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益肾化浊方对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马神经元突触关键蛋白CREB的影响
目的 观察益肾化浊方对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马神经元突触关键蛋白环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的影响. 方法 取30只12月龄快速老化小鼠(SAMP8),随机分为SAMP8组、盐酸多奈哌齐组及益肾化浊方组,另取10只正常老化小鼠(SAMR1)作为对照组.其中SAMR1组及SAMP8组不干预,益肾化浊方组给予益肾化浊方生药9.62 mg/kg,盐酸多奈哌齐组给予盐酸多奈哌齐0.01 mg/g,通过Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;通过电镜观察各组小鼠海马神经元突触微观形态学变化;采用Western blot法检测各组小鼠海马组织CREB蛋白的表达.结果 在定位航行实验中,SAMP8组小鼠的潜伏时间与游泳总路程比SAMR1组明显延长(P＜0.05),与SAMP8组小鼠比较,益肾化浊方组小鼠潜伏时间与游泳总路程明显缩短(P＜0.05);空间探索实验中,与SAMR1组比较,SAMP8组小鼠穿越目标象限次数与t/t总明显减少(P＜0.05),益肾化浊方组穿越目标象限次数和t/t总较SAMP8组显著增加(P＜0.05),而盐酸多奈哌齐组穿越目标象限次数较SAMP8组显著增加(P＜0.05).电镜下SAMR1组小鼠海马神经元突触间隙清晰,突触前线粒体嵴和膜完整,突触小泡数量正常,大小均一.而SAMP8组突触间隙完全融合、模糊不清,突触前重度水肿,未见线粒体,突触小泡数量大量减少,大小不均一,益肾化浊方组突触间隙少部分融合,突触前水肿程度减轻,对于突触损伤的缓解程度优于盐酸多奈哌齐组.与SAMR1组比较,SAMP8组小鼠海马组织CREB表达明显减少(P＜0.05),益肾化浊方组与盐酸多奈哌齐组可上调CREB的表达(P＜0.05). 结论 益肾化浊方可明显改善SAMP8小鼠学习记忆能力,可能与上调海马组织内CREB蛋白的表达,保护海马神经元突触微观形态,进而改善神经元突触功能有关.
关键词： 益肾化浊方 SAMP8鼠 神经元 突触 环磷腺苷效应元件结合蛋白 -
补肾中药有效成分对SAMP8小鼠海马APP及PS1基因表达的影响
[目的]观察补肾中药有效成分淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸对6月龄SAMP8小鼠淀粉样前体蛋白(APP)及早老素-1(PS1)基因表达的作用,为补肾中药防治老年性痴呆提供实验依据.[方法]选择6月龄健康雄性SMAP8小鼠40只,随机分为模型组、淫羊藿苷组、补骨脂素组、齐墩果酸组,每组10只.另取10只SAMR1小鼠作为对照组.治疗组分别给予淫羊藿苷、补骨脂素、齐墩果酸灌胃治疗(浓度为淫羊藿苷20 mg/kg,齐墩果酸、补骨脂素各50 mg/kg),每日1次,每次0.3 mL,连续灌胃4周.对照组与模型组均给予等量生理盐水灌胃.4周后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测海马组织PS1基因表达.[结果]1)与对照组相比,淫羊藿苷组、齐墩果酸组及补骨脂素组对APP基因下调均具有统计学意义(P＜0.05).2)与对照组相比,补骨脂素组有下调小鼠海马组织PS1基因的趋势,淫羊藿苷组及齐墩果酸组对PS1基因下调具有统计学意义(P＜0.05).[结论]补肾中药可能通过下调APP及PS1基因的表达,进而达到治疗老年性痴呆作用.
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长期口服天麻素对SAMP8鼠记忆力及额叶Sst表达的影响
目的:研究长期口服天麻素对SAMP8鼠记忆力的影响及与额叶Sst表达水平的关系.方法:将4月龄雄性SAMP8鼠20只随机分成2组:天麻素治疗组和对照组.治疗组每只鼠平均每日饮10 ml含60μg/ml天麻素的蒸馏水,对照组每日仅饮用蒸馏水,直至12月龄.然后,观察两组鼠皮毛、眼睑、运动等基本情况;并通过passive-avoidance-test实验检测两组鼠对疼痛刺激的短期记忆力;同时用QRT-PCR(quantitative real time polymerasechain reaction)和Western Blot分别检测两组鼠额叶生长抑素(somatostatin,Sst)的转录水平和表达水平.结果:天麻素治疗组小鼠的毛发光泽好、眼睑无炎症、较活跃,而对照组小鼠脱毛明显、部分小鼠眼睑有炎症、运动少;Passive-avoidance-test实验中天麻素治疗组小鼠明室停留时间及进入暗室小鼠的比例与对照组相比具有显著性差别;QRT-PCR结果显示,天麻素治疗组小鼠额叶中Sst转录水平较对照组升高,二者比较差别具有显著性;WesternBlot结果显示,天麻素治疗组小鼠额叶中Sst表达水平较对照组明显升高.结论:天麻素治疗可能通过增进额叶Sst的转录和表达水平以改善SAMP8鼠的学习记忆能力.
关键词： 天麻素 SAMP8鼠 SST 实时定量PCR Western blot
