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人参水提物对H2O2损伤的H9c2细胞的保护作用研究
目的:研究人参水提物对H2O2损伤的H9c2心肌细胞的保护作用.方法:以100μ mol/LH2O2诱导H9c2心肌细胞建立氧化应激损伤模型,人参水提物在建模前12h加入,共培养24h后,分别用MTT法检测细胞增殖活力,通过比色法、WST-l法和TBA法分别检测培养液上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果:H2O2处理后,细胞存活力降低为原来的48.7％,当生药浓度为0.1mg/mL时人参水提物能使得细胞得到保护,LDH漏出量降低至19.3％,MDA含量降低了23.1％;当生药浓度＞1.0mg/mL时,与模型组比较,加药组使得细胞活力提高1.5倍以上,LDH漏出量多降低98％,同时细胞内的SOD活性多升高为模型组的2倍以上,MDA含量多降低61.5％(P＜0.05,P＜0.01).结论:人参水提物对H2O2损伤的H9c2心肌细胞具有保护作用,有望开发为人参生物活性评价的方法之一.
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人参水提物在Caco-2模型的吸收特征
目的 建立Caco-2细胞单层模型,探讨人参水提物的吸收特征.方法 将Caco-2细胞以1×105 个/cm2的密度接种于Millicell小室,培养21 d,以TEER值、阳性对照药荧光黄和普萘洛尔的Papp值来评价模型的完整性、紧密性和通透性.进行人参水提物AP-BL和BL-AP两个方向的转运实验,用HPLC/MS对标志性成分进行分析,计算Papp、外排比(Efflux ratio)和转运量.结果 TEER值和阳性对照药的Papp值均达到要求.水提物中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc和人参皂苷Ro的Papp AP-BL分别为(4.97±1.28)×10-6、(3.88±0.93)×10-6、(2.54±0.18)×10-6、(2.51±0.44)×10-6、(2.21±0.46)×10-6和(0.65±0.09)×10-6cm·s-1,Papp BL-AP分别为(4.61±0.67)×10-6、(4.32±0.83)×10-6、(3.05±0.37)×10-6、(3.53±0.27)×10-6、(3.24±0.24)×10-6和(1.45±0.16)×10-6 cm·s-1.人参皂苷Rg1单体的Papp AP-BL为(0.39±0.02)×10-6 cm·s-1,Papp BL-AP为(0.47±0.01)×10-6 cm·s-1.结论 Caco-2细胞单层模型建立成功.水提物中三醇型人参皂苷的吸收优于二醇型,吸收一般;齐墩果烷型人参皂苷Ro吸收差,可能存在主动外排作用.水提物中其它成分可促进人参皂苷Rg1的吸收.
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人参水提物对β淀粉样蛋白诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用
目的 研究人参水提物(water extracts of Ginseng, WEG)对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用.方法 用Aβ25-35诱导体外培养的SH-SY5Y细胞凋亡,并用WEG进行保护.MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258染色观察细胞形态的变化,流式细胞仪分析亚二倍体峰和DNA含量,检测细胞凋亡.结果 Aβ25-35 50 μmol/L诱导SH-SY5Y细胞72 h后,镜下观察到细胞变圆,损伤并聚集,Hoechst33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,流式细胞仪检测到明显的亚二倍体峰,凋亡率达(37.30±0.69)%.而Aβ25-35和不同浓度的WEG(1,5,10,15 mg/ml)同时处理后,细胞形态明显改善,MTT值显著高于Aβ25-35处理组(P<0.01),流式细胞仪检测凋亡率分别降低到(14.70±3.18)%,(7.23±1.51)%,(6.14±0.40)%,(5.88±1.33)%,呈现剂量依赖关系.结论 人参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用.
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人参水提物对乙酰胆碱酯酶的抑制作用研究
目的:研究体外测定不同提取工艺制备的人参水溶性提取物的乙酰胆碱酯酶(AchE)抑制活性,为人参中AchE抑制剂的提取分离提供依据.方法:运用正交试验设计,提取人参水溶性有效部位.采用改良的Ellman法,测定各水提物对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用.结果:通过正交设计试验得到l6个样品,经测定,第15号及6号样品表现出较高的AchE抑制活性.结论:人参中含有较高活性的AchE抑制剂,其佳提取工艺为提取温度4℃,料液比1∶15,pH=6～10,提取2～4次,每次18～24h.
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人参水提物对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用
目的 研究人参水提物(WEG)对四氢吡啶离子(MPP+)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响.方法 体外培和SH-SY5Y细胞,建立MPP+致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予WEG干预.应用MTT比色法检测细胞活力;Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 0.5 mmol·L-1MPP+作用于SH-SY5Y细胞60 h,MTT值降低到(51.97%±2.46%)(P＜0.01),Hoechst 33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,凋亡率增加到(40.52%±1.68%)(P＜0.01),而WEG则能明显改善SH-SY5Y细胞的凋亡特性,显著升高其MTT值,降低凋亡率(P＜0.05).结论 人参水提物对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有显著的保护作用.
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人参超微粉及水提物对自发性高血压大鼠血压的影响
目的 观察人参超微粉及水提物对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用.方法 将80只SHR随机分为对照组、阳性药卡托普利组、人参超微粉0.5、1.0、2.0g/kg组及人参水提物0.1、0.2、0.4g/kg组,每组10只.采用尾动脉测压法测量给药前及给药后1、3、7、10、15、30、45、60、75、90天大鼠血压,对比人参超微粉及水提物对SHR的急性降压作用和慢性降压作用.结果 人参超微粉1.0g/kg组于给药15、30、45、60、75、90天可使SHR收缩压明显降低(P＜0.05或P＜0.01),于给药30、45、60、75、90天可使SHR舒张压明显降低(P＜0.05或P＜0.01),人参超微粉0.5g/kg及人参水提物0.4g/kg组于给药45、60、75、90天可使SHR收缩压及舒张压均明显降低(P＜0.05),人参超微粉0.25g/kg及人参水提物0.1、0.2g/kg组对SHR各时间点的收缩压及舒张压均无明显影响(P＞0.05).结论 人参超微粉及水提物不具有急性降压作用,长期服用可产生降压作用,人参超微粉的作用优于人参水提物.
