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骨膜去细胞生物支架的制备和鉴定
目的 制备兔骨膜去细胞生物支架,为骨缺损、骨不愈的组织工程研究提供天然的生物支架材料.方法 取健康新西兰大白兔,游离双侧胫骨近端内侧骨膜,通过物理冻融(-80℃,24h)、去污剂洗脱(triton-X 100、SDS)和酶消化(DNA酶、RNA酶)获取骨膜去细胞生物支架.通过HE染色、DAPI染色、琼脂糖电泳和基因组DNA定量分析(n=5)测定细胞结构及DNA成分残留;Masson染色和羟脯氨酸测定法(n=6)定性定量检测骨膜细胞外基质的主要成分(胶原)的保留情况;扫描电子显微镜下观察骨膜去细胞生物支架的表面微结构;CCK8法检测支架浸提液毒性;皮下包埋实验(n=4)观察该支架的免疫排斥反应.结果 HE染色和4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色表明去细胞支架无残留细胞;琼脂糖电泳未见明显DNA条带;DNA定量检测显示组织去细胞率达95％以上;Masson染色及羟脯氨酸测定表明去细胞支架胶原成分被保留;扫描电子显微镜下细胞外基质呈现三维网状疏松结构;不同体积分数的浸提液对骨膜细胞的增殖与对照组(普通培养基)比较无明显抑制作用(P＞0.05);异体皮下包埋实验显示,该去细胞支架免疫排斥反应不明显.结论 运用物理冻融、去污剂洗脱和酶消化等方法所获取的骨膜去细胞生物支架细胞去除彻底,细胞外基质的结构及主要成分保留完好,生物相容性良好.
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不同方法处理牛心包的体外力学和抗钙化性能评价
比较传统GA法(A组)、三氯化铝与乙醇联合处理法(B组)、多聚环氧化物处理法(c组)和光氧化法(D组)四种不同方法处理牛心包后力学与抗钙化性能.对新鲜牛心包随机分为四组,用四种方法处理后,测定组织的极限抗拉强度、断裂伸长率、热皱缩温度,比较其力学性能;建立大鼠皮下植入模型,包埋2月后取出标本测定组织钙含量,并做HE染色及von Kossa染色.极限抗拉强度:B组>A组=C组>D组;断裂伸长率:C组=D组>B组>A组;热皱缩温度:A组=B组>C组>D组;钙含量测定:A组>>C组>B组>D组(P<0.05);HE染色和vonKossa染色结果符合以上测定值.三氯化铝与乙醇联合处理组的组织交联程度与力学强度佳,光氧化处理组与多聚环氧化物(简称PC)处理组的组织柔韧性更好.在抗钙化性能方面,光氧化处理组好,三氯化铝与乙醇联合处理组与多聚环氧化物处理组次之,GA处理组差.
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自体疣皮下包埋联合薄芝糖肽治疗扁平疣疗效观察
扁平疣主要侵犯青少年,好发于颜面部,影响美观,病程长,临床疗效常不理想.近年来我们采用自体疣皮下包埋联合薄芝糖肽治疗扁平疣,取得较好疗效,现报告如下.
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松果体用于治疗晚期癌症的初步研究
松果体是一个内分泌器官,从圆口类到哺乳类,除少数例外,其他都有松果体,但在形态和重量上都存在着很大的差别.本文采用整颗皮下包埋和提取做成针剂后肌肉注射的方法,主要研究了猪松果体对晚期癌症病人疼痛的治疗.
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自体疣包埋治疗泛发性顽固性病毒疣疗效观察
观察自体疣体包埋术治疗皮肤疣的临床效果及安全性。方法对36例皮肤疣患者施行自身疣体包埋术，术后观察3个月。结果痊愈50.0%，显效14.8%，有效17.9%，总有效率为82.7%。在各类型皮肤疣中扁平疣的疗效好。不良反应发生率和复发率分别为2.7%和5.6%。结论自身疣体包埋术治疗皮肤疣特别是扁平疣的临床效果好，安全性高，且不易复发。
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去表皮化加皮下包埋原位再植治疗指尖离断指
目的：探讨去表皮化加皮下包埋原位再植治疗手指末节指尖离断伤的效果。方法2009年1月-2012年12月26例30指末节完全离断指，经拔甲、内固定、去表皮浅层后，分别埋入同侧手掌、胸部、腹部皮下，16 d~20 d将离断指从皮下取出。结果26例30指完全成活，再植指尖感觉及外观满意。结论皮下包埋治疗末节离断指的方法简单实用，疗效优异，特别适用于无法吻接血管的末节离断。
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大黄素－BSA包被膜片人工抗原制备及其免疫原性与特异性检测
目的：通过大黄素－BSA包被膜片的免疫原性及特异性研究，探讨半抗原－载体包被膜片人工抗原制备法的可行性。方法：先将BSA包被于PVDF膜片，再与大黄素－偶联剂衍生物偶联，制备大黄素－BSA包被膜片，经膜片皮下包埋法免疫大鼠，用大黄素或大黄酚、大黄素甲醚包被CA膜片免疫分析法检测免疫原性和特异性。结果：大黄素－BSA包被膜片的免疫原性高于或等于液相抗原；其抗血清对三种蒽醌类化合物反应的特异性基本一致（ P＞0．05）。结论：大黄素－BSA包被膜片抗原，具有良好免疫原性和特异性，提示用半抗原－载体包被膜片法制备人工抗原可行。
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皮下包埋二期重建指腹治疗甲根部断指
目的 总结皮下包埋二期重建指腹治疗甲根部断指的疗效.方法 2009年8月- 2011年6月,收治10例12指甲根部离断伤患者.男6例,女4例;年龄18～34岁,平均25岁.损伤指别:拇指1例,示指2例,中指5例,环指3例,小指1例.断指按Ishikawa等分区标准均为Ⅱ区.末节掌侧缺损范围1.5cm× 1.0cm～2.5cm×2.0 cm.伤后至手术时间2～10h,平均3.7 h.采用腹部皮下包埋回植的指骨及甲床,二期带神经的指动脉皮瓣重建指腹方法治疗,皮瓣切取范围1.8 cm×1.2 cm～3.0 cm×2.5 cm.结果 术后皮瓣均顺利成活.9例伤口Ⅰ期愈合;1例远端甲床部分坏死出现骨外露,行残端修整术后愈合.患者均获随访,随访时间6～24个月,平均12个月.患指长度与健侧接近,指甲生长平整,指腹饱满,质地柔软,弹性良好.皮瓣两点辨别觉6～9mm,平均7.5 mm.术后复查X线片示回植指骨密度与健指接近,骨折愈合时间1～2.5个月,平均1.8个月,手指各关节活动正常.术后6个月手指功能按照中华医学会手外科学会上肢部分功能评定试用标准,获优5例,良4例,可1例.结论 应用皮下包埋回植指骨及甲床,二期重建指腹的方法修复断指,为无再植条件的甲根部离断伤提供了一种新的修复方法.
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不同时段异体神经片段皮下包埋对周围神经再生影响的实验研究
目的 探讨异体神经片段经皮下包埋不同时段后对周围神经再生的影响.方法 Wistar大鼠55只,雌雄不限,随机分为5组,A、B、C组(实验组)和D组(对照组)每组各10只,E组(供体组)15只.E组动物在出骨盆口以远5 mm处切断双侧坐骨神经,向远端游离约15 mm,切断作为移植物.A、B、C组动物均行左侧大腿切口,皮下钝性分离,埋入供体神经片段.术后1周(A组)、2周(B组)、3周(C组)显露右侧坐骨神经,距骨盆出口约5 mm处切断,向远端游离约10 mm再切断,取出对侧包埋的神经片段,修剪远近端保留长度约10 mm,移植于右侧神经缺损处.D组显露右侧坐骨神经后,在距骨盆出口约5 mm处切断,向远端游离约10 mm后再切断,原位缝合.术后2、4、6、8、10及12周监测坐骨神经功能指数(sciatic functional index,SFI),术后12周行电生理检查测试运动神经诱发电位的传导速度及潜伏期,组织学检测移植神经再生轴突数目和面积,以及移植神经的超微结构变化. 结果 术后各组SFI逐渐下降,12周时A组和D组的SFI小,两组间差异无统计学意义,但分别与B组和C组比较差异有统计学意义(P＜0.05).术后12周A组和D组再生大量有髓神经纤维及少量无髓神经纤维,再生神经的数量和结构与正常神经相似,图像分析显示两组间无明显差别,与B组和C组比较差异有统计学意义(P＜0.05).A组和D组的运动神经传导速度及潜伏期结果无差异,优于B组和C组,且差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 异体神经片断皮下包埋后有促进周围神经再生的作用,皮下包埋1周组促神经再生作用优于皮下包埋2、3周组.
