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  • 川芎嗪对甲型流感病毒H1N1诱导炎性细胞因子分泌作用的研究

    作者:于卓男;林树鹏;顾立刚;吴珺;邱泽计;刘晓婷

    目的:研究川芎嗪(TMP)对甲型流感病毒H1N1感染的人肺腺癌上皮细胞(A549)中炎性细胞因子的影响.方法:培养A549细胞,甲型流感病毒H1N1感染A549后,分为细胞对照(N)组、H1V1感染(M)组、奥司他韦对照(D)组,TMP高剂量(S)组及TMP低剂量(J)组.采用RT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中IL-1β、IL-10、INF-γ、TNF-α mRNA及蛋白表达.结果:与N组比较,M组IL-1β、IL-10、TNF-αmRNA表达显著升高,而INF-γ mRNA表达显著降低(P<0.01);与M组比较,D、S、J组IL-1β、IL-10、TNF-α mRNA表达均明显降低(P<0.01).M组IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-α蛋白表达较N组显著升高(P<o.05);与M组比较,S、J组IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-α均显著降低(P<0.05,P<0.01).结论:TMP可抑制流感病毒感染后炎性细胞因子IL-1β、IL-10、INF-γ和TNF-αmRNA表达及蛋白分泌,减轻炎性反应,并恢复机体免疫功能的稳定和平衡.

  • 鱼腥草注射液体内抗流感病毒药效学研究

    作者:刘方舟;时瀚;时宇静;刘颖;金亚宏;高英杰;郭姗姗;崔晓兰

    本研究评价新、老两种鱼腥草注射液制剂在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用.采用甲型H1N1流感病毒FM1和PR8株,滴鼻感染正常小鼠和免疫低下小鼠造成肺炎模型,分别进行治疗性和预防性给药,观察小鼠肺指数.结果显示:鱼腥草注射液新、老两种制剂对两种流感病毒感染引起的小鼠肺部炎症均有明显治疗作用.且小剂量时新制剂对FM1株治疗作用优于老制剂;新、老两种制剂对两种病毒感染免疫低下小鼠引起的肺部炎症有明显预防作用.且小剂量时老制剂对PR8病毒株的预防作用优于新制剂.鱼腥草注射液可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状.降低H1N1感染小鼠的肺指数.在体内对H1N1流感病毒感染有较好的防治作用.

  • 黄金方对流感病毒FM1株感染小鼠肺组织病毒载量及免疫功能的影响

    作者:何萍;崔晓兰;时宇静;高英杰;金亚宏;刘方舟;钟菊迎;刘颖;李贻奎;李连达

    目的:观察黄金方对甲型H1N1流感病毒FM1株感染小鼠肺组织病毒载量,IFN-γ及血清CD4+/CD8比值的影响.方法:采用滴鼻感染流感病毒FM1株建立小鼠肺炎模型,治疗4d后采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肺组织中相对病毒载量,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中CD4+和CD8+含量及肺组织IFN-γ含量.结果:黄金方大、中、小剂量组(6,3,1.5 g·kg-1)均可明显降低感染流感病毒FM1株小鼠肺组织病毒载量,与模型对照组比较有显著性差异(P <0.01,P<0.05),大、中剂量组可明显提高肺组织中IFN-γ水平(与模型对照组比较,P<0.01),中、小剂量组可提高血清CD4+/CD8+比值,与模型对照组比较差异显著(P<0.05).结论:黄金方在体内对H1N1流感病毒FM1株感染有较好的治疗作用,其治疗作用可能是通过调节免疫功能来实现的.

  • 半枝莲总黄酮抗甲型H1N1流感病毒感染的药效学研究

    作者:赵铁华;邓淑华;杨鹤松;崔晓兰

    半枝莲为唇形科植物半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)的干燥全草,具有清热解毒、化瘀、利尿等功效[1],黄酮类化合物是其主要有效成分[2].本文报道了我们采用大孔树脂吸附技术制备的半枝莲总黄酮对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的药效实验结果.

  • 鱼腥草注射液抗甲型流感病毒实验研究

    作者:郝莉;杨奎

    目的 探讨鱼腥草注射液抗实验鼠甲型流感病毒的效果.方法 小鼠随机分为六组,病毒感染后分别予病毒唑、不同剂量鱼腥草注射液或空白处理.结果 鱼腥草注射液(4.0g/kg、2.0g/kg)对小鼠肺指数、死亡率、血凝滴度和体重下降有控制作用.结论 鱼腥草注射液有良好的抗甲型流感病毒效果.

  • 流感病毒感染后接种肺炎链球菌继发中耳炎小鼠模型的建立

    作者:范芳梅;马毓蓉;王子萌;王维;董益麟;何纤;张欣欣;何於娟

    目的 建立甲型流感病毒(influenza A viruses,IAV)感染后继发肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Spn)感染性中耳炎小鼠模型.方法 经鼻感染不同剂量甲型H1N1型流感病毒PR8,感染后第5天听泡穿刺接种Spn建立C57BL/6小鼠继发感染中耳炎模型,观察小鼠体质量变化和生存率;于建模后不同时间点处死小鼠,制备中耳组织切片HE染色,收集中耳灌洗液进行细胞及细菌计数,ELISA检测灌洗液中炎症因子.结果 PR8预感染可导致Spn感染性中耳炎小鼠死亡,而单纯Spn感染小鼠无死亡,小鼠体质量变化及生存率与病毒剂量呈剂量依赖方式;PR8感染后继发Spn感染小鼠中耳腔炎症细胞浸润明显多于单纯Spn感染小鼠,且细菌载量明显增加;PR8继发Spn感染小鼠中耳腔炎症因子IL-6、IFN-γ与单独Spn感染小鼠差异无统计学意义(P>0.05),而TNF-α明显增高(P<0.05).结论 成功建立了IAV感染后继发Spn感染性中耳炎C57BL/6小鼠模型.

  • 甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白真核表达载体的构建与表达

    作者:张文帅;卞倩;迟莹;温恬;李燕;焦永军

    [目的]构建甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白真核表达载体,并在293T细胞中表达.[方法]采用RT-PCR技术,从甲型流感病毒H1N1毒株提取的病毒总RNA中,扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T Vector中构建pMD18-T-NS1质粒,双酶切pMD18-T-NS1与PXJ40-HA后,构建真核表达载体PXJ40-HA-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过免疫印迹法鉴定NS1蛋白的表达.[结果]酶切、测序证明重组真核表达载体PXJ40-HA-NS1构建成功,免疫印迹法可见NS1基因编码蛋白表达.[结论]成功构建甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白真核表达载体PXJ40-HA-NS1,并在293T细胞中传染表达,该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1蛋白的细胞模型和NS1蛋白功能研究提供了材料.

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