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三色流式细胞术在检测人外周血CD4+CD25+CD62L+调节性T细胞的应用
随着流式细胞术(FCM)在淋巴细胞亚群分析及免疫状态分型技术领域的应用日益成熟,多参数FCM分析,已能区分不同的细胞亚群,由间接免疫荧光标记法,过渡到采用直接免疫荧光标记且从单色荧光发展到双色及多色荧光标记.
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重症肌无力患者胸腺细胞及外周血淋巴细胞Fas表达研究
目的探讨重症肌无力(MG)的发病机制.方法采用流式细胞术(FCM)分别检测MG患者胸腺细胞、外周血淋巴细胞(PBL)及地塞米松培养胸腺细胞的Fas表达.结果MG患者PBL CD4、CD8细胞Fas表达率(分别为49%,34%;39%,34%)与对照组(分别为58%,25%;49%,24%)相比差异无显著性;MG患者胸腺细胞Fas表达率(11.20%,6.13%)较对照组(6.15%,1.84%)明显增高;地塞米松培养组Fas表达率MG组、正常人组分别为11.54%、8.62%和7.08%、3.13%,与空白对照组(MG组、正常人组分别为11.36%、6.87%和7.22%、2.86%)相比差异无显著性.结论MG患者PBL CD4、CD8细胞Fas表达率无明显增高,可能与自身反应淋巴细胞Fas和PBL FasL结合,发生程序化死亡有关.MG患者胸腺细胞Fas表达增高,可能参与MG发病机制.
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31例急性淋巴细胞白血病免疫分型的特点及与形态学分型的比较
目的:探讨急性淋巴细胞白血病的CD45设门三色流式细胞术免疫分型特征与诊断价值.方法:采用流式细胞术三色免疫荧光直接标记技术检测白血病患者,根据抗体积分系统进行分型.结果:三染色标记法检测24例B细胞系列急性淋巴细胞白血病(B-ALL)高敏感性和高特异性抗原分别为CD19(100%)和CyCD79 a(95.83%);7例T细胞系列急性淋巴细胞白血病(T-ALL)高敏感性和高特异性抗原分别为CD7(100%)和CyCD3(100%);CD10(85%),HLA-DR(73%),CD34(62%)等非系列相关性早期分化抗原在急性B淋巴细胞白血病均有较高的表达频率.31例急性淋巴细胞白血病患者中,急性淋巴细胞白血病(ALL)患者除均表达淋系抗原外,同时有64.52%伴髓系抗原(CD13,CD33)的表达.结论:流式细胞仪三色免疫荧光直接标记法进行白血病免疫分型能区分T-ALL、B-ALL,并可与急性髓性白血病相区别,尤其急性髓性白血病(M1和M5).
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141例白血病三色流式细胞术免疫分型研究
白血病是常见的恶性肿瘤之一,其分型80年代以前主要是依靠形态学,自单克隆抗体与流式细胞术联合应用以来,使诊断白血病的准确率提高到90%以上,从而为临床合理治疗、判断预后提供了重要的科学依据.为了克服流式细胞术单参数免疫标记测定易将正常细胞包括在内从而影响结果分析的不足,我们采用以CD45和侧向角散射(side scatter,SSC)双参数散点图设门,应用三色流式细胞术对141例白血病患者进行免疫分型研究,现将结果报道如下.
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2型糖尿病患者外周血Th1/Th2淋巴细胞的检测及临床意义
Th1细胞和Th2细胞是CD4+T辅助细胞的两个不同亚群,Th1、Th2细胞的失衡与疾病的发生、发展、预后密切相关[1]。本研究运用三色流式细胞术测定不同糖尿病患者及正常人外周血Th1、Th2细胞数,以探讨其可能的临床价值。
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三色流式细胞术在小鼠外周血微核检测中的验证
采用不同作用机制的遗传毒性阳性药和阴性药对三色流式细胞术(FCM)检测小鼠外周血微核(MN)进行方法验证,并与常规人工镜检方法对比.每组10只雄性ICR小鼠,分别单次给予溶剂对照(生理盐水或0.5%羧甲纤维素钠)、苯并芘(BaP)、氟尿嘧啶(5-FU)、甲氨蝶呤(MTX)、丝裂霉素C(MMC)、甲磺酸甲酯(MMS)、秋水仙素(Col)、硫酸长春新碱(Vinc)、新化合物A或新化合物B,检测各组小鼠外周血中20 000个网织红细胞(RET)的MN数,同时采用常规显微镜计数各组小鼠骨髓中2 000个嗜多染红细胞(PCE)的MN数.FCM检测的外周血中MN-RET百分率与常规显微镜观察的骨髓中MN-PCE百分率有良好的相关性(r=0.913).FCM小鼠外周血微核法是一种灵敏、快速、客观的自动化微核检测法,可以作为常规显微镜小鼠骨髓阅片法的替代方法.
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三色流式细胞术在检测人胸腺细胞表面抗原中的应用研究
目的比较三色流式细胞术检测细胞表面抗原几种设门方法的异同.方法采用较为先进的流式细胞检测技术,选用不同设门方法对人胸腺细胞CD4、CD8及Fas抗原进行检测.结果两次设门分析结果要比一次设门更精确;计数尽可能多的细胞可以提高结果的准确性.结论研究者可根据需要选择合适的设门方式.