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中药双黄补对人牙周膜细胞在玉米醇溶蛋白支架材料上黏附生长及增殖的影响
目的 研究中药双黄补对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)在玉米醇溶蛋白(Zein)支架材料上黏附生长及增殖的影响,探讨双黄补-Zein作为一种复合支架材料应用于牙周组织工程的可行性.方法 采用组织块法体外培养HPDLCs,水提醇沉法制备双黄补煎液,溶剂浇铸/粒子沥滤法制备Zein支架,制备Zein支架浸提液并用其配制50、100、150、200、500、1 000 μg/mL浓度的双黄补培养液.分别设不同浓度双黄补组、Zein支架浸提液组及细胞对照组.MTT法检测各组对HPDLCs增殖的影响;根据MTT检测结果,选取佳浓度(100 μg/mL)双黄补作为实验组,10% FBS的DMEM培养液作为对照组,倒置相差显微镜及扫描电镜观察双黄补对HPDLCs在Zein支架材料上细胞形态的影响.结果 与Zein支架浸提液组及细胞对照组比较,不同浓度双黄补均能促进HPDLCs的增殖,且以100 μg/mL浓度的双黄补促增殖作用明显(P<0.01);Zein支架浸提液组与细胞对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但其细胞增殖率为正值;形态学观察结果显示HPDLCs在Zein支架上生长良好,且在双黄补作用下Zein支架上的HPDLCs数目较多,形态较好.结论 双黄补能促进HPDLCs在Zein支架上的黏附生长及增殖.双黄补-Zein作为一种复合支架材料应用于牙周组织工程具有可行性.
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体外培养牙周膜细胞增殖分化与中药双黄补水提液的调控效应
背景:牙周组织的修复再生取决于牙周膜细胞的数量和增殖分化能力.牙周膜细胞具有多向的分化潜能,可分化成成牙骨质细胞、成骨细胞和成纤维细胞,形成牙骨质、牙槽骨和牙周膜,实现牙周组织再生.目的:观察体外培养人牙周膜细胞增殖和分化过程中传统中药双黄补水提液对其功能的影响.设计:观察性实验.单位:无锡市第三人民医院中心实验室.材料:牙周膜组织(由健康青少年患者因矫正畸形门诊就诊时自愿提供);黄连、黄岑、骨碎补(中国药品检定所提供).方法:实验于2003-07/10在无锡市第三人民医院中心实验室完成.分别将粉碎的黄连、黄岑.骨碎补和蒸馏水1:10(m:V)混合,沸水回流5 h.收集提取液,粗滤后残渣再次沸水回流3 h.合并2次提取液,旋转蒸发浓缩,所得中药水提液浓度为3 kg/L.分黄连组、黄芩组、骨碎补组、黄连加黄岑组、黄连加骨碎补组、黄岑加骨碎补组、双黄补组和对照组8组进行实验.通过体外培养人牙周膜细胞,应用双黄补提取液作为辅助因子,采用MTT比色法测定细胞增殖情况,羟脯氨酸法测定胶原蛋白占总蛋白比值.主要观察指标:牙周膜细胞增殖的吸光度值及胶原蛋白占总蛋白的比值.结果:①牙周膜细胞增殖的测定结果:除黄连组外其他各组均明显促进人牙周膜细胞增殖,与对照组比较,差异明显(P＜0.05).双黄补组细胞的吸光度值增大为明显.随着作用时间的延长,细胞的吸光度值逐渐增大,在第5天达到大.不同时间各组间比较,差异有显著性意义(P＜0.05).②各组牙周膜细胞胶原蛋白占总蛋白的比值:除黄连组外其他各组均明显促进比值增大,与对照组比较,差异明显(P＜0.05).双黄补组比值增大为明显.随着作用时间的延长,比值逐渐增大,在第5天达到大.不同时间各组间比较.差异有显著性意义(P＜0.05).结论:双黄补水提液可明显促进人牙周膜细胞增殖,明显提高胶原蛋白在总蛋白中的比值,可作为人牙周膜细胞增殖的理想的中药辅助因子.
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中药双黄补联合西帕依固龈液对种植体周围炎患者牙周炎症的改善作用及其临床意义
目的:研究中药双黄补联合西帕依固龈液对种植体周围炎患者牙周指数的影响,探讨中药双黄补联合西帕依固龈液治疗种植体周围炎的疗效.方法:将40例种植体周围炎患者随机分为对照组和中药组(n=20).在对种植体进行龈上洁治、龈下刮治后,中药组患者采用西帕依固龈液冲洗种植周袋,同时以精细探针顺种植周袋壁缓慢插入至袋底,留置中药双黄补,缓慢后退探针使药物溢出至牙龈边缘;对照组患者采用3%双氧水、0.9%氯化钠注射液交替冲洗牙周袋,观察2组患者种植体治疗前后改良菌斑指数(mPLI)、牙周袋深度(PPD)和改良龈沟出血指数(mSBI).采用Whatman 1号滤纸条吸取治疗前后种植体周龈沟液(PISF),检测2组患者PISF质量;采用ELISA法检测PISF中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)水平.结果:治疗前2组患者年龄构成、性别比例、受试牙位牙周指数、PISF质量和PISF中IL-1β水平比较差异无统计学意义(P>0.05).经不同治疗措施干预后,2组种植体周围炎患者牙周指数(PPD、mSBI和mPLI)、PISF质量以及PISF中IL-1β水平比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,与对照组比较,中药组患者mSBI、mPLI、PISF质量和PISF中IL-1β水平比较差异有统计学意义(P<0.05);中药组患者PPD低于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:中药双黄补联合西帕依固龈液治疗种植体周围炎的疗效显著,可改善患者牙周指数,降低患者PISF中IL-1β水平.
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双黄补对牙周病中牙周膜细胞的增殖分化的调控
目的:探讨中药双黄补对体外培养的人牙周膜细胞(PDLC)增殖和分化的影响.方法:通过体外培养人PDLC,应用双黄补提取液作为辅助因子分成8组:A.黄连;B.黄芩;C.骨碎补;D.黄连加黄岑;E.黄连加骨碎补;F.黄岑加骨碎补;G.黄连、黄芩、骨碎补;H.对照组.采用MTT比色法测定细胞增殖情况,羟脯氨酸法测定胶原蛋白比值.结果:各组药物提取液均有促进PDLC增殖和提高胶原蛋白比值的作用,与对照组比较,差异有显著性,其中以双黄补组的效果明显.不同孵育时间培养中以第5天的作用强.结论:双黄补水提液可明显促进人PDLC增殖,明显提高胶原蛋白在总蛋白中的比值,可作为PDLC增殖的理想的辅助因子.
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牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白-中药双黄补复合体对犬牙周组织再生的实验性研究
目的 牙周炎是常见的口腔疾病之一,可导致牙周支持组织的破坏,终造成牙齿丧失.组织工程技术在牙周组织修复再生中的应用为牙周炎的治疗开辟了新途径.研究旨在探讨牙龈成纤维细胞(gingival fibroblast,GF)-玉米醇溶蛋白(Zein)-中药双黄补复合体促进犬牙周组织修复再生的作用.方法 以2只Beagle犬双侧上颌5445、下颌743347共20个牙位作为实验部位,将其配对分为4组,每组5个牙位分别制备骨缺损模型.实验Ⅰ组:翻瓣术+Zein支架植入;实验Ⅱ组:翻瓣术+GF-Zein支架植入;实验Ⅲ组:翻瓣术+ GF-Zein-中药双黄补复合体植入;对照组:单纯翻瓣术.于术后3个月进行组织学观察、测量及锥形束CT(cone-beam computed tomography,CBCT)检查.结果 实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组术后3个月新生牙槽骨高度均高于对照组(P<0.05),其中实验Ⅲ组新骨生成效果更显著(P<0.01);实验Ⅲ组新生牙骨质的测量值比对照组相应值高(P<0.05).实验Ⅱ组、实验Ⅲ组术区牙槽骨与正常牙槽骨的骨密度差值百分比低于对照组的相应值(P<0.05),实验Ⅰ组与对照组差异无统计学意义(P>0.05).结论 中药双黄补可促进犬牙周骨缺损的修复,有利于牙周组织的再生.
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中药双黄补对人牙龈成纤维细胞损伤的保护作用
目的:观察中药双黄补对人牙龈成纤维细胞由机械划痕损伤、内毒素脂多糖(LPS)损伤所致的保护作用.方法:采用组织块法体外培养人牙龈成纤维细胞.水提醇沉法制备双黄补提取液.采用四甲基偶氮唑蓝法测定培养细胞增殖活性的变化.建立体外细胞划痕创伤模型,加入双黄补培养24 h观察细胞迁移.绘制生长曲线观察双黄补对LPS介导的成纤维细胞增殖能力的影响.结果:与对照组相比,中药双黄补作用于人牙龈细胞后,能明显促进细胞的增殖,加快细胞的移动速度,改善由LPS介导的细胞损伤后的增殖能力.结论:中药双黄补能促进人牙龈成纤维细胞的增殖,对人牙龈成纤维细胞由机械划痕损伤、LPS损伤具有较好的保护作用.
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双黄补对牙周组织修复再生的光镜及扫描电镜观察
目的 探讨牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白支架-双黄补复合体对牙周组织修复的作用.方法 以2只Beagle犬双侧上颌54 (⊥)45、下颌8743(┬)8,共24个牙位制备牙周缺损模型,将其分为四组,每组6个牙位:玉米醇溶蛋白支架组;牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白支架复合体组;牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白支架-双黄补复合体组;空白对照组,分别于术后3个月进行组织学及扫描电镜观察.结果 术后3个月,牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白支架-双黄补复合体组组织学观察可见新生牙槽骨内见趋于成熟的哈弗氏系统,且生长高度为(1.340±0.020) mm,显著高于其余三组新生牙槽骨高度(P＜0.05).扫描电镜下,牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白质支架-双黄补复合体组牙槽骨可见趋于成熟的哈弗氏系统,而牙龈成纤维细胞-玉米醇溶蛋白质支架组及玉米醇溶蛋白质支架组仅可见排列紊乱的骨小梁结构,空白对照组仅可见纤维性成骨.结论 中药双黄补可促进新生牙槽骨生长,利于牙周组织的修复.
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双黄补和转化生长因子β1对牙周膜细胞的增殖分化的调控作用的比较
目的:探讨传统中药双黄补(黄连,黄岑,骨碎补)和转化生长因子β1对体外培养的人牙周膜细胞增殖和分化功能的影响.方法:本研究通过体外培养人牙周膜细胞(periodontal ligament cell,PDLCs),应用双黄补(黄连,黄芩,骨碎补)提取液作为辅助因子及转化生长因子β1作为生长因子,分成四组(A)双黄补(B)转化生长因子β1(C)双黄补加转化生长因子β1(D)对照组,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖情况,羟脯氨酸法测定胶原蛋白占总蛋白比值.结果:双黄补组与对照组及其他各组比较,明显促进人牙周膜细胞增殖,增加胶原蛋白的比值,有显著性差异(P<0.05).A,B,C各组组间比较无显著性差异.随着作用时间的延长,细胞的OD值逐渐增大,在第5天达到大.结论:双黄补水提液对比转化生长因子β1有明显促进人牙周膜细胞增殖,明显提高胶原蛋白在总蛋白中的比值的作用,可作为人牙周膜细胞增殖的理想的辅助因子.
