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新疆塔里木马鹿茸多肽对小鼠前成骨细胞的影响
目的：探讨新疆塔里木马鹿茸多肽对小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)的作用机制。方法以BCA蛋白质定量试剂盒测定马鹿茸多肽样品的浓度；体外培养MC3T3-E1细胞，采用BCIP/NBT碱性磷酸酶(ALP)显色试剂盒染色；诱导分化形成矿化结节，进行茜素红染色；将MC3T3-E1细胞置于马鹿茸多肽高、中、低(10、1.0、0.1μg/mL)3个浓度的培养基中培养，采用MTT法和微量酶标法检测马鹿茸多肽不同浓度对MC3T3-E1细胞增殖和ALP合成的影响。结果 BCA 蛋白质定量检测结果显示，马鹿茸多肽蛋白浓度为0.07 mg/mL。体外培养 MC3T3-E1细胞ALP染色呈淡蓝色，阳性率为90%；矿化结染色呈红色。与对照组比较，第3、7日马鹿茸多肽高、中、低剂量组可促进MC3T3-E1细胞增殖，且呈现剂量依赖效应；第3日马鹿茸多肽高、中、低剂量组均可促进MC3T3-E1细胞分泌ALP(P＜0.01)，且呈现一定的剂量效应。结论塔里木马鹿茸多肽通过促进MC3T3-E1细胞增殖和ALP合成的分泌，达到治疗骨质疏松症的作用。
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不同来源鹿茸肽对成骨细胞作用的比较
目的 比较塔里木马鹿茸肽与梅花鹿茸肽对成骨细胞增殖分化的影响,并分析药材差异性.方法 以相同工艺从两种鹿茸中提取不同肽段的鹿茸肽.以MTT法及PNPP法检测不同肽段鹿茸肽对原代大鼠成骨细胞的增殖分化作用.采用粉末鉴别及薄层色谱法分析塔里木马鹿茸与梅花鹿茸的结构及甘氨酸含量差异.以凝胶电泳法及HPLC法分析鹿茸肽成分差异.结果 从塔里木马鹿茸中分离得到3种不同肽段的鹿茸肽,分别为相对分子质量(Mr)＞ 30 kD组分(样A)、Mr5～10 kD组分(样B)、Mr＞5 kD组分(样C);从梅花鹿茸中分离得到3种不同肽段的鹿茸肽,分别为Mr＞ 30 kD组分(样D)、Mr5～10 kD组分(样E)、总肽组分(样F).样B和C显著促进大鼠成骨细胞增殖并上调碱性磷酸酶活性,样F仅具有促进细胞增殖作用,其余组分作用微弱.塔里木马鹿茸与梅花鹿茸粉末形态类似,但含有更多甘氨酸成分,其鹿茸肽含更多潜在活性成分.结论 塔里木马鹿茸与梅花鹿茸存在较大差异,前者包含抗骨质疏松成分.
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新疆不同产区塔里木马鹿鹿茸对比研究
目的 检测新疆5个不同产地塔里木亚种马鹿鹿茸质量性状、多肽(42,26,15 kDa)含量及其对小鼠前成骨细胞增殖和活性的影响.方法 对比分析不同产地鹿茸性状(直径、干鲜比、茸长、眉枝、水分、总灰分和浸出物);采用BCA蛋白定量试剂盒测定鹿茸多肽中的蛋白含量并作聚类分析,采用SDS-PAGE电泳法鉴别鹿茸多肽类型;建立小鼠成骨细胞模型,采用MTT及ELISA法分析其对细胞增殖和功能的作用.结果 不同产地塔里木鹿茸药材中鹿茸质量性状存在差异,塔里木河沙雅县鹿茸质量性状较好,鹿茸多肽含量高,显著提高了小鼠成骨细胞增殖率40.74％及碱性磷酸酶活性.结论 新疆沙雅地区塔里木亚种马鹿鹿茸活性较好.本实验为建立塔里木马鹿亚种鹿茸质量标准的提升提供了数据支撑.
