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程序降温法用于同种瓣膜的制备
目的研究同种瓣膜的制备方法,减轻制备过程中的细胞损伤.方法记录程序降温过程组织细胞的降温曲线,比较不同方法的组织细胞损伤.结果对照组在-4℃～-6℃区域,出现明显的降温速率减缓,甚至小幅度温度回升过程.实验组保持均匀的降温速率.实验组组织细胞的损伤程度较对照组明显减轻.结论同种瓣膜的降温过程中存在相变点的异常温度变化,通过调控不同的降温速率可以减轻降温过程本身对组织细胞的损伤.
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海藻糖对液氮深低温保存的同种瓣caspase-3表达的影响
目的 探讨海藻糖作为深低温冷冻保护剂对液氮保存的同种带瓣大动脉组织细胞caspase-3表达的影响.方法 在液氮中冻存时间点分为12、15、18个月,依据冻存液不同分为5组,分别是:0.1 mol/L DMSO(对照组),0.1 mol/L海藻糖(实验组1),0.1 mol/L海藻糖+0.1 mol/L DMSO (实验组2),0.2mol/L海藻糖+0.1 mol/LDMSO(实验组3),0.3 moL/L海藻糖+0.1 mol/L DMSO(实验组4).采用RT-PCR和Western Blot方法分别测定caspase-3的相对表达量.新鲜组作为阴性对照.结果 在每个时间点下(P<0.05),细胞凋亡轻的是新鲜组,较好的是实验组2和实验组3,其次依次为实验组4、实验组1,凋亡严重的是对照组.结论 海藻糖和DMSO的联合运用能够很好的抑制caspase-3的表达.0.1 mol/L海藻糖+0.1 mol/LDMSO和0.2mol/L海藻糖+0.1 mol/L DMSO 能大限度的抑制caspase-3的表达.
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液氮冷冻保存同种瓣膜临床使用现状
同种瓣膜在心脏外科使用越来越频繁,被用于右心室和左心室流出道重建,也被用于三尖瓣、二尖瓣替换.但是同种主动脉用于肺动脉瓣替换和同种肺动脉用于高压动脉血管替换的耐久性较差.其优点为优良的血流动力学特性,无需抗凝治疗和血栓栓塞并发症发生率低.但取材限制和远期狭窄问题使其使用受到限制.同种瓣膜的进行性狭窄被认为与低水平的免疫反应有关.
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海藻糖保护同种带瓣大动脉的适浓度
背景:目前液氮低温保护组织和器官技术已经非常成熟,其保护剂一直以来争论不一.目的:观察不同冷冻保护剂对液氮深低温冻存同种带瓣大动脉组织细胞凋亡和代谢的影响,求佳的冷冻保护剂及冷冻保护剂的适浓度.方法:取新西兰大白兔带瓣主动脉、肺动脉标本,其在液氮中冻存12,5,8个月,存液分别使用0.1 mol/L二甲基亚砜,.1 mol/L海藻糖,.1 mol/L海藻糖+0.1 mol/L二甲基亚砜,.2 mol/L海藻糖+0.1 mol/L二甲基亚砜,.3 mol/L海藻糖+0.1 mol/L二甲基亚砜.标本复温后,疫组织化学方法检测标本的细胞凋亡情况,萄糖消耗量测定法检测组织细胞的代谢水平.结果与结论:免疫组织化学和葡萄糖消耗量测定结果均显示经0.1 mol/L海藻糖+0.1 mol/L二甲基亚砜,.2 mol/L海藻糖+ 0.1 mol/L二甲基亚砜冻存液处理的标本冻存效果好,次是经0.3 mol/L海藻糖+0.1 mol/L二甲基亚砜处理和经0.1 mol/L海藻糖单独处理的标本,独使用0.1 mol/L二甲基亚砜处理的标本冻存效果差.说明海藻糖对液氮深低温保存同种带瓣大动脉活性有很好的保护作用,独使用海藻糖优于单独使用二甲基亚砜,合应用海藻糖和二甲基亚砜效果更好,联合应用的海藻糖佳浓度范围是0.10～0.20 mol/L.
