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麦粒灸对小鼠运动疲劳后心肌细胞凋亡的影响
目的:通过观察艾灸对小鼠运动疲劳后心肌细胞凋亡相关因子的影响及组蛋白乙酰化酶p300 (histone acetyltransferases p300,p300)、CREB结合蛋白(CREB biding protein,CBP)与细胞凋亡的关系,探讨p300、CBP在艾灸抗心肌细胞凋亡中的作用.方法:清洁级雄性昆明种小鼠60只随机分为对照组、运动组、麦粒灸组,每组20只.各组相同环境饲养,对照组不运动,不施灸;运动组及麦粒灸组进行无负重游泳训练,训练时间由每天30 min逐步延长至90 min,持续21d.麦粒灸组于每天游泳后1h取“足三里”“关元”进行麦粒灸治疗,每穴灸5壮,每日1次,共21d.末次游泳结束24 h后,取各组小鼠心脏采用免疫组化法检测心肌细胞凋亡因子Fas(factor associated suicide,Fas)、B淋巴细胞瘤-2基因(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)及p300、CBP 的表达.结果:与对照组比较,运动组小鼠心肌细胞凋亡率显著升高(P＜0.01),视野内可见密集分布的凋亡小体,且着色较深,心肌细胞中Fas蛋白的表达显著增加(P＜0.01),Bcl-2、p300蛋白、CBP表达减弱(均P＜0.01);麦粒灸组可见均匀分布的凋亡小体,但着色较浅.与运动组比较,麦粒灸组小鼠心肌细胞凋亡率下降(P＜0.05),小鼠Fas蛋白表达降低(P＜0.05),心肌细胞中Bcl-2、p300蛋白、CBP表达增强(均P＜0.05).结论:艾灸可以通过促进小鼠疲劳运动后心肌细胞中p300、CBP的表达,抑制细胞凋亡过程的启动,从而减少大运动量后的小鼠心肌细胞的凋亡,保护心脏功能.
关键词： 运动疲劳 麦粒灸 心肌细胞凋亡 组蛋白乙酰化酶p300 CREB结合蛋白 -
CREBBP基因突变导致的伴有双侧股骨头坏死的Rubinstein-Taybi综合征1例
Rubinstein-Taybi综合征(Rubinstein-Taybi syndrome,RSTS)是一类罕见的常染色体显性遗传病,主要表现为特殊面容、智力损害、生长迟缓、指趾粗大.本研究患者具有典型的RSTS特殊面容及生长迟滞,同时存在不典型的双侧股骨头坏死症状.通过二代测序技术及Sanger测序验证,发现该患儿CREBBP基因14外显子存在无义突变c.2464G ＞T(p.G822*),诊断RSTS明确.结合文献,对RSTS临床特征、基因突变及诊疗策略进行探讨.
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CREBBP基因突变所致Rubinstein-Taybi综合征二例临床和遗传学特征
目的 探讨Rubinstein-Taybi综合征的临床及遗传学特点.方法 对2013年3月至4月北京协和医院儿科临床诊断为Rubinstein-Taybi综合征的2例患儿,分析其临床特征,采用二代测序技术,进行CREBBP和EP300基因分析,再经Sanger测序对突变进行验证.结果 2例患儿身高分别是60 cm、99 cm,低于同年龄同性别正常儿童身高第3百分位,均有发际低,头发和眉毛浓密,睫毛长,双眼内眦赘皮和高眉弓等,且拇指和第一脚趾宽而扁,例2伴有语言发育落后等.在例1检测到1个位于CREBBP基因上的错义突变:c.3535A＞G,p.Ser1179Gly;在例2检测到1个同样位于CREBBP基因上的微缺失突变c.4995_4999delCGCCT,p.Ala1666Pro fs66x.检测到的2个突变均为首次报道,缺失突变的致病性明确;检测到的错义突变,根据氨基酸的保守性、公共数据库资料和患儿典型临床表现,推测其为致病突变.结论 Rubinstein-Taybi综合征主要表现为生长发育落后,特殊的面容及指、趾畸形;CREBBP为致病基因之一,检测到该基因突变可以在基因水平确诊Rubinstein-Taybi综合征.
关键词： Rubinstein-Taybi综合征 遗传性 基因 显性 CREB结合蛋白 -
P300与CREB结合蛋白在神经病理性痛形成过程中的表达及分布
目的 观察坐骨神经慢性压榨损伤(CCI)模型大鼠脊髓灰质后角组蛋白乙酰转移酶P300与CREB结合蛋白(CBP)表达的变化及其细胞分布.方法 将雄性SD大鼠48只随机分为空白组(12只)、假手术组(12只)、CCI造模组(24只).建模成功后,应用免疫组织化学法及免疫荧光法观察P300及CBP的表达及定位.结果 与空白组和假手术组比较,CCI模型组大鼠脊髓灰质后角细胞核内P300/CBP表达量上升(P＞0.05),并伴有机械痛与热痛行为学特征,且于造模后14d达到峰值(P300数值为478.35±22.61,CPB为891.55±32.19),采用免疫荧光法观察与其共定位的细胞为神经元细胞.结论 P300/CBP与神经病理性痛的发生有关,且在疾病发展过程中仅分布于脊髓灰质后角的神经元细胞内.
关键词： 神经病理性痛 组蛋白乙酰转移酶P300 CREB结合蛋白 -
CBP基因沉默对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生的影响
目的 观察小干扰RNA (siRNA)重组慢病毒介导的CREB结合蛋白(CBP)基因沉默对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜增生的影响,并探讨其作用机制.方法 雄性SD大鼠48只,随机分为4组:假手术组、PBS对照组、慢病毒介导CBP基因siRNA转染组(CBP-siRNA-Lenti组)及慢病毒介导非CBP同源序列siRNA转染组(NC-siRNA-Lenti组),建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,术后28天处死动物.分别用实时定量PCR、Western Blot检测大鼠颈动脉CBP和乙酰化核因子κB p65(NF-κB p65)的表达水平；病理组织学观察血管内膜增生情况；免疫组织化学染色对损伤血管壁增殖细胞核抗原(PCNA)的表达进行评估.结果 术后28天,与PBS对照组和NC-siRNA-Lenti组比较,CBP-siRNA-Lenti组CBP mRNA和蛋白的表达显著下调(P均＜0.05),CBP沉默能明显抑制新生内膜面积(0.108 ±0.008 mm2比0.238±0.022 mm2、0.252±0.016 mm2,P ＜0.05)、内膜与中膜面积比(0.706±0.062比1.483 ±0.136、1.497±0.137,P＜0.05)的增加,及下调血管壁乙酰化NF-κB p65和PCNA的表达水平(P均＜0.05).结论 慢病毒介导的CBP基因沉默能有效地抑制颈动脉球囊损伤后新生内膜的形成,其机制可能与抑制NF-κB p65的过度乙酰化有关.
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姜黄素对带状疱疹后神经痛大鼠脊髓背角及背根神经节p-CREB表达的影响
目的 观察姜黄素对带状疱疹后神经痛大鼠脊髓背角及背根神经节p-CREB表达的影响.方法 雄性SD大鼠80只,采用随机数字表法,将其分为4组(n=20):对照组(C组),模型组(D组),姜黄素1组(DCur1),姜黄素2组(DCur2).对照组(C组)在后爪注射0.9％氯化钠溶液;模型组(D组)在后爪注射人乳头瘤病毒-1(HSV-1,浓度为106/100μl,注射容积50μl)制备疱疹后神经痛动物模型;DCur1组和DCur2组于造模5d后,分别腹腔内注射姜黄素100、200 mg/kg,1次/d,持续7d.于造模前、造模后5d(治疗前)及治疗结束后1、7、14d,测定大鼠机械缩足阈值、热缩足潜伏期;各组于治疗结束后14d时处死8只大鼠,检测脊髓背角和背根神经节(DRG)中磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)的表达.结果 与C组比较,其他3组造模后5d及治疗后1、7d时MWT值均下降,TWL值均缩短(P＜0.05);与D组比较,治疗后7、14d时,DCur1组和DCur2组MWT值均升高,TWL值均延长,DCur2组变化更明显(P＞0.05).与C组比较,其他3组大鼠脊髓背角区和背根神经节p-CREB表达均升高(P＜0.05);与D组比较,DCur1组和DCur2组p-CREB表达均下调,且DCur2组下调更明显(P＜0.05).结论 姜黄素可缓解带状疱疹后神经痛,其机制与脊髓背角和背根神经节p-CREB过度表达下调有关.
