首页 > 文献资料
-
胚胎小鼠纹状体神经干细胞的体外培养和分化
目的:探索胚胎小鼠纹状体神经干细胞(striatum-neural stem cells,strNSC)的体外培养和分化鉴定方法.方法:无菌条件下分离E15天胚胎小鼠纹状体,制成单细胞悬液,在bFGF和B27存在的培养基中培养扩增,通过免疫细胞化学显色鉴定神经干细胞及其子代细胞的分化方向.结果:培养的部分细胞在B27和bFGF存在的无血清培养基中可以在体外分裂增殖,同时表达神经干细胞特异性抗原nestin,并在撤出B27和bFGF的有血清培养基中向神经细胞和神经胶质细胞分化.结论:胚胎小鼠纹状体存在具有多分化潜能的神经干细胞,它们能在体外培养、传代和自然分化.
-
兔角膜缘干细胞体外无血清培养及生物学特性初步研究
目的 探讨兔角膜缘干细胞体外无血清培养方法及生物学特性并与传统的10％血清培养方法进行比较.方法 获取兔角膜缘组织,酶消化法制成单细胞悬液,分含B27的无血清组和传统方法的10％血清组两组进行培养,观察两组细胞的生长情况,CCK-8检测其克隆增殖能力,细胞免疫化学染色方法对两组细胞进行鉴定.结果 较传统10％血清培养组,无血清培养组培养的兔角膜缘干细胞表现出相似的生长特性及增殖能力,细胞免疫化学染色无血清组⊿ Np63阳性细胞较10％血清组明显多,角蛋白K3(AE5)阳性细胞10％血清组较多.结论 用含B27的无血清培养基可以培养获得角膜缘干细胞,减少了血清中不明成分对干细胞的影响,为角膜缘干细胞的体外培养、扩增及纯化提供了新的选择.
-
强直性脊柱炎发病机制与治疗的研究进展
强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)在我国发病率约为0.3%[1].20世纪70年代,Brewerton和Schlosstein发现AS患者发病与人类白细胞抗原B27(HLA-B27)密切相关.近30年来研究发现细菌感染、自身免疫等都是AS发病的重要因素.目前AS尚无特殊治疗方法,大量AS发病机制研究推动了其治疗的发展,对减少患者致残率,提高患者生活质量具有重要意义.笔者对AS发病机制及治疗的新研究进展进行综述.
-
一种简便的皮层神经元原代培养方法的建立及其培养结果分析
目的：建立一种简便的皮层神经元原代培养方法，并鉴定其培养效果。方法取出生24 h内的SD大鼠大脑皮层组织，采用胰酶消化法获取神经元细胞悬液，用10％ FBS＋DMEM高糖培养基接种在经多聚赖氨酸包被的培养板中，4 h后全量换用Neurobasal＋2％B27＋0．5 mmol／L谷氨酰胺培养液。培养后采用倒置相差显微镜观察神经元形态变化，连续观察8天。神经元培养7～8天进行免疫荧光染色，于激光共聚焦显微镜下对神经元进行鉴定，计算神经元密度和纯度。结果皮层神经元接种时体积小，透亮，呈圆形，单个散在分布。接种后有少量细胞开始贴壁，2 h左右贴壁较多，少量细胞伸出短小的突起；4 h左右已基本贴壁，大量细胞伸出突起，周围光晕明显；培养3天时神经元突起明显伸长，相互交织，细胞透亮，立体感强，呈圆形、椭圆形、梭形；培养5～6天时神经元体积增大，突起交织成网状；培养7～8天时，神经元细胞体饱满，细胞质透亮，细胞核大而明显，细胞体周围折光性强，立体感好，突起交织成致密的网络结构。经免疫荧光染色后鉴定，分离培养的是神经元，密度1．5×106个／mL，纯度＞90％。结论成功建立了一种操作简便的皮层神经元培养方法，该方法培养的神经元纯度高、密度大，可为今后的相关学科研究提供良好的细胞模型。
