PCR方法检测照后30和60天105个胸腺细胞中T细胞受体重排删除环(sjTREC)拷贝数,以判断胸腺细胞输出功能.结果表明,G-CSF在照后6小时即可使胸腺细胞出现G0/G1期阻滞,G-CSF组vs对照组为(82.0±5.0)％ vs (75.9±2.8)％(P＜0.05),S期细胞比例下降,G-CSF组vs对照组为(10.2±4.8)％ vs( 15.7±2.3)％(p＜0.05),但对G2/M期细胞比例影响不大.胸腺细胞受照后6小时即出现明显凋亡,12小时达高峰.G-CSF组在照后6及12小时胸腺细胞凋亡率分别为(11.5±2.4)％和(15.5±3.3)％,而对照组分别为(16.5±2.2)％和(22.6±0.7)％,两时间点统计学差异明显(p＜0.05).荧光定量PCR结果显示,照后30天G-CSF组胸腺细胞sjTREC拷贝数明显高于对照组(p＜0.01),但照后60天两组胸腺细胞sjTREC拷贝数无统计学差异.结论:G-CSF可调节急性辐射损伤后胸腺细胞周期,减少胸腺细胞凋亡,增加胸腺细胞输出功能,促进中枢免疫恢复.
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脓毒症患儿T细胞亚群和sjTREC基因水平的评估
目的 本研究旨在评价脓毒症患儿T细胞亚群和sjTREC基因水平,为其合理的免疫调节治疗提供理论依据.方法 根据感染严重程度将患儿分为脓毒症组(25例)、严重脓毒症组(23例)和正常对照组(50例).在使用血制品、免疫制剂及营养支持前测定各组患儿T细胞亚群.通过实时荧光定量PCR法分别检测各组患儿sjTREC基因水平变化,利用双标准曲线法对sjTREC基因水平进行绝对定量,检测结果用sjTREC与Co内参基因拷贝数比值(sjTREC/Cα×2×1000)表示,结果应用SPSS 16.0软件进行统计学处理.结果 严重脓毒症组患儿CD3+、CD4+和CD8+细胞比例明显低于正常对照组(P＜0.01);严重脓毒症组患儿sjTREC基因水平为173.86±38.37,明显低于脓毒症组(345.15±66.21)和正常对照组(389.42±50.20),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 严重脓毒症患儿存在T细胞亚群数量紊乱和胸腺输出功能下降,故在早期进行细胞免疫支持可能会改善临床预后.
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职业铅接触工人外周血中GATA-3和T-bet基因表达的变化
研究表明,人体内铅蓄积过多会导致机体细胞免疫和体液免疫均受到不同程度的影响[1].我们前期研究也发现,职业铅接触工人胸腺输出功能明显低于健康人[2].辅助型T细胞依其所分泌的细胞因子类型及其功能效应可以分为Th1和Th2两种亚型.在T细胞发育分化的过程中,T-bet和GATA-3的表达水平决定CD4+T细胞向Th1或Th2分化.
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不同接苯时间苯中毒患者胸腺近期输出功能变化
为分析职业性苯中毒工人外周血单个核细胞中T细胞受体删除DNA环(TRECs)的含量,了解苯中毒工人胸腺近期输出功能变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real time PCR)和TaqMan方法检测苯中毒和健康人外周血单个核细胞中TRECs的含量.结果 显示,TRECs含量苯中毒观察对象2.97±1.31、轻度苯中毒1.73±1.11、中度苯中毒2.28±1.44、重度苯中毒1.91±1.95,各组患者每1 000个外周血单个核细胞中TRECs含量均明显低于健康组7.39±6.83(P＜0.05),轻度和重度苯中毒组TRECs含量显著低于苯中毒观察对象组(P＜0.05).重度苯中毒组接苯时间＞3的工人TRECs含量显著低于接苯时间≤3年者,苯中毒观察对象组接苯时间＞5年的工人TRECs含量显著低于≤5年者(P＜0.05).提示苯中毒患者胸腺近期输出功能低下.
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粒细胞集落刺激因子对急性辐射损伤小鼠胸腺输出功能的影响
目的 粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)是急性辐射损伤治疗的首选药物,但其在促进粒系造血恢复的同时能否促进辐射损伤后中枢免疫功能恢复尚不清楚.文中以亚致死量辐射损伤小鼠为研究对象,观察G-CSF对急性辐射损伤后胸腺输出功能的影响.方法 雌性BALB/c小鼠50只给于6.0Gy 60钴一次性全身照射后随机均分为2组.G-CSF组小鼠给予重组人G-CSF 100μg/(kg·d)皮下注射,连续14d;对照组小鼠给予等体积磷酸盐缓冲液(PBS)皮下注射,连续14d.照后30d、60d分别利用流式细胞仪及荧光定量PCR技术检测外周血中初始T淋巴细胞比例以及胸腺细胞中T细胞受体重排删除环(T cell receptor rearrangement excision circles,TRECs)拷贝数,判断胸腺输出功能.结果 照后30d,G-CSF组小鼠外周血中初始T淋巴细胞比例G-CSF组(3.5±0.9)%与对照组(1.3±0.8)%比较差异有显著性统计学意义,P≤0.05;胸腺信号结合T细胞受体删除环(signal joint T cell receptor rearrangement excision circles,sjTRECs)拷贝数G-CSF组(6450±783)均明显高于对照组(3630±595),P＜0.05.但照后60d 2组上述检测指标差异无统计学意义.结论 G-CSF可在急性辐射损伤后早期增加胸腺输出功能,促进中枢免疫重建.
关键词： 重组人粒细胞集落刺激因子 辐射 胸腺输出功能 -
炎症性肠病患者胸腺近期输出功能变化
目的:研究炎症性肠病(IBD)患者外周血T细胞受体删除DNA环(TRECs)的含量,了解IBD患者胸腺近期输出功能变化,探讨其在IBD发病中的意义.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real time PCR)检测20名健康人、15例活动期克罗恩病(CD)患者和22例活动期溃疡性结肠炎(UC)患者外周血T细胞中TRECs的含量.结果:TRECs含量CD患者13.48±10.59、UC患者14.67±11.12,各组患者每1000个外周血T细胞中TRECs含量均明显高于健康组8.32±7.02(P均＜0.05).结论:IBD患者幼稚T细胞的含量显著高于正常人,提示IBD患者胸腺近期输出功能在炎症活动期明显增强.
