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移植胚鼠神经干细胞对大鼠脊髓损伤后红核神经元损伤的影响
目的 研究神经下细胞(NSCs)移植对大鼠脊髓损伤(SCI)后红核神经元的作用.方法 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)法标记处于对数生长期的NSCs,采用电控脊髓损伤打击装置制作大鼠脊髓损伤模型.实验分为3组:NSCs组、SCI组和假手术组(Sham组).SCI后3 d进行NSCs移植,用免疫组化法观察移植细胞的存活及迁移情况,用辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪技术标记红核神经元,并用四甲基联苯胺(TMB)呈色反应显示红核脊髓束神经元的存活情况,用行为学(BBB)评分法观察大鼠瘫痪肢体的恢复情况.结果 在损伤脊髓区域可检测到BrdU标记的阳性NSCs,中脑HRP标记红核神经元数目明显多于SCI组(P<0.01),BBB评分亦明显高于SCI组(P<0.01).结论 体外培养的胚胎大鼠NSCs在移植到脊髓损伤区域后可存活和迁移,对SCI后巾脑红核神经元具有保护作用,从而促进了大鼠肢体功能的恢复.
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电针对中度脊髓损伤大鼠模型运动功能和红核神经元的影响
目的从行为学和红核神经元数目等角度来探讨电针对脊髓损伤后神经组织保护作用的机理.方法应用ALLEN's 致伤法制成大鼠T12中度脊髓损伤模型,设立电针组进行治疗,并同时设立正常组、假手术组、单纯针刺组和造模组作为对照;应用斜板实验对不同组的大鼠在造模后12 h、1星期和4星期作行为学评分,4星期时,利用HRP逆行示踪技术,计数各组每个大鼠红核神经元数目.结果在脊髓损伤后12 h和1星期,电针组大鼠与单纯针刺组和造模组大鼠相比,在斜板实验方面无明显差异,在脊髓损伤后4星期,电针组大鼠在斜板实验方面明显高于单纯针刺组和造模组大鼠,在斜板实验方面,假手术组与正常组只在伤后12 h有差别,在伤后1星期和4星期,两组无明显差别.同时,在脊髓损伤后4星期,电针组大鼠的红核神经元数目明显高于单纯针刺组和造模组大鼠的红核神经元数目.结论电针治疗能促进大鼠后肢功能的恢复,提高其行为学评分,并能减轻红核神经元的逆行性损伤.
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CNTF对大鼠脊髓损伤后逆行性红核神经元损伤的保护作用
目的:研究睫状神经营养因子(CNTF)对脊髓损伤后逆行性红核神经元损伤的保护作用和促进肢体功能恢复的作用.方法:将大鼠分为假手术组、生理盐水(NS)组和CNTF组,用Allen改良法撞击致SD大鼠脊髓T10损伤,经蛛网膜下腔留置导管注射NS和CNTF;术后每周进行一次BBB评分和斜板试验的行为学评分;6周时采用辣根过氧化物酶 (HRP)逆行示踪技术标记红核神经元,取红核部位脑组织作冰冻切片,应用四甲基联苯胺(TMB)呈色反应显示脊髓损伤后红核神经元存活率,并进行图像数据的分析.结果:(1)CNTF组行为功能评分高于NS组;(2)CNTF组HRP标记红核神经元数目多于对照组.结论:CNTF可减轻脊髓损伤后的逆行性损伤,而对上行运动神经元发挥保护作用,从而对肢体功能的恢复起到促进作用.
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黄芪注射液对大鼠红核神经元逆行溃变的影响
目的 探讨黄芪注射液对大鼠红核神经元逆行溃变的影响.方法 将48只SD大鼠随机分为4组:正常组、假手术组、实验组和模型对照组,每组12只.假手术组在脊髓C3、C4之间切开黄韧带.实验组和模型对照组在脊髓C3、C4之间外侧索横断损伤红核脊髓束,随后分别以黄芪注射液和生理盐水进行腹腔注射.4周后,各组取6只大鼠将轴突示踪剂生物素葡聚糖胺(BDA)注入红核进行顺行示踪,检测轴浆顺行运输能力;另外6只大鼠行尼氏染色显示红核神经元形态及数目.结果 实验组和模型对照组被BDA标记轴突的相对面积及数目低于正常组或假手术组(均P＜0.01),实验组被BDA标记轴突的相对面积及数目明显高于模型对照组(均P＜0.01);实验组和模型对照组存活的红核神经元数目和平均截面积均低于正常组或假手术组(均P＜0.01),实验组的红核神经元数目和平均截面积均高于模型对照组(均P＜0.01).结论 黄芪注射液可通过改善轴浆运输能力,提高胞体的存活率,从而对逆行溃变的红核神经元具有保护作用.
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BDNF基因修饰神经干细胞移植对脊髓损伤后红核神经元作用的实验研究
将20只SD大鼠随机分为假手术组、脊髓损伤组(SCI组),神经干细胞(NSC)组(NSC组)及脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰NSC组(BDNF组)各5只.假手术组仅行椎板切开术;余三组采用电控脊髓损伤打击装置致脊髓损伤模型,术后3 d SCI组脊髓内注射生理盐水溶液5μl;NSC组注射NSC悬液5 μl,BDNF组注射NSC-BDNF悬液5μl.术后观察各组行为学(BBB)评分和红核神经元存活情况.结果BDNF组BBB评分显著高于SCI组、NSC组,红核神经元数目均多于SCI组、NSC组(P均＜0.01).提示BDNF基因修饰NSC移植对脊髓损伤后红核神经元有保护作用.
